카르복실산 에스테르 효소 (CarE는）활성 측정 시약함 설명서

미량법 100T/96S

정식으로 측정하기 전에 반드시 취해야 한다 2-3 예상 차이가 비교적 큰 견본을 예측하여 결정하다.측정 의미:

포유동물CarE는, 지족 에스테르 효소 (aliesterase는), 조직과 기관에 널리 분포되어 있으며, 사안산 분해효소 가족에 속한다.CarE는에스테르 키, 아세틸아미드 키, 유황 에스테르 키를 함유한 내원성과 외원성 물질의 수해를 촉매하지만, 아세틸데인 알칼리와 그 유사물을 촉매할 수는 없다.CarE는 지질 운송 및 대사에 관여하며 다양한 약물, 환경 독극물 및 발암물질의 해독 및 대사와 관련이 있으며 유기린 농약은 결합 및억제CarE는활성

측정 원리:

CarE는 아세트산을 촉매할 수 있다-1-나프탈렌은 나프탈렌을 생성하여 바구니를 굳혀 색을 나타낸다.에서 450 nm 빛 흡수 증가 속도, 계산CarE는 활성

카르복실산 에스테르 효소(Care) 활성 측정 키트

구성:

시약 3: 분제×2 지, 4℃저장, 사용하기 전에 찾기 1 시약 3, 더하기 0.6ml 무수 에탄올 충분히 용해;시약 4: 가루약×2지,-20℃저장, 사용하기 전에 찾기 1 지시약 4, 소량의 시약 2를 첨가하여 용해한다;

작업액 조제: 사용 전 조제, 방향 1 병 시약 2중, 용해된 시약 3과 시약 4를 첨가한다 1 지, 충분히 용해, 여과,4℃빛을 피하여 저장, 사용 가능 1 주.

구체적인 제품의 매개 변수는 제품 설명서를 받은 매개 변수를 기준으로 한다

자체 장비 및 장비:

가시 분광 광도계, 데스크탑 원심분리기, 조절식 액체 이동기,1 ml 유리 비색 그릇, 연발, 얼음과 증류수.

굵은 효소액 추출:

세균, 세포 샘플 제조

세균이나 세포를 원심관 안으로 모아 원심을 분리한 후 상청을 버린다.매번 200 만세균이나 세포가 첨가되다 400μl 시약 1, 초음파 파쇄 세균 또는 세포 (전력 20%, 초음파 3s, 간격 10초, 반복 30 차);12000g 4℃의원심 30분, 맑은 액체를 채취하여 측정을 기다리다.

2, 조직: 조직 품질에 따라 (g): 시약 1 부피(ml)위 1：5~10 의 비율 (약속 을 채택할 것 을 건의 하다 0.1g 조직, 가입 1ml 시약 1) 얼음욕 균장 진행하기;12000g 4℃의원심 30분, 맑은 액체를 채취하여 측정을 기다리다.

3, 액체: 직접 측정

측정 작업:

1. 분광 광도계/효소 측정기 예열 30분, 파장 조절 450 nm, 증류수 제로.

2. 시약 2배치 37℃수욕 중 예열 30 분。

3. 빈 파이프:미량의 유리 비색 그릇을 취하다./96 슬레이트, 순서대로 추가 5μl 증류수와 200μl 시약 2, 신속하게 혼합, 450nm 처측정 3분내흡광치 변화, 제 10초흡광값은A1，第 190s흡광값은A2는。△A공백관= A2-A1

4. 측정관:미량의 유리 비색 그릇을 취하다./96 슬레이트, 순서대로 추가 5μl 상청액과 200μl 시약 2, 신속하게 혼합, 450nm 처측

정 3분 내흡광치 변화, 제 10초 흡광값은A3，第 190s 흡광값은A4。△A 측정관=A4-A3

참고: 빈 파이프는 한 번만 측정하면 됩니다.

CarE는 활성 계산 공식:

a.미량의 석영 비색 그릇을 사용하여 측정한 계산 공식은 다음과 같다

1, 조직CarE는 활성

（1）단백질 농도로 계산하다

CarE는 활성 단위 정의: 각mg 조직 단백질은 37℃반응 체계에서 분당 촉매 흡광치 증가 1 정의 1 효소 활성 단위.

