식산 함량 검측 시약함 미량법

식산 함량 검측 시약함 설명서

미량법

품번:BC5845는

사양:100T/48S

제품 구성: 사용하기 전에 시약 부피와 병 안의 부피가 일치하는지 진지하게 확인하십시오. 의문이 있으면 즉시 솔레보 직원에게 연락하십시오.

용액의 제조:

1. 시약 2: 사용하기 전에 4mL 시약 1을 첨가하여 충분히 용해한다;다 쓸 수 없는 시약 -20 ℃ 분장 보존4주, 반복적으로 얼어붙는 것을 피한다;

2. 시약 3: 사용하기 전에 2.36mL의 증류수를 첨가하여 충분히 용해한 다음 총머리를 액면 아래로 뻗어 천천히 넣는다0.64mL농황산, 충분히 혼합;2-8 ℃ 는 보관할 수 있다4주,

3. 시약 4: 사용하기 전에 증류수 15mL를 충분히 용해하고, 다시 총머리를 액면 아래로 뻗어 천천히 넣는다15μL농황산, 충분히 혼합;2-8 ℃ 는 보관할 수 있다4주,

4. 작업액: 림용전에 견본량에 따라 시약 3: 시약 4 = 1mL: 5mL (총6ml，40T)의 비율을 균일하게 혼합하여 배치 후 당일 다 사용한다;

5. 표준품: 림용하기전에 1.08mL 시약을 첨가하여 충분히 용해하고 10μmol/mL 식산표준품으로 조제하여 2-8 ℃ 로 4주간 보존한다.

6250nmol/mL 표준품의 배합: 임시로 사용하기 전에 50μL 10μmol/mL 식산표준품과 450μL 증류수를 1μmol/mL 표준품(즉 1000nmol/mL)으로 혼합한다.250 μL 1000nmol/mL 표준품과750μL 증류수를 혼합하여 250nmol/mL 식산표준품으로 배합하여 다음 조작표 표준관 측정에 사용하며, 현재 배합하여 즉시 사용한다.

제품 설명:

식산 (Phytic acid) 은 일명 메탄올 6인산, 에폭시 6알코올 6인산으로 진핵세포에 보편적으로 존재하며 많은 세포활동에서 관건적인 역할을 발휘한다. 례를 들면 무기린의 안정상태를 유지하고 식물호르몬의 신호전도에 참여하며 효소의 보조인자로서 참여한다.DNA는수정,RNA는편집 및mRNA를내보내기.식산은 식물의 발아와 생장 과정에서 주요 인원을 제공하며, 곡류, 콩류, 과일, 채소와 건과 등 식물성 식품에 광범위하게 존재한다.

일정한 환경조건하에서 식산효소는 식산나트륨 (알코올6인산12나트륨) 을 분해하여 무기린과 알코올파생물을 산생할수 있으며 산성조건하에서 무기린과 몰리브덴산암모늄현색제가 반응을 일으켜 푸른색의 몰리브덴람물질을 산생할수 있으며 700nm에 특징흡수봉이 있으며 무기린의 함량을 측정하여 식산함량을 계산해낼수 있다.

참고: 실험 전에 예상 차이가 큰 샘플 2-3개를 선택하여 사전 실험을 하는 것이 좋습니다.

필요한 장비와 장비:

가시분광광도계/효소표시기, 저온원심분리기, 수욕솥/항온 배양함, 분석 천평, 미량 유리 비색 그릇/96공판, 조정식 이액총, 연구발/균장기,농황산（>98%，AR는）얼음과 증류수.

작업 단계:

하나,샘플 처리(측정 대기 샘플의 양을 적절히 조정할 수 있으며, 구체적인 비율은 문헌을 참고할 수 있다.)

1.신선한 식물 샘플: 품질에 따라(g): 추출액 1체적(mL)위1：5~10의 비율 (권장 약관0.1g, 가입1ml추출액 1) 추출액 1을 첨가하여 풀을 충분히 고르게 한 후, 상온에서 진동한다2시간, 다음4℃，10000g원심10분，取0.8ml상청액, 천천히 넣어요0.15ml추출액 2, 천천히 불어서 기포가 생기지 않을 때까지 섞고,4℃ 10000g원심10분나중에 찾아서 테스트를 기다리다.

2.건분류 식물 샘플:질량에 따라(g): 추출액 1체적(mL)위1：5~20의 비율 (권장 약관0.05g, 가입1ml추출액 1) 추출액 1을 첨가하여 풀을 충분히 고르게 한 후, 상온에서 진동한다2시간, 다음4℃，10000g원심10분，取0.8ml상청액, 천천히 넣어요0.15ml추출액 2, 천천히 불어서 기포가 생기지 않을 때까지 섞고,4℃ 10000g원심10분나중에 찾아서 테스트를 기다리다.

