사람의 배꼽 정맥 내피세포계

HUVEC 사람 배꼽 정맥 내피세포 영생화

l 세포감정

면역 형광 감정 감정은 이미 통과되었다

l 세포 출처

국가자원고 (상해중국과학원)

l 세포 배경

사람의 배꼽 정맥 내피 세포계 HUVEC는 비교적 오래 전에 미국 ATCC에 의해 건설되었고, 후에 널리 사용되었지만, 최근 몇 년 동안 세포의 근원에 교차 오염이 존재한다는 것을 발견하여 현재 이미 국제적으로 퇴출되었고, 미국에서도 세포에 문제가 있다는 것을 발견하여 새로운 HUVE-C를 새로 건설하였지만, 현재 이 세포가 국내에 도입된 후 종자는 모두 상태가 매우 나빠 사용할 수 없다.이 때문에 시중에서 사용할 수 있는 상태가 좋은 사람의 배꼽정맥 내피세포인 HUVE-C 세포를 찾기가 쉽지 않다.본사도 적합한 세포가 없는 동시에 상태도 좋고 정확하기 때문에 우리는 국내 원대 세포 영생화 건설을 하여 새로운 정확한 세포를 얻었다: 사람의 배꼽 정맥 내피 세포 영생화 세포.단일 내피세포 메이커 면역 형광감정 제공.세포 이름: 사람의 배꼽 정맥 내피 세포 영생화 세포, huve-c와 같은 유형의 세포, 모두 사람의 배꼽 정맥 내피 세포에 속한다. 다만 명칭이 다르다. 또한 국내 건설이기 때문에 STR 감정을 제공할 수 없고 면역 형광 감정을 제공한다.

l 세포 특성

1) 출처: 사람 탯줄 조직

2) 형태: 내피세포 견본 밀착 생장

3) 함량:>1x106 세포수

4) 규격: T25병 또는 1mL 냉동보관관 포장

5) 용도: 과학 연구에만 사용.

l 배양 조건:

1) 내피세포 배양체계 마련(추천: PriMed-awcell-002)

내피세포 배양 기초배지 93%

태아 혈청 (FBS) 5%

내피세포 배양 첨가제 1%

페니실린 / 스트렙토마이신,P/S 1%

2) 배양조건: 기상: 공기, 95%;이산화탄소, 5%온도: 37 ℃, 배양함 습도는 70~80% 입니다.

l 참고 사항:

사람의 배꼽 정맥 내피 세포계 HUVEC는 밀착 세포 전대에 대해 다음과 같은 방법을 참고할 수 있다.

1. 상청 배양을 버리고 칼슘, 마그네슘 이온이 함유되지 않은 PBS로 세포를 1~2회 윤색한다.

2.0.25%(w/v)인슐린-0.53mM EDTA를 배양병(T25병 1-2mL, T75병 2-3mL)에 넣고 37℃ 배양함에 1~2분(소화가 어려운 세포는 소화시간을 적당히 연장할 수 있음)간 소화시킨 후 현미경으로 세포의 소화 상태를 관찰한 후 세포의 큰 부분이 둥글고 떨어져 나가면 신속하게 조작대로 가져가 배양기를 몇 번 두드린 후 배양기 10ml를 넣는다.

3.가볍게 두드린 후 흡출, 1000RPM 조건에서 원심 3-5min, 맑은 액체를 버리고 1-2mL 배양액을 보충한 후 불어준다.세포현액을 1:2의 비율로 새 T25병에 나누어 6-8ml를 첨가하여 설명서의 요구에 따라 배치한 새로운 *배양기를 첨가하여 세포의 생장활력을 유지하고 후속전대는 실제상황에 따라 1:2~1:5의 비율로 진행한다.

3) 세포동존: 세포를 접수한후 배양전 3세대에 일련의 세포종자를 동존시켜 후속실험에 사용할것을 건의한다.

l 운송 형식:

저온: (1) 1mL 냉동보관관 포장 드라이아이스 운송, 수령 후 -80도 냉장고 보존 후 밤 경과 후 액체 질소 또는 직접 소생, 만약 드라이아이스가 이미 깨끗하게 휘발되었고, 냉동보관관 병뚜껑이 벗겨지고 파손되었으며 세포에 오염이 있는 것을 발견하면 즉시 우리에게 연락하십시오.

상온 (2) T25병이 소생된 생존세포는 상온으로 발송되며 접수후 세포접수후의 처리방법에 따라 조작한다.

l 생물안전

1.모든 동물 세포는 잠재적인 생물 위해성이 있는 것으로 간주하고, 반드시 2급 생물 안전대 내에서 조작해야 하며, 모든 폐액 및 이 세포에 접촉한 그릇은 멸균한 후에야 버릴 수 있도록 주의해 주십시오.

2. 동존세포를 소생시킬 때 항상 보호장갑, 옷, 보호마스크를 착용하는 것을 권장한다.주의: 냉동 보관관이 액체 질소에 담그면 누출되고 서서히 액체 질소로 가득 찰 수 있습니다.해동 시 액체 질소가 기상으로 전환되어 용기가 폭발하거나 위험력으로 뚜껑을 불어 떨어뜨려 날리는 부스러기가 발생하여 인명 피해를 줄 수 있다.