인간 단핵 세포 백혈병 세포 THP-1

인간 단핵 세포 백혈병 세포 THP-1

【THP1; O-THP-1; 도호쿠 병원 소아병-1】

l 세포감정

STR 인증 통과

l 세포 출처

국가 자원 창고

l 세포 배경

1978년 재발한 급성 단핵세포 백혈병(AML)의 1살 남자아이의 외주혈에서 만들어졌다.이 세포는 유즙 구슬과 활성화된 적혈구를 삼킬 수 있으며 표면과 포질 면역 글로불린이 없다.프로포폴 TPA로 단핵세포 분화를 유도할 수 있다.

참고: NRAS 돌연변이는 PubMed= 9379676에서 p.Gly12Ser로 잘못 표시됩니다.

l 세포 특성

1) 출처: 급성 단핵세포 백혈병, 단핵세포

2) 형태: 단핵세포, 부상

3) 함량:>1x106 세포수

4) 규격: T25병 또는 1mL 냉동보관관 포장

5) 용도: 과학연구에만 사용

l 배양조건

1) RPMI-1640(추천 awcell-0002) 배양기 준비;양질의 태우 혈청, 10%;0.05 mM 베타-qiu 기 에탄올 (세포 배양 레벨 추천: awcell-8211);이중 저항, 1%.

2) 참조 전대 비율: 전대 시 세포 밀도를 2-4 × 105cell/mL로 제어하고 세포가 8-10 × 105cell/mL로 성장할 때 전대한다.

3) 참고 환액 주파수: 전대 시 환액.

4) 배양조건: 기상: 공기, 95%;이산화탄소, 5%온도: 섭씨 37도, 배양함 습도는 70~80% 입니다.

5) 동존액: * 배양액 95%, DMSO 5% (이 동존액을 사용한 후, 우리 창고의 경험에 따라 소생 생존율 약 50%, 소생 후 7~10일 추가 배양 후 성장 회복)

l 주의사항

【주의사항】:

이 세포는 부유세포로서 배양경험 및 고객의 피드백에 근거하여 전대할 때 [반환액법] 을 사용하는것은 세포상태에 비교적 유리하므로 우리 은행은 당신이 [반환액법] 을 사용하여 전대할것을 건의합니다.

1.당신은 우리가 제공한 15ml 원심관으로 발송한 세포를 받은 후, 원심을 통해 세포를 수집하지 마십시오. 먼저 두 개의 새로운 T25 배양병을 준비한 후 세포를 골고루 혼합한 후 두 개의 새로운 T25 배양병에 옮겨 배양기를 10ml까지 보충할 수 있습니다. 37℃ 배양함에 넣습니다.

2. 당신은 T25 배양병으로 발송된 세포를 받았습니다. 먼저 원심 분리 방식으로 세포를 수집한 후 세포를 다시 12ml 첨가하여 설명서의 요구에 따라 배치한 * 배양기를 골고루 분사한 후 두 개의 새로운 T25 배양병에 옮겨 배양하면 됩니다.

3. thp-1 부유세포.이 세포는 배양할 때 온화하게 처리하는 것을 더 좋아하며, 배양할 때 가능한 한 세포에 원심처리를 적게 하여 세포에 해를 끼친다.환액 시 배지 전체를 교체하지 말고 [반환액법]을 사용하여 전대를 진행하고 세포배지를 첨가하여 밀도를 유지할 때까지 세포를 희석하면 됩니다.

4.세포는 혈청의 질에 비교적 민감하다, 우리 은행은 당신이 수입 브랜드의 우수한 혈청을 사용하여 배양할 것을 건의합니다.FBS 불활성화 하지 마십시오. 세포 성장이 느린 경우 다른 FBS를 사용하거나 일시적으로 FBS 농도를 20%로 증가하십시오.

5. 이 세포의 배양액에는 베타-qiu기 에탄올(세포배양급)을 첨가해야 하는데, 첨가하지 않으면 세포 상태에 영향을 줄 수 있다.

베타-qiu기 에탄올은 안정성이 제한되어 있어 베타-qiu기 에탄올을 *배지에 첨가하여 중장기적으로 저장할 수 없으며, 매번 전대나 액체가 첨가될 때마다 베타-메틸에탄올을 첨가한다.

베타-qiu기 에탄올(2-qiu기 에탄올)은 림프구나 다른 세포 배양물에 첨가되는데, 배양기에 사용되는 FBS에는 아미노산인 시스테인이 공급이 수요를 따라가지 못하는 반면 시스테인은 많기 때문이다.일부 세포 (예: T 세포) 는 방광암모니아를 세포질로 운반할 수 없으며, 이를 방광암모니아로 전환해야 한다.베타-키유 에탄올은 시스테인을 세포에 의해 운반될 수 있는 형태로 환원한 후 세포 성장에 필요한 시스테인으로 전환시킨다.베타-키유 에탄올은 배양 중 세포에서 나오는 많은 유독대사 산물을 분해해 세포 주변 환경을 개선하는 환원제이기도 하다.

