H9C2 쥐 심근세포

쥐 심근세포 H9C2

l 세포감정

종속 감정은 이미 통과되었다.

l 세포 출처

국가 자원 창고

l 세포 배경

B. Kimes and B. Brandt는 BD1X 쥐 배아의 심장 조직에서 유래한 복제 세포 주아에서 H9c2 (2-1) 세포 주를 복제했으며 많은 뼈 근육의 특성을 나타냅니다.이 세포주 속의 성근세포는 융합하여 다핵의 근관을 형성하고 아세틸콜린의 자극에 반응을 일으킨다.배지의 혈청 농도가 1%로 떨어지면 융합이 빨리 일어난다.

l 세포 특성

1) 출처: 심장

2) 형태: 성근세포, 밀착생장

3) 함량:>1x106 세포수

4) 규격: T25병 또는 1mL 냉동보관관 포장

5) 용도: 과학 연구에만 사용.

l 배양 조건:

1) DMEM(1.5g/L NaHCO3 추천: awcell-128-0001) 또는 (GIBCO, 화물번호 12800017, NaHCO3 1.5g/L 추가) 배지 준비;양질의 태우 혈청, 10%;이중 저항 1%.

2) 배양조건: 기상: 공기, 95%;이산화탄소, 5%온도: 섭씨 37도, 배양함 습도는 70~80% 입니다.

l 참고 사항:

참고: 쥐 심근 세포 H9C2 이 세포는 DMEM (1.5g/LNaHCO3 포함) 배지에서 잘 자라고 있으며, 대부분의 브랜드의 DMEM은 높은 농도의 NaHCO3 (3.7g/L) 을 함유하고 있으며, DMEM (3.7g/L NaHCO3) 배지를 사용하여 세포를 배양할 경우 CO2 농도 (7~10%) 를 높여야 한다.

밀착 세포 전대의 경우 다음 방법을 참조할 수 있습니다.

1. 상청 배양을 버리고 칼슘, 마그네슘 이온이 함유되지 않은 PBS로 세포를 1~2회 윤색한다.

2.0.25%(w/v)인슐린-0.53mM EDTA를 배양병(T25병 1-2mL, T75병 2-3mL)에 넣고 37℃ 배양함에 1~2분(소화가 어려운 세포는 소화시간을 적당히 연장할 수 있음)간 소화시킨 후 현미경으로 세포의 소화 상태를 관찰한 후 세포의 큰 부분이 둥글고 떨어져 나가면 신속하게 조작대로 가져가 배양기를 몇 번 두드린 후 배양기 10ml를 넣는다.

3.가볍게 두드린 후 흡출, 1000RPM 조건에서 원심 3-5min, 맑은 액체를 버리고 1-2mL 배양액을 보충한 후 불어준다.세포현액을 1:2의 비율로 새 T25병에 나누어 6-8ml를 첨가하여 설명서의 요구에 따라 배치한 새로운 *배양기를 첨가하여 세포의 생장활력을 유지하고 후속전대는 실제상황에 따라 1:2~1:5의 비율로 진행한다.

3) 세포동존: 세포를 접수한후 배양전 3세대에 일련의 세포종자를 동존시켜 후속실험에 사용할것을 건의한다.

l 운송 형식:

저온: (1) 1mL 냉동보관관 포장 드라이아이스 운송, 수령 후 -80도 냉장고 보존 후 밤 경과 후 액체 질소 또는 직접 소생, 만약 드라이아이스가 이미 깨끗하게 휘발되었고, 냉동보관관 병뚜껑이 벗겨지고 파손되었으며 세포에 오염이 있는 것을 발견하면 즉시 우리에게 연락하십시오.

상온 (2) T25병이 소생된 생존세포는 상온으로 발송되며 접수후 세포접수후의 처리방법에 따라 조작한다.

l 생물 안전:

1.모든 동물 세포는 잠재적인 생물 위해성이 있는 것으로 간주하고, 반드시 2급 생물 안전대 내에서 조작해야 하며, 모든 폐액 및 이 세포에 접촉한 그릇은 멸균한 후에야 버릴 수 있도록 주의해 주십시오.

2. 동존세포를 소생시킬 때 항상 보호장갑, 옷, 보호마스크를 착용하는 것을 권장한다.주의: 냉동 보관관이 액체 질소에 담그면 누출되고 서서히 액체 질소로 가득 찰 수 있습니다.해동 시 액체 질소가 기상으로 전환되어 용기가 폭발하거나 위험력으로 뚜껑을 불어 떨어뜨려 날리는 부스러기가 발생하여 인명 피해를 줄 수 있다.