아세틸덴 알칼리 에스테르 효소(AchE는）활성 측정 시약함 설명서

미량법 100T/96S

정식으로 측정하기 전에 반드시 취해야 한다 2-3 예상 차이가 비교적 큰 견본을 예측하여 결정하다.측정 의미:

AchE는 사안산수분해효소에 속하며 각종 동물조직과 혈청에 널리 존재한다.AchE는 촉매 아세틸단 알칼리 (Ach는）수해신경전도 조절에 중요한 역할을 한다.

측정 원리:

AchE는촉매Ach는수해 생성 dan 알칼리, dan 알칼리와 이황 대 니트로벤젠산（DTNB）역할 생성 5-메타돈-니트로벤젠산（TNB）； TNB는에서 412nm흡수봉이 있어 측정을 통해 412nm흡광도 증가 속도, 계산 AchE는활성

아세틸덴 알칼리 에스테르 효소 활성 측정 시약함 P450 시리즈

구성:

시약 3: 분제×1 지,4℃저장.사용 전 가입 1.3 ml 시약 2, 충분한 진동 용해.시약 4: 가루약×1 지,4℃저장.사용 전 가입 1.3 ml 시약 2, 충분한 진동 용해.

구체적인 제품의 매개 변수는 제품 설명서를 받은 매개 변수를 기준으로 한다

자체 장비 및 장비:

가시 분광 광도계/효소 표시기, 미량 석영 비색 그릇/96 공판, 저온 원심분리기, 수욕솥, 조절식 이액총과 증류수.

굵은 효소액체 추출：

1. 조직: 조직 품질에 따라 (g): 시약 1 부피(ml)위 1：5~10의 비율 (약속 을 채택할 것 을 건의 하다 0.1g조직, 가입 1ml시약1) 얼음목욕을 하여 풀을 고르게 하고,8000g 4℃의원심 10분, 맑은 액체를 채취하여 측정을 기다리다.

2. 세균, 진균: 세포 수량에 따라 (10⁴ 개): 시약 1체적(ml）위 500~1000：1 의 비율 (제안 500 만세포 가들 1ml 시약 1），빙욕 초음파 파쇄세포(전력 300w, 초음파 3 초, 간격 7 초, 총 시간 3분）; 그런 다음 8000g， 4℃, 원심 10분, 상청을 취하여 얼음 위에 놓고 측정을 기다리다.

3. 혈청 등 액체: 직접 측정.

측정 작업:

1. 분광 광도계/효소 측정기 예열 30 분, 파장 조절 412 nm, 증류수 제로.

2. 시약 2배치 37℃수욕 중 예열 30분。

3. 미량의 석영 비색 그릇을 취하다./96 슬레이트, 순서대로 추가 20μl상청액,160 μl시약 2,10μl 시약 3화 10μl시약 4, 빨리 섞기고르다412nm 처 측정3분 내흡광치 변화, 제10초 흡광값은A1，第190s 흡광값은A2는。△A 측정관= A2-A1。 AchE는활성 계산:

a.미량의 석영 비색 그릇을 사용하여 측정한 계산 공식은 다음과 같다

1. 조직AchE는 활성

（1）단백질 농도로 계산하다

활성 단위 정의: 단백질 밀리그램당 분당 촉매 생성 1nmol의 TNB는 의 효소량은 1 효소 활성 단위.

AchE는 효소 활성(nmol/분/mg) 프로트)= (△A ÷ ε ÷ d × V 반총×10⁹)÷（Cpr는 × V 모양）÷T

= 245×△A ÷ Cpr

（2）견본의 질량에 따라 계산하다.

활성 단위 정의: 조직당 분당 촉매 생성 1nmol의 TNB는 의 효소량은 1 효소 활성 단위.

AchE는 효소 활성(nmol/분/g) 신선하고 무겁다)= (△A ÷ ε ÷ d × V 반총×10⁹)÷（W × V 모양÷V 견본 합계）÷T

=245×△A ÷ W

2. 세균, 세포AchE는 활성

활성 단위 정의: 각 10⁴ 개 세포 는 매 분 촉매 로 생성된다 1nmol의 TNB는 의 효소량은 1 효소 활성 단위.

AchE는 효소 활성(nmol/분/10)⁴ 셀)= (△A ÷ ε ÷ d × V 반총×10⁹)÷(세포 수× V 모양÷V 견본 합계）÷T

=245×△A ÷세포 수

3. 혈청AchE는 활성

활성 단위 정의: 혈청 밀리리터당 분당 촉매 생성 1nmol의 TNB는 의 효소량은 1 효소 활성 단위.

AchE는 효소 활성(nmol/분) /ml)= (△A ÷ ε ÷ d × V 반총×10⁹÷V 모양÷T

=245×△A

ε：TNB는몰 소광계수,13.6×10³ L/mol/cm의；d: 비색 그릇 광경,1cm；V반총: 반응체계 총체적(L）， 200μl = 2 × 10^-4L；V 시료총: 추출액 부피,1 ml；10⁶：1mol = 1 × 10⁶μmol의；Cpr는: 단백질 농도 (mg/ml의）；V 샘플: 상청액 부피를 첨가(ml），0.02 ml；W : 샘플 품질;T: 반응 시간 (분），3 분。

b.사용 96 대시보드 측정의 계산 공식은 다음과 같습니다.

1. 조직AchE는 활성

（1）단백질 농도로 계산하다

활성 단위 정의: 단백질 밀리그램당 분당 촉매 생성 1nmol의 TNB는 의 효소량은 1 효소 활성 단위.

AchE는 효소 활성(nmol/분/mg) 프로트)= (△A ÷ ε ÷ d × V 반총×10⁹)÷（Cpr는 × V 모양）÷T

= 490×△A ÷ Cpr

（2）견본의 질량에 따라 계산하다.

활성 단위 정의: 조직당 분당 촉매 생성 1nmol의 TNB는 의 효소량은 1 효소 활성 단위.

AchE는 효소 활성(nmol/분/g) 신선하고 무겁다)= (△A ÷ ε ÷ d × V 반총×10⁹)÷（W × V 모양÷V 견본 합계）÷T

= 490×△A ÷ W

2. 세균, 세포AchE는 활성

활성 단위 정의: 각 10⁴ 개 세포 는 매 분 촉매 로 생성된다 1nmol의 TNB는 의 효소량은 1 효소 활성 단위.

AchE는 효소 활성(nmol/분/10)⁴ 셀)= (△A ÷ ε ÷ d × V 반총×10⁹)÷(세포 수× V 모양÷V 견본 합계）÷T

=490×△A ÷세포 수

3. 혈청AchE는 활성

활성 단위 정의: 혈청 밀리리터당 분당 촉매 생성 1nmol의 TNB는 의 효소량은 1 효소 활성 단위.

AchE는 효소 활성(nmol/분) /ml)= (△A ÷ ε ÷ d × V 반총×10⁹÷V 모양÷T

=490×△A

ε：TNB는 몰 소광계수,13.6×10³ L/mol/cm의；d：96 공판 광경,0.5 cm의；V 반총: 반응체계 총체적(L）， 200μl = 2 × 10^-4L；V시료총: 추출액 부피,1ml；10⁶：1mol = 1 × 10⁶μmol의；Cpr는: 단백질 농도 (mg/ml의）；V샘플: 상청액 부피를 첨가(ml），0.02 ml；W : 샘플 품질;T: 반응 시간 (분），3 분。

아세틸덴 알칼리 에스테르 효소 활성 측정 시약함 P450 시리즈