산성 인산 효소 (ACP는）활성 측정 시약함 설명서

미량법 100T/48S

정식으로 측정하기 전에 반드시 취해야 한다 2-3 예상 차이가 비교적 큰 견본을 예측하여 결정하다.측정 의미:

ACP는 산성조건에서 인산단에스테르수를 촉매하여 무기인산이라고 하는데 대식세포의 용효소체내에서 흔히 볼수 있다.ACP는 전립선암의 보조 진단에 자주 쓰인다.

측정 원리:

산성 환경에서ACP는 촉매 대 니트로벤젠 인산 나트륨 수해 생성 4-니트로벤페놀405nm 특징적인 빛 흡수;통과 측정정405nm흡광도 증가 속도, 계산ACP는활성

산성 인산 효소 (ACP) 활성 측정 시약 상자 에스테르 효소 계열

구성:

자체 장비 및 장비:

효소 측정기,96 공판, 탁상 원심분리기, 수욕솥, 조절식 이액기와 증류수.

구체적인 제품의 매개 변수는 제품 설명서를 받은 매개 변수를 기준으로 한다

굵은 효소액 추출:

1. 조직: 조직 품질에 따라 (g): 시약 1 부피(ml)위 1：5~10 의 비율 (약속 을 채택할 것 을 건의 하다 0.1g 조직, 가입 1ml 시약1) 얼음목욕을 하여 풀을 고르게 하고,4℃、10000g원심 10 분, 맑은 액체를 채취하여 측정을 기다리다.

2. 박테리아 또는 세포: 박테리아 또는 세포 수에 따라 (10⁴ 개): 시약 1체적(ml）위 500~1000：1 의 비율 (제안 500 만세포 첨가 1ml 시약 1), 빙욕 초음파 파쇄세포(전력 300w, 초음파 3 초, 간격 7 초, 총 시간 3 분）；그리고 10000g，4℃, 원심 10분, 상청을 취하여 얼음 위에 놓고 측정을 기다리다.

3. 혈액은 직접 측정하거나 적당히 희석해서 측정할 수 있다.

측정:

1. 효소 측정기 예열 30 분, 파장 조절 405 nm。

2. 에서 EP 튜브에 다음 시약을 첨가하다.

골고루 섞다 200µL 가입 96 공판 중,405 nm 아래 각 파이프의 흡광치를 측정한다.ΔA=A 측정관-A 돌보다.

참고: 각 측정 튜브는 페어링을 수행해야 합니다.

ACP는 활성 계산:

표준 커브 y =7.3336x +0.0179；R² =0.9996；x 기준품 농도(μmol/ml의），y 흡광값ΔA는。

1. 혈중ACP는 활성 계산

활성 단위 정의:30℃혈액 1밀리리터당 분당 촉매 생성 1μmol의 4-니트로벤페놀은 1 효소 활성 단위.

ACP는 活力(μmol/min/ml) =（ΔA-0.0179）÷7.3336 × V 반총÷T÷V 모양

= 0.4545 ×（ΔA-0.0179）

2. 조직, 박테리아 또는 세포에서 ACP는 활성 계산

（1）단백질 농도로 계산하다

활성 단위 정의:30℃중매 밀리그램의 단백질은 분당 촉매하여 생성된다 1 μmol의 4-니트로벤페놀은 1 효소 활성 단위.

ACP는 活力(μmol/분/mg) 프로트)= (ΔA-0.0179) ÷7.3336 ×V 반총÷T÷(V) 모양×Cpr)

=0.4545 ×（ΔA-0.0179）÷Cpr

（2）견본의 질량에 따라 계산하다.

활성 단위 정의:30℃중매 그램 조직은 분당 촉매하여 발생한다 1 μ мол 4-니트로벤페놀은 1 효소 활성 단위.

ACP는 活力 (μmol/분/g) 신선하고 무겁다) = (ΔA-0.0179) ÷7.3336 × V 반총÷T÷(W×V) 모양÷V 견본 합계)

= 0.4545 ×（ΔA-0.0179）÷W

（3）세균이나 세포 수로 계산하다

활성 단위 정의:30℃중매 10⁴ 박테리아나 세포가 분당 생성 1 μ мол 4-니트로벤페놀은 1 효소 활성 단위.

ACP는 活力(μmol/분/10)⁴ 세포) = (ΔA-0.0179) ÷7.3336 × V 반총÷T÷(세포 수× V 모양÷V 견본 합계）

=0.4545 ×（ΔA-0.0179）÷세포 수

V반총: 반응체계 총체적(ml），1ml； W : 샘플 품질,g； V 샘플: 반응 체계에 샘플 부피 추가（ml），

0.00ml；V 시료총: 추출액 부피,1ml；T: 반응 시간 (분），30 분；500: 세포 또는 세균 총수,500 만.

참고 사항:

ACP는 특히 불안정 37℃와pH 보다 큼 7 의 조건에서 활력 상실이 빠르기 때문에 산성인산효소 샘플은 일반적으로 당일 준비해야 한다.혈청 샘플에 1mL당 혈청 첨가 10mg구연산 수소 나트륨이나 5mg의황산수소나트륨,pH하강 6.5 다음, 또는 5ml피청 가입 30%초산 용해액 2～3 드롭, 배치 4℃저장 가능 1 주.

산성 인산 효소 (ACP) 활성 측정 시약 상자 에스테르 효소 계열