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인간 배아 신장 세포 293T

협상 가능업데이트05/06
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개요

인간 배아 신장 세포 293T/HEK-293T 세포는 293T(293tsA1609neo) 세포계(ATCC CRL-11268)의 파생물이다.세포는 SV40 항원을 지속적으로 발현하는데, 이 세포는 전염 실험에 자주 사용되며, 전염 효율이 높다.

제품 정보

HEK-293T 인간 배아 신장 세포

이봐, 293T'293T'.

l 세포감정

STR 인증 통과

l 세포 출처

국가 자원 창고

l 세포 배경

HEK-293T 세포는 293T(293tsA1609neo) 세포계(ATCC CRL-11268)의 파생물이다.세포는 SV40 항원을 지속적으로 발현하는데, 이 세포는 전염 실험에 자주 사용되며, 전염 효율이 높다.(전염은 일반적으로 50% 밀도로 판을 깔고 세포가 방금 그릇벽에 붙은후 (일반 8~10시간) 전염조작을 진행할수 있다.)

l 세포 특성

1) 출처: 인간 배아 신장

2) 형태: 상피세포 샘플, 밀착 성장, 밀착 능력 약함

3) 함량:>1x106 세포수

4) 규격: T25병 또는 1mL 냉동보관관 포장

5) 용도: 과학연구에만 사용

l 배양 조건:

1) DMEM(추천 awcell-0001) 배양기 준비;양질의 태우 혈청, 10%;L-글루타민(2mM) 1%;NEAA 1% ;이중 저항 1%

2) 배양조건: 기상: 공기, 95%;이산화탄소, 5%온도: 37 ℃, 배양함 습도는 70~80% 입니다.

l 참고 사항:

이 세포는 부상과 경미한 밀착 세포로 전대는 다음과 같은 방법을 참고할 수 있다.

1. 수집: 배양병의 떠다니는 세포를 원심관에 수집한다.칼슘, 마그네슘 이온이 함유되지 않은 PBS로 세포를 1~2회 윤색한다.세포가 벽에 잘 붙지 않아 PBS가 윤색되면 세포가 떨어지기 때문에 PBS도 원심관으로 회수해야 한다.

2.0.25%(w/v)인슐린-0.53mM EDTA를 배양병(T25병 1-2mL, T75병 2-3mL)에 넣어 37℃ 배양상자에서 1~2분(소화가 어려운 세포는 소화시간을 적당히 연장할 수 있음) 소화시킨 후 현미경으로 세포의 소화 상태를 관찰하고, 세포의 큰 부분이 둥글게 변하고 떨어져 신속하게 조작대로 가져가면 배양병을 몇 번 두드린 후 3-4ml를 함유한 배양기를 넣는다.

3. 수집한 부유세포, pbs 세척액 속 세포와 소화된 밀착세포를 1000rpml 원심분리 5min으로 상청을 버리고 1-2mL 배양액을 보충한 후 중현혼합하여 세포현액을 1:2의 비율로 새 T25병에 나누고, 6-8ml 설명서에 따라 배치한 새로운 *배양기를 첨가하여 세포의 성장과 활력을 유지하며, 실제 상황에 따라 5~15 진행한다.

인간 배아 신장 세포 293T 세포 동존: 세포를 받은 후 이전 3세대를 배양할 때 후속 실험에 사용할 수 있도록 세포 종자를 동존할 것을 제안한다.

l 운송 형식:

저온: (1) 1mL 냉동보관관 포장 드라이아이스 운송, 수령 후 -80도 냉장고 보존 후 밤 경과 후 액체 질소 또는 직접 소생, 만약 드라이아이스가 이미 깨끗하게 휘발되었고, 냉동보관관 병뚜껑이 벗겨지고 파손되었으며 세포에 오염이 있는 것을 발견하면 즉시 우리에게 연락하십시오.

상온 (2) T25병이 소생된 생존세포는 상온으로 발송되며 접수후 세포접수후의 처리방법에 따라 조작한다.

l 생물 안전:

1.모든 동물 세포는 잠재적인 생물 위해성이 있는 것으로 간주하고, 반드시 2급 생물 안전대 내에서 조작해야 하며, 모든 폐액 및 이 세포에 접촉한 그릇은 멸균한 후에야 버릴 수 있도록 주의해 주십시오.

2. 동존세포를 소생시킬 때 항상 보호장갑, 옷, 보호마스크를 착용하는 것을 권장한다.주의: 냉동 보관관이 액체 질소에 담그면 누출되고 서서히 액체 질소로 가득 찰 수 있습니다.해동 시 액체 질소가 기상으로 전환되어 용기가 폭발하거나 위험력으로 뚜껑을 불어 떨어뜨려 날리는 부스러기가 발생하여 인명 피해를 줄 수 있다.



인간 배아 신장 세포 293T라고도 불리는 HEK-293T 세포는 인간 배아 신장 세포에서 유래한 유전자 공학적 개조를 거친 세포계이다.이 세포계는 전염 효율이 높기 때문에 생물의학 연구에 널리 사용되고 있으며, 특히 유전자 발현, 단백질 생산에 쓰인다.293T 세포는 HEK-293 세포주의 파생주로서 SV40 T-항원유전자를 삽입하여 획득하였는데 이는 그들이 외원DNA를 전염할 때 더욱 높은 효률을 나타낼수 있도록 하였다.
HEK-293T 세포는 상피세포의 형태적 특징을 가지고 있으며 벽에 붙어 자란다.그러나 이들은 벽에 붙이는 능력이 상대적으로 약하기 때문에 배양 과정에서 세포가 탈락하는 문제를 겪을 수 있다.벽 부착을 개선하기 위해 배양 전에 젤라틴을 사용하여 배양 용기를 사전 처리하는 경우도 있다.이 세포들은 약간 산성이 치우친 환경에서 더 잘 자라는데, 보통 태아의 혈청이 10% 함유된 DMEM 배지에서 배양되고 37℃, 5% CO2의 조건에서 배양된다.
세포전대를 진행할 때 일반적으로 세포융합률이 80~90% 에 달할 때 진행되는데 전대비례는 1: 3에서 1: 4이고 전대주기는 약 3~4일이다.세포는 동결 보관할 때 일반적으로 5% DMSO가 함유 된 동결 보관액을 사용하고 활성을 유지하기 위해 액체 질소에 저장됩니다.
주의해야 할 점은 293T 세포가 배양과정에서 탄산수소나트륨의 농도와 CO2의 농도에 대해 일정한 요구가 있다는것이다.세포가 벽에 붙지 않거나 배지 속에 떠 있으면 배지의 탄산수소나트륨 농도와 배지 속 CO2 농도를 검사해 필요에 따라 조정해야 할 수도 있다.