세포 색소b5는（사이토크롬 b5는）함량 측정 시약함 설서

미량법 100T/96S

정식으로 측정하기 전에 반드시 취해야 한다 2-3 예상 차이가 비교적 큰 견본을 예측하여 결정하다.측정 의미:

세포 색소P450 효소는 주로 간에 존재하는 동공효소로서 외원물질대사에서 중요한 역할을 하는데 특히 약물과독물의 대사.세포 색소 P450 세포색소b5는 예P450 효소계의 두 헤모글로빈 단백질, 그 비율의 변화와 P450 대사활성과 밀접한 관련.

측정 원리:

산화형 세포 색소 b5는 렌다이아 * 복원 후 424nm 최대 흡수봉이 있어 측정을 통해 424nm 와 490nm 흡광값의 차이로 계산할 수 있다나세포 색소b5는의 함량.

세포색소 b5 함량 측정 시약함 P450 시리즈

구성:

시약 1: 분제×2 병,4℃저장.사용하기 전에 각자 추가하다. 100ml 증류수, 충분히 용해되다.

작업액 조제:

사용하기 전에 조제하고, 일회용 장갑을 끼고, 시약 세 병 뚜껑을 조심스럽게 열고, 시약 2를 첨가한다 20ml 충분히 용해되고,4℃빛을 피하여 보존 가능 1 주.

구체적인 제품의 매개 변수는 제품 설명서를 받은 매개 변수를 기준으로 한다

자체 장비 및 장비:

일반 원심분리기, 과속 원심분리기, 조절식 이액총, 자외선 분광 광도계/효소 표시기, 미량 유리 비색 그릇/96 대시보드, 및 찜증류수.

샘플 중 세포 색소 b5는 추출：

1、세포핵, 미토콘드리아 등 대분자물질 제거:약속 0.5g 조직, 가입 1ml 시약 1, 얼음 위를 충분히 연마하고,10 000g 4℃떨어지다마음 30분, 맑은 액체를 꺼내 과속 원심관으로 들어간다.

2、굵은 미립자:100 000g，4℃원심 60분, 맑은 액체를 버려라.

3、헤모글로빈 등 불순물 제거:방향 단계 2 침전 중가 1ml 시약 1, 꼭 덮은 후 충분히 진동 용해,100 000g 원심 30분버리다상청액.

4、측정 대기액:방향 단계 3 침전 중 시약 2 0.5ml의, 꽉 덮은 후 충분히 진동 용해, 즉 측정 대기액, 이 측정 대기액은 당일 측정해야 한다.

세포 색소 b5는 함량 측정 작업:

1. 분광 광도계/효소 측정기 예열 30 분。

2. 작업액 배치 25℃수욕 중 예열 30 분。

3. 빈 파이프:取 1ml 유리 비색 그릇, 첨가 10 μl 증류수,200μl 작업액, 실온 정지 2 분，424nm 와 490nm 처흡광원,424nm 처흡광값은A 공백관 1，490nm 처흡광값은A 공백관 2。△A 공백관=A 공백관 1-A 빈백관 2

4. 측정관:取 1ml 유리 비색 그릇, 첨가 10 μl 측정 대기액,200μl 작업액, 실온 정지 2 분，424nm 와 490nm 처흡광원,424nm 처흡광값은A 측정관 1，490nm 처흡광값은A 측정관 2。

△A 측정관=A 측정관 1-A 측정관 2。

주의: 빈 파이프만 만들면 됩니다.

샘플 세포 색소 b5는 함량 계산 공식:

a.미량의 석영 비색 그릇을 사용하여 측정한 계산 공식은 다음과 같다

（1）단백질 농도로 계산하다

세포 색소b5는 함량(nmol/mg) 프로트) = (△A 측정관-△A 공백관÷(ε×d) ×V 반총÷（Cpr × V 모양）

=122.8×(△A 측정관-△A 공백관÷Cpr

（2）견본의 질량에 따라 계산하다.

세포 색소b5는 함량 (nmol/g의 신선하고 무겁다)= (△A 측정관-△A 공백관÷(ε×d) ×V 반총×（V 견본 합계÷V 모양）÷W

=61.4×(△A 측정관-△A 공백관÷W

ε: 환원형 세포 색소b5는 나몰 소광계수,171×10^-6 L/nmol/cm의；d: 비색 그릇 광경 (cm의），1cm； V 반총: 반응체계 총체적,210 μl = 2.1 × 10^-4 L；Cpr는: 측정 대기 액 단백질 농도 (mg/ml의), 별도로 측정해야 합니다.V샘플: 반응 체계에 첨가하여 측정할 액체 부피,10 μl = 0.01 ml；V샘플 총량: 측정 대기 액체 총 부피,0.5 ml의；W: 샘플 품질 (g）。

b.사용 96 대시보드 측정의 계산 공식은 다음과 같습니다.

（1）단백질 농도로 계산하다

세포 색소b5는 함량(nmol/mg) 프로트) = (△A 측정관-△A 공백관÷(ε×d) ×V 반총÷（Cpr × V 모양）

=245.6×(△A 측정관-△A 공백관÷Cpr

（2）견본의 질량에 따라 계산하다.

세포 색소b5는 함량 (nmol/g의 신선하고 무겁다)= (△A 측정관-△A 공백관÷(ε×d) ×V 반총×（V 견본 합계÷V 모양）÷W

=122.8×(△A 측정관-△A 공백관÷W

ε: 환원형 세포 색소b5는 나몰 소광계수,171×10^-6 L/nmol/cm의；d：96 공판 광경 (cm의），0.5cm의； V 반총: 반응체계 총체적,210 μl = 2.1 × 10^-4 L；Cpr는: 측정 대기 액 단백질 농도 (mg/ml의), 별도로 측정해야 합니다.V샘플: 반응 체계에 첨가하여 측정할 액체 부피,10 μl = 0.01 ml；V샘플 총량: 측정 대기 액체 총 부피,0.5 ml의；W: 샘플 품질 (g）。

세포색소 b5 함량 측정 시약함 P450 시리즈