알칼리성 인산 효소 (AKP/ALP의）활성 측정 시약함 설명서

미량법 100T/48S

정식으로 측정하기 전에 반드시 취해야 한다 2-3 예상 차이가 비교적 큰 견본을 예측하여 결정하다.측정 의미:

AKP/ALP의 아연을 함유한 당단백질효소로서 알칼리성환경에서 각종 천연 및 인공합성의 인지단에스테르화합물을 수해할수 있다.

AKP/ALP의 인체의 각 장기에 광범위하게 분포하며 간을 위주로 한다.

측정 원리:

알칼리성 환경에서AKP/ALP의 인산벤젠 나트륨을 촉매하여 유리페놀을 생성한다.페놀과 4-아미노안티비린과 청산가리 반응 적색아퀴논 파생물은 510nm특징적인 빛 흡수;측정을 통과하다 510nm흡광도 증가 속도, 계산AKP는활성

알칼리성 인산 효소 활성 측정 시약 상자 에스테르 효소 계열

구성:

시약 4: 액체×1 병,4℃청록색으로 변하기 전에 사용할 수 있도록 빛을 피하여 보관합니다.표준품: 액체×1 지지 (EP 관리 중),2 μmol/ml의 페놀 표준액,4℃저장.

자체 장비 및 장비:

가시 분광 광도계/효소 표시기, 미량 석영 비색 그릇/96 공판, 탁상 원심분리기, 수욕솥, 조절식 이액기와 증류수.

구체적인 제품의 매개 변수는 제품 설명서를 받은 매개 변수를 기준으로 한다

굵은 효소액 추출:

1. 조직: 조직 품질에 따라 (g): 시약 1 부피(ml)위 1：5~10의 비율 (약속 을 채택할 것 을 건의 하다 0.1g조직, 가입 1ml시약1) 얼음목욕을 하여 풀을 고르게 하고,4℃、8000g원심 10분, 맑은 액체를 채취하여 측정을 기다리다.

2. 박테리아 또는 세포: 박테리아 또는 세포 수에 따라 (104 개): 시약 1체적(ml）위 500~1000：1 의 비율 (제안 500 만세포 첨가 1ml시약 1), 빙욕 초음파 파쇄세포(전력 300w, 초음파 3 초, 간격 7 초, 총 시간 3분）；그리고 8000g，4℃, 원심 10분, 상청을 취하여 얼음 위에 놓고 측정을 기다리다.

3. 혈액은 직접 측정하거나 적당히 희석해서 측정할 수 있다.

측정 단계:

1. 분광 광도계/효소 측정기 예열 30분, 파장 조절 510 nm, 증류수 제로.

2. 시약 3배치 37℃수욕 중 예열 30 분。

3. 빈 파이프:取EP 관리, 가입 4μl 증류수,40μl의 시약 2,40μl의 시약 3, 고루 섞은 후 놓다 37℃수욕 중 보온 15분；시약 4를 첨가하다 120μl의, 혼합 후 510nm흡광도를 측정하여A공백관.

4. 표준 튜브:取EP 관리, 가입 4μl 표준품,40μl의 시약 2,40μl의 시약 3, 고루 섞은 후 놓다 37℃수욕 중 보온 15분；

시약 4를 첨가하다 120μl의, 혼합 후 510nm 흡광도를 측정하여A 표준관.

5. 돌보기:取EP 관리, 가입 4μl 상청액,40μl의 증류수,40μl의 시약 3, 고루 섞은 후 놓다 37℃수욕 중 보온 15분；시약 4를 첨가하다 120μl의, 혼합 후 510nm흡광도를 측정하여A측정관.

6. 측정관:取EP 관리, 가입 4μl 상청액,40μl의 시약 2,40μl의 시약 3, 고루 섞은 후 놓다 37℃수욕 중 보온 15분；

시약 4를 첨가하다 120μl의, 혼합 후 510nm 흡광도를 측정하여A 측정관.그 중 표준 튜브와 빈 튜브는 한 튜브만 하면 되고, 측정 튜브와 돌봄 각 종류는 모두 해야 한다.

참고: 빈 파이프와 표준 파이프는 한 번만 측정하면 됩니다.

AKP/ALP의 활성 계산:

1. 혈중AKP/ALP의 활력 계산

활성 단위 정의:37℃혈액 1밀리리터당 분당 촉매 생성 1μmol의 페놀 정의 1 효소 활성 단위.

AKP/ALP의 活力(μmol/분) / ml) = [C] 표준품×(A) 측정관-A 돌보다÷(A) 표준관-A 공백관×V 반총] ÷V 모양

÷T=6.8× (A) 측정관-A 돌보다÷(A) 표준관-A 공백관)

2. 조직, 박테리아 또는 세포에서AKP/ALP의 활성 계산

（1）단백질 농도로 계산하다

활성 단위 정의:37℃중매 밀리그램의 단백질은 분당 촉매하여 생성된다 1 μmol페놀 정의 1 효소 활성 단위. AKP/ALP (μmol/min/mg) 프로트) = [C] 표준품×(A) 측정관-A 돌보다÷(A) 표준관-A 공백관×V 반총] ÷ (Cpr×V)모양÷T=6.8× (A)측정관-A돌보다÷(A)표준관-A공백관÷Cpr

（2）견본의 질량에 따라 계산하다.

활성 단위 정의:37℃중매 그램 조직은 분당 촉매하여 발생한다 1 μ мол 페놀 정의 1 효소 활성 단위.

AKP/ALP (μmol/min/g) 신선하고 무겁다)=[C 표준품×(A) 측정관-A 돌보다÷(A) 표준관-A 공백관×V 반총] ÷ (W×V) 모양÷V견본 합계÷T=6.8× (A)측정관-A돌보다÷(A)표준관-A공백관÷W

（3）세균이나 세포 수로 계산하다

활성 단위 정의:37℃중매 10⁴ 박테리아나 세포가 분당 생성 1 μmol페놀 정의 1 효소 활성 단위.AKP/ALP (μmol/min/10)⁴ 셀)=[C] 표준품×(A) 측정관-A 돌보다÷(A) 표준관-A 공백관×V 반총]÷(세포 수× V 모양÷V 견본 합계÷T = 6.8× (A)측정관-A돌보다÷(A)표준관-A공백관) ÷세포 수

C 표준품:2μmol/ml의；V 반총: 반응체계 총체적(ml），205μl = 0.205ml； Cpr는: 굵은 효소액 단백질 농도（mg/ 미터l），별도의 측정이 필요하므로 당사에서 생산한 것을 사용하는 것을 권장합니다 BCA는단백질 함량 측정 시약함;W : 샘플 품질;V샘플: 반응 체계에 첨가된 상청액 부피(ml），0.004ml；V시료총: 추출액 부피,1ml；T: 반응 시간 (분），15 분。

참고 사항:

1. 시약 2, 시약 3, 시약 4는 모두 빛을 피하여 보존해야 한다.

2. 시약 4는 청록색으로 변한 후 사용할 수 없습니다.

3. 시약 4를 넣은 후 반드시 즉시 골고루 섞어야 한다. 그렇지 않으면 발색이 안 된다.전。

알칼리성 인산 효소 활성 측정 시약 상자 에스테르 효소 계열