더블 요소법 단백질 함량 측정 시약함 설명서

미량법 100T/96S

참고: 공식 측정 전에 선택 2-3 예상 차이가 큰 샘플을 예측하여 단백질 농도가 1~10mg/ml 범위안.

측정 의미:

샘플의 가용성 단백질 함량은 종종 효소 활성 계산에 쓰인다.이 밖에 가용성 단백질 함량도 식품 등 품질 분석에 쓰인다.

측정 원리:

강한 알칼리성 용액 중 쌍축 요소와 CuSO는4 자색 락합물 형성;자색 접합물 색깔의 깊이는 단백질 농도와 정비례하고단백질 분자량은 아미노산 성분과 무관하기 때문에 단백질 함량을 측정하는 데 쓰인다.이 방법의 측정 범위는 1 ~ 10mg 단백질, 단백질 농도가 높은 샘플, 특히 동물 재료에 적용됩니다.

더블 요소법 단백질 함량 측정 시약함 - 상비 현물

구성:

표준품: 액체 1ml × 1개 병,5 mg/ml, 4℃의저장.

자체 기기 및 용품：

원심분리기, 가시분광광도계/ 효소 표시기, 미량 석영 비색 그릇 / 96 구멍판, 액체 이동기, 증류수.

구체적인 제품의 매개 변수는 제품 설명서를 받은 매개 변수를 기준으로 한다

샘플에서 가용성 단백질 추출:

1. 액체 샘플:맑은 무색 액체 샘플은 직접 측정할 수 있다.

2. 조직 샘플:조직의 품질에 따라 (g): 추출액 부피(ml)위 1：5~10 의 비율 (약속 을 채택할 것 을 건의 하다 0.1g 조직, 가입 1ml추출액 (자체, 필요에 따라 효소를 선택하여 완충액 또는 증류수 또는 생리식염수를 추출한다））

얼음욕에 풀을 고르게 하고,8000g, 4℃원심 10min，청을 취하면 바로 측정을 기다리는 액체이다.동물 샘플은 종종 희석해야 한다）

3 , 박테리아, 곰팡이: 세포 수에 따라 (104개): 추출액 볼륨((ml)위 500~1000:1의 비율(제안 500만 세포가입 1ml 추출액), 빙욕 초음파 파쇄세포(전력 300w, 초음파 3 초, 간격 7 초, 총 시간 3분)그리고 8000g，

4℃, 원심 10분, 상청을 취하여 얼음 위에 놓고 측정을 기다리다.

측정 작업:

1. 분광 광도계/효소 측정기 예열 30 분, 파장 조절 540 nm, 증류수 제로.

2. 빈 파이프:取 0.5mL EP 관리, 가입 40μl의 증류수,200μl 시약 1, 혼합 후 실온 정지 15 분，取 200μl 미량유리 비색 그릇/96 대시보드,540nm 비색하다A 공백관.

3. 표준 튜브:取 0.5mL EP 관리, 가입 40μl의 표준액,200μl 시약 1, 혼합 후 실온 정지 15 분，取 200μl 미량 유리에 색그릇을 비교하다./96 공판, 540nm비색하다 A 표준관.

4. 측정관:取 0.5mL EP 관리, 가입 40μl의 측정 대기액,200μl 시약 1, 혼합 후 실온 정지 15 분，取 200μl 미량유리 비색 그릇/96 대시보드,540nm 비색하다A 측정관.

참고: 빈 파이프와 표준 파이프는 한 번만 측정하면 됩니다.

샘플 중 단백질 농도 계산 공식:

C 테스트 대기 ((mg/ml)=C 표준관×(A) 측정관 -A 공백관÷(A) 표준 튜브 -A 공백관)

= 5× (A) 측정관 -A 공백관÷(A) 표준 튜브 -A 공백관)

주의사항:

1. 샘플 단백질 농도는 1~10mg/ml범위 내, 이하 1mg/ml의이 방법을 사용할 수 없습니다. 10mg/ml는 상응하는 희석을 해야 한다.따라서 측정정전용 1～2샘플을 미리 실험하여 단백질 농도가 1~10mg/ml 범위 내.

2. 테스트 대기 샘플 단백질 추출은 생리식염수, 쌍증수 또는 단백질이 함유되지 않은 PBS는 추출하다.이 방법은 황산암모늄,트리스는 완충액 간섭, 추출취액에는 이런 물질이 함유되어 있지 않아야 한다;그렇지 않으면 다시 사용BCA 단백질 함량 측정 키트.

더블 요소법 단백질 함량 측정 시약함 - 상비 현물