CarE는 효소 활성(U/mg) 프로트)= (△A 측정관-△A 공백관)× V 반총÷(Cpr×V) 모양÷T

=13.67×(△A 측정관-△A 공백관÷Cpr

（2）견본의 신선한 무게에 따라 계산하다.

CarE는 활성 단위 정의: 각g 조직 37℃반응 체계에서 분당 촉매 흡광치 증가 1 정의 1 효소 활성 단위.

CarE는 효소 활성(U/g) 신선하고 무겁다)= (△A 측정관-△A 공백관)× V 반총×（V 견본 합계÷V 모양）÷W÷T

=13.67×(△A 측정관-△A 공백관÷W 2, 박테리아 또는 세포CarE는활성

CarE는 활성 단위 정의: 각 1 만 개의 세균이나 세포가 37℃반응 체계에서 분당 촉매 흡광치 증가 1 하나로 정의CarE는 산 것

성 단위.

CarE는 효소 활성(U/10⁴ 셀)= (△A 측정관-△A 공백관) ×V 반총×（V 견본 합계÷V 샘플÷세포밀도 (10⁴ 세포/ml）

÷T=13.67×(△A 측정관-△A 공백관)÷세포밀도 (10⁴ 세포/ml） 3, 액체 중CarE는활성

CarE는 활성 단위 정의: 샘플 밀리리터당 37℃반응 체계에서 분당 촉매 흡광치 증가 1 정의 1 효소 활성 단위.

CarE는 효소 활성(U/ml) )= (△A 측정관-△A 공백관)× V 반총÷V 모양÷T

=13.67×(△A 측정관-△A 공백관)

V 반총: 반응체계 총체적,205μl = 2.05 × 10^-4L；V 시료총: 상청액 총체적,1 ml；V 샘플: 상청액 부피 첨가(ml)，

0.005 ml；Cpr는: 단백질 농도,mg/ml의；W: 샘플 품질 (g）；T: 반응 시간 (분），3분。

b.사용 96 대시보드 측정의 계산 공식은 다음과 같습니다.

1, 조직CarE는 활성

（3）단백질 농도로 계산하다

CarE는 활성 단위 정의: 각mg 조직 단백질은 37℃반응 체계에서 분당 촉매 흡광치 증가 1 정의 1 효소 활성 단위.

CarE는 효소 활성(U/mg) 프로트)= (△A 측정관-△A 공백관)× V 반총÷(Cpr×V) 모양÷T

=13.67×(△A 측정관-△A 공백관÷Cpr

（4）견본의 신선한 무게에 따라 계산하다.

CarE는 활성 단위 정의: 각g 조직 37℃반응 체계에서 분당 촉매 흡광치 증가 1 정의 1 효소 활성 단위.

CarE는 효소 활성(U/g) 신선하고 무겁다)= (△A 측정관-△A 공백관) ×V 반총×（V 견본 합계÷V 모양）÷W÷T

=13.67×(△A 측정관-△A 공백관÷W 2, 박테리아 또는 세포CarE는활성

CarE는 활성 단위 정의: 각 1 만 개의 세균이나 세포가 37℃반응 체계에서 분당 촉매 흡광치 증가 1 하나로 정의CarE는 산 것

성 단위.

CarE는 효소 활성(U/10⁴ 셀)= (△A 측정관-△A 공백관)× V 반총×（V 견본 합계÷V 샘플÷세포밀도 (10⁴ 세포/ml）

÷T=13.67×(△A 측정관-△A 공백관)÷세포밀도 (10⁴ 세포/ml）

3. 액체 중CarE는 활성

CarE는 활성 단위 정의: 샘플 밀리리터당 37℃반응 체계에서 분당 촉매 흡광치 증가 1 정의 1 효소 활성 단위.

CarE는 효소 활성(U/ml) )= (△A 측정관-△A 공백관)× V 반총÷V 모양÷T

=13.67×(△A 측정관-△A 공백관)

V 반총: 반응체계 총체적,205μl = 2.05 × 10^-4L；V 시료총: 상청액 총체적,1 ml；V 샘플: 상청액 부피 첨가(ml)，

0.005 ml；Cpr는: 단백질 농도,mg/ml의；W: 샘플 품질 (g）；T: 반응 시간 (분），3분。

카르복실산 에스테르 효소(Care) 활성 측정 키트