6. 이 세포는 세포밀도에 비교적 민감하므로 배양, 전대할 때 세포밀도를 적합한 범위에서 유지하는데 주의를 돌려야 한다 (구체적으로 세포설명서를 참고하십시오).

7..이 세포는 동존 후 소생률이 비교적 낮으므로, 동존 시 정상을 참작하여 세포량을 높이십시오

8. 일반적으로 생장하고 있는 세포에 *배지를 첨가하여 세포의 생장을 유지할 수 있으며, 7일마다 세포를 원심분리하여 새로 배합한 배지에 다시 매달아 세포의 전환액을 완성할 수 있다.

ATCC thp-1 세포가 세포의 활력을 유지하는 것에 관한 설명

device=모달

(잦은 세포 수는 thp-1을 모니터링하는 가장 좋은 방법입니다.이 세포들은 2~3일마다 플라스크에 소량의 신선한 배지 (조건 배지를 갖추게 하는 것) 를 간단하게 넣어 배양해야 한다.매번 원심 세포를 분리하고 다시 물려줄 필요는 없습니다.우리의 실험실에서 배양할 때, 2일째가 되면 세포는 일반적으로 더 많은 배양기를 가진 더 큰 플라스크로 증폭될 수 있다.세포 밀도가 8×10 5개의 살아있는 세포/ml에 도달하면 대물림이 필요하다.세포 밀도가 1 × 10 (6) 살아있는 세포 / ml를 초과하는 것은 허용되지 않습니다.

1. 상청 배양을 버리고 칼슘, 마그네슘 이온이 함유되지 않은 PBS로 세포를 1~2회 윤색한다.

2.0.25%(w/v)인슐린-0.53mM EDTA를 배양병(T25병 1-2mL, T75병 2-3mL)에 넣고 37℃ 배양함에 1~2분(소화가 어려운 세포는 소화시간을 적당히 연장할 수 있음)간 소화시킨 후 현미경으로 세포의 소화 상태를 관찰한 후 세포의 큰 부분이 둥글고 떨어져 나가면 신속하게 조작대로 가져가 배양기를 몇 번 두드린 후 배양기 10ml를 넣는다.

3.가볍게 두드린 후 흡출, 1000RPM 조건에서 원심 3-5min, 맑은 액체를 버리고 1-2mL 배양액을 보충한 후 불어준다.세포현액을 1:2의 비율로 새 T25병에 나누어 6-8ml를 첨가하여 설명서의 요구에 따라 배치한 새로운 *배양기를 첨가하여 세포의 생장활력을 유지하고 후속전대는 실제상황에 따라 1:2~1:5의 비율로 진행한다.

3) 세포동존: 세포를 접수한후 배양전 3세대에 일련의 세포종자를 동존시켜 후속실험에 사용할것을 건의한다.

4) 운송용 배양기(관액배양기)는 더 이상 세포배양에 사용할 수 없으므로 설명서의 세포배양조건에 따라 새로 조제된 *배양기로 바꾸어 세포를 배양하십시오.세포를 받은 후 첫 번째 전대는 T25 배양병 1: 2 전대를 권장한다.

l 운송 형식

저온: (1) 1mL 냉동보관관 포장 드라이아이스 운송, 수령 후 -80도 냉장고 보존 후 밤 경과 후 액체 질소 또는 직접 소생, 만약 드라이아이스가 이미 깨끗하게 휘발되었고, 냉동보관관 병뚜껑이 벗겨지고 파손되었으며 세포에 오염이 있는 것을 발견하면 즉시 우리에게 연락하십시오.

상온: (2) T25병이 소생된 생존세포는 상온으로 발송되며 접수한후 세포접수후의 처리방법에 따라 조작한다.

l 생물안전

1.모든 동물 세포는 잠재적인 생물 위해성이 있는 것으로 간주하고, 반드시 2급 생물 안전대 내에서 조작해야 하며, 모든 폐액 및 이 세포에 접촉한 그릇은 멸균한 후에야 버릴 수 있도록 주의해 주십시오.

2. 동존세포를 소생시킬 때 항상 보호장갑, 옷, 보호마스크를 착용하는 것을 권장한다.주의: 냉동 보관관이 액체 질소에 담그면 누출되고 서서히 액체 질소로 가득 찰 수 있습니다.해동 시 액체 질소가 기상으로 전환되어 용기가 폭발하거나 위험력으로 뚜껑을 불어 떨어뜨려 날리는 부스러기가 발생하여 인명 피해를 줄 수 있다.