3. 액체 샘플: 액체 100 μL를 취하여 첨가1ml추출액 1, 상온 진동2시간, 다음4℃，10000g원심10분，取0.8ml상청액, 천천히 넣어요0.15ml추출액 2, 천천히 불어서 기포가 생기지 않을 때까지 섞고,4℃ 10000g원심10분나중에 찾아서 테스트를 기다리다.

참고:추출액 2천천히 넣어야 합니다. 가입하면 대량의 기포가 발생, 사용을 권장합니다2mL EP 튜브가 작동합니다.

2. 측정절차

1. 가시분광광도계/효소표시기 예열30분이상, 파장 조절700nm, 가시 분광 광도계 증류수 제로.

2. 작업표: (1.5mLEP 튜브에 다음 시약 추가)

3. 식산 함량 계산

1.샘플 단백질 농도로 계산

식산 함량 (nmol/mg 프로트)=ΔA 측정×C표시÷ΔA 표준× V모양÷(V)모양×Cpr) = 250×ΔA 측정÷ΔA 표준÷Cpr

2.견본 품질에 따라 계산

식산 함량 (nmol/g 품질)=ΔA 측정×C표시÷ΔA 표준×(V)상청+ V추출액 2÷ (W×V)상청÷V추출액 1)

=296.875×ΔA 측정÷ΔA 표준÷W

3. 액체 부피로 계산

식산 함량 (nmol/mL)=ΔA 측정×C표시÷ΔA 표준×(V)상청+ V추출액 2÷ [V]액체× V상청÷(V)추출액 1+ V액체)]

=3265.625×ΔA 측정÷ΔA 표준

C 표준: 표준 튜브 농도, 250nmol/mL；V-샘플: 샘플 볼륨 추가,0.12ml; V 상청: 추출 시 상청액 부피,0.8ml；V추출액 2: 추출액 2의 부피를 첨가하여,0.15ml；V추출액 1: 첨가된 추출액 1체적,1ml; Cpr: 샘플 단백질 농도,mg/mL의; V 액체: 액체 샘플 부피,0.1ml; W: 샘플 품질,g。

참고 사항:

1. 만약에∆A 측정 이하0.010또는 측정관의 흡광값이 공백관에 접근하여 견본량을 증가한후 다시 측정할수 있다.만약∆A 보다 큰 측정1, 샘플을 깨끗이 증류수로 적당히 희석한 후 측정하는 것을 권장한다.계산 방정식을 동시에 수정하는 것을 주의하십시오.

2. 만약 견본에 작업액을 첨가한후 혼탁이 생기면 견본에 청용증류수를 적당히 희석한후 다시 측정할것을 건의한다.계산 방정식을 동시에 수정하는 것을 주의하십시오.

3. 추출액 1에는 단백질 침전제가 함유되어 있기 때문에 상청액은 단백질 농도 측정에 사용할 수 없다.단백질 함량을 측정하려면 따로 샘플을 채취해야 한다.

실험 인스턴스:

1.양파 샘플 0.1044g을 달아 추출 단계와 측정 단계에 따라 조작, 사용96대시보드 측정 계산:ΔA 측정= A측정-A대조=0.411-0.375=0.036，ΔA 표준= A표준-A공백=0.811-0.096=0.715, 샘플 품질로 계산:

식산 함량 (nmol/g 품질)=296.875×ΔA 측정÷ΔA 표준÷W=143.18nmol/g 품질.

2.밀가루 0.05g을 달아 추출 단계와 측정 단계에 따라 조작, 사용96대시보드 측정 계산:ΔA 측정= A측정-A대조=0.331-0.188=0.143，ΔA 표준= A표준-A공백=0.811-0.096=0.715, 샘플 품질로 계산:

식산 함량 (nmol/g 품질)=296.875×ΔA 측정÷ΔA 표준÷W=1187.5nmol/g 품질.

참조 문서:

[1] Senna R, Simonin V, Silva-Neto M A C, et al. 옥수수 (Zea mays) 씨름의 발생 중에 산 인산酶 활동의 유도.[J].식물 생리학 및 생화학, 2006, 44(7-9):467-473.

[2] Iqbal T H, Lewis K O, Cooper B T. 인간과 [J [J] [J Iqbal T H, Lewis K O, Cooper B T. Phytase activity in the human and rat small intestine]. Gut, 1994, 35(9):1233-1236.

[3] Azeke M A, Egielewa S J, Ihimire E. 피타제 활성, 피타이트 및 [3] [4] [4] [4] [4] [5 [5] 아제케 M A, Egielewa S J, Egielewa S J, Ihimire E. 피타제 활성, 피타제 활성, 피타이트 및 [4] [5] [5] [6] [6] 피 [ 7] [7] 피 [ 7] 아제케 [7]Journal of Food Science & Technology, 2011년

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