포도당 산화효소(GOD) 테스트 박스 미량법

포도당 산화효소(GOD) 테스트 박스
미량법
품번:BC0695는
사양:100T/96S

제품 내용:
추출액:액체 100mL×1병, 4 ℃ 보존;
시약 1:액체 15mL×1병, 4 ℃ 보존;
시약 2:액체 3mL×1병, 4 ℃ 보존;
시약 3:액체 1mL×1지, -20 ℃ 로 보관하며 녹인 후 분리하여 보관할 수 있다.

제품 설명:
GOD(EC 1.1.3.4)는 동물과 식물에 널리 존재하며, 포도당 산화를 촉진하여 포도당산을 생성하고 H 2O 2를 생성하며, 생물체에서 활성산소를 생성하는 대사 경로 중의 하나이다.
GOD는 포도당을 촉매하여 H 2O 2를 생성하고, 과산화물 효소가 유산소가 존재할 때 H 2O 2를 촉매하여 생성된 산소는 또 인련 희향아민을 산화시켜 유색물질을 생성하며, 색깔의 깊이와 옅음은 포도당 산화효소의 활성과 선형적인 관계를 이룬다.

자체 설비와 기구를 갖추어야 한다.
가시분광광도계/효소표시기, 수욕솥, 탁상원심분리기, 조절식이액기, 미량비색그릇/96공판, 연구발, 얼음과 증류수

작업 단계
1. 샘플 측정의 준비
1. 조직처리: 약 0.1g의 조직을 취하고 1mL의 추출액을 첨가하여 빙욕균장을 진행한다.8000g 4 ℃ 원심분리 10min, 청을 취하고 얼음에 놓고 측정을 기다린다.
2. 혈청 (장): 직접 검사한다.
2. 측정절차
1. 분광광도계 또는 효소표시기는 예열 30min 이상, 조절파장 500nm, 증류수 제로.
2. GOD 작업액의 조제: 15mL 시약 1과 3mL 시약 2를 혼합하여 PH 5.1 (현재 배합 현용) 을 조정한다.
3. 샘플링 테이블:
시약 이름(μL) 측정관
GOD 작업액 174
시약 3 6
혼합, 37 ℃ (포유류) 또는 25 ℃ (기타 종) 수욕 5min
샘플 20
시료 측정 전에 GOD 작업액과 시약을 37 ℃ 의 수욕에 세 번 넣고 보온한 다음 상기 시약을 순서대로 미량비를 첨가한다
색그릇/96공판에서 견본을 추가하는 동시에 시간을 재기 시작한다;500nm 파장에서 20초를 기록할 때의 초기 흡광도인 A1 및 1분 20초일 때의 흡광도인 A2. A=A2-A1을 계산한다.
3. GOD 활력단위의 계산
a. 미량의 석영 비색 그릇으로 측정한 계산 공식은 다음과 같다.
1. 동물조직 GOD 활력의 계산
(1) 단백질 농도로 계산
단위의 정의: 매 mg의 조직단백질이 반응체계에서 분당 1μmol 산화형 인련희향아민을 촉매하여 생성하는것을 하나의 효소활력단위로 정의한다.
GOD(U/mg prot) = ≠ A (ε × d) × V 반총 (Cpr × V 샘플) T = 1333 × ⑥ A Cpr
(2) 견본의 신선도에 따라 계산한다
단위의 정의: 매 g조직이 반응체계에서 분당 1μmol 산화형 인련희향아민을 촉매하여 생성하는것을 하나의 효소활력단위로 정의한다.
GOD(U/g 선중) = ≠ A (ε × d) × V 반총 (W V 추출 × V 샘플) T = 1333 × A W
2. 혈청(장)GOD 활력의 계산
단위의 정의: mL당 혈청 (장) 은 반응 체계에서 분당 1 μmol 산화형 인접 희향 아민 생성을 촉매하여 효소 활력 단위로 정의한다.
GOD(U/mL) = ≠ A d ε × V 반총 T V 샘플 = 1333 × A
V 반총: 반응 총체적, 0.2mL; V 샘플: 샘플 부피 추가, 0.02mL; V 추출, 추출액 부피 추가,
1mL; cpr: 샘플 단백질 농도,mg/mL；W: 샘플 신선도, g;d: 광경, 1cm; ε: 산화형 인접 희향아민 소광 계수, 7.5 × 10 -3 mL/μmol/cm;T:반응시간, 1min.
b. 96공판으로 측정한 계산 공식은 다음과 같다.
1. 동물조직 GOD 활력의 계산
(1) 단백질 농도로 계산
단위의 정의: 매 mg의 조직단백질이 반응체계에서 분당 1μmol 산화형 인련희향아민을 촉매하여 생성하는것을 하나의 효소활력단위로 정의한다.
GOD(U/mg prot) = ≠ A (ε × d) × V 반총 (Cpr × V 샘플) T = 2222 × ⑥ A Cpr
(2) 견본의 신선도에 따라 계산한다
단위의 정의: 매 g조직이 반응체계에서 분당 1μmol 산화형 인련희향아민을 촉매하여 생성하는것을 하나의 효소활력단위로 정의한다.
GOD(U/g 선중) = ≠ A (ε × d) × V 반총 (W V 추출 × V 샘플) T = 2222 × A W
2. 혈청(장)GOD 활력의 계산
단위의 정의: mL당 혈청 (장) 은 반응 체계에서 분당 1 μmol 산화형 인접 희향 아민 생성을 촉매하여 효소 활력 단위로 정의한다.
GOD(U/mL) = ≠ A d ε × V 반총 T V 샘플 = 2222 × A
V 반총: 반응 총체적, 0.2mL; V 샘플: 샘플 부피 추가, 0.02mL; cpr: 샘플 단백질 농도,mg/mL；
W: 샘플 신선도, g;d: 광경, 0.6cm; ε: 산화형 인접 희향아민 소광 계수, 7.5 × 10 -3 mL/μmol/cm;T:반응시간, 1min.
1. 서로 다른 균장 조직에서 GOD의 활력이 다르므로 정식 시험을 하기 전에 1-2마리의 사전 시험을 하십시오. 만약 A2-A1>1,
이는 조직의 활력이 너무 높기 때문에 반드시 추출액으로 적당한 농도의 고른 풀에 맑은 액체로 희석하여 A2-A1<1,
테스트 민감도를 높입니다.
실험 과정 중에 A1>A2 현상이 나타나면 샘플을 추출액으로 적당한 농도로 희석하십시오.
2. 좋은 두 사람이 동시에 이 실험을 하고, 한 사람은 비색하고, 한 사람은 시간을 재어 실험 결과의 정확성을 보장한다.
3. 이 시약함은 동물조직과 동물혈청 (장) 에만 적용된다.

포도당 산화효소(GOD) 테스트 박스 미량법 포도당 산화효소(GOD) 테스트 박스 미량법