세라마이드 * 에스테르 효소 억제제 활성 검사 시약함

세라마이드 * 에스테르 효소 억제제 활성 검사 키트 설명서

가시 분광 광도법

상품번호:BC5980는

사양:50T/48S

제품 구성: 사용하기 전에 시약 부피와 병 안의 부피가 일치하는지 진지하게 확인하십시오. 의문이 있으면 즉시 솔레보 직원에게 연락하십시오.

용액의 제조:

1. 시약 1: 사용하기 전에 시약 1자루를 취하여 첨가1.8ml증류수, 충분한 용해, 다 쓸 수 없는 시약-20℃분장 후 저장 가능4주, 반복적인 동융을 피한다 (이 시약은 동건시약으로서 부동한 병간의 육안관찰시약량의 차이가 비교적 크거나 심지어 양이 아주 적은 현상이 존재할수 있는데 이 현상은 사용에 영향을 주지 않고 실제품질이 같다.)

2. 시약 4: 사용하기 전에 17mL 시약 2를 첨가하여 충분히 용해하여 다 쓸 수 없는 시약-20℃분리 저장 가능4주, 반복적으로 얼지 않도록 하세요.

3. 시약 5: 10mmol/L 리반스의 명용액.사용하기 전에 15 μL 10mmol/L 리반스의 명용액을 취하고 985를 첨가한다μL증류수, 조제0.15mmol/L 리반스의 명용액, 현용 현배(이 시약은 양성관 실험에 사용되며, 선택).

제품 설명:

아세틸 담*에스테르 효소(Butyrylcholinesterase,BchE는，EC3.1.1.8), 일명 혈장 담 * 에스테르 효소, 가성 담 * 에스테르 효소, 일종의 실 * 산수 분해 효소로 간에서 합성된 후 혈액으로 들어가 거의 모든 동물 조직에 존재한다.아세틸 콜레스테롤 * 에스테르 효소 (AchE는)에 비해BchE는아세틸담*과 페닐메틸담*과 같은 비교적 큰 담*에스테르를 효과적으로 수해할수 있으며 유기린류농약, 아미노메틸에스테르류농약 등 신경작용제의 독해작용을 제거할수 있다.연구에 의하면,BchE는알츠하이머병 치료의 중요한 표적이 될 수 있고,BchE는억제제는 알츠하이머병 환자의 기억력 감퇴, 인지기능 장애 등을 개선하는 데 쓰인다.

BchE 촉매 세라마이드 담*수해 생성 담*, 담*과 이황대니트로벤젠산(DTNB) 작용 생성5-메타돈-니트로벤젠산 (TNB는），BchE는억제제 통과 억제BchE는활성, 세라마이드 * 의 수해 감소.TNB는에서412nm흡수봉이 있어 측정을 통해412nm흡광도의 변화에 따라 BchE 억제제 활성을 계산한다.

참고: 실험 전에 예상 차이가 큰 샘플 2-3개를 선택하여 사전 실험을 하는 것이 좋습니다.

필요한 장비와 장비:

가시 분광 광도계, 천평, 오븐, 분쇄기/연발/균장기,30-50눈체, 초음파 세척기, 원심분리기, 수욕솥/항온 배양함,1ml유리 비색 그릇, 조절식 이액총, 얼음과 증류수.

작업 단계: 구체적인 작업 단계는 제품 자료 파일을 참조하십시오.

참고 사항:

1.실험결과의 정확성과 안정성을 보장하기 위하여 반응시간과 조작시간을 엄격히 통제하여야 합니다.

2. 샘플 흡광도 A'_측정1.5 이상 또는ΔA는_측정접근ΔA는_공백이 경우 샘플 처리 단계에서 조직 샘플의 비율을 늘리거나 분제 샘플을 더 높은 농도의 용액으로 조제하여 측정하는 것이 좋습니다.당ΔA는_측정0.01 미만일 때는 시료를 추출액으로 희석한 뒤 측정할 수 있다.

3. 서로 다른 시약, 추출물, 약물 또는 조직이 BchE에 대한 억제 정도를 비교하는 데 사용하려면 반드시 시약, 추출물, 약물 또는 조직을 균일한 펄프로 배합하여 같은 농도로 비교해야 한다.

실험 인스턴스:

1. 유자나무 껍질 샘플 0.1005g(건조)을 채취해 첨가1ml추출액 초음파 추출, 원심분리 후 채취, 측정 절차에 따라 조작, 사용1ml유리 비색 그릇 측정 계산:ΔA는_공백=（A’는_{공백 1}-A_{공백 1}）-（A’는_공백2-A_공백2）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA는_측정=（A’는_측정-A_측정）-（A’는_공백2-A_공백2）=（1.117-0.485）-（0.166-0.112）=0.578, 억제율 계산:

BchE 억제제 억제율(%）=（1.113-0.578）÷1.113×100%=48.068%。

2. 감껍질 샘플 0.1014g(건조)을 채취해 첨가1ml추출액 은 초음파 추출 을 하고 원심 분리 후 에 맑은 것 을 취하여 희석한다16배 후 측정 절차에 따라 조작, 사용1ml유리 비색 그릇 측정 계산:ΔA는_공백=（A’는_{공백 1}-A_{공백 1}）-（A’는_공백2-A_공백2）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA는_측정=（A’는_측정-A_측정）-（A’는_공백2-A_공백2）=（0.706-0.149）-（0.166-0.112）=0.503, 억제율 계산:

BchE 억제제 억제율(%）=（1.113-0.503）÷1.113×100%=54.807%。

3.50 μL 0.15mmol/L 리반스의 명용액을 취하여 측정 절차에 따라 조작, 용1ml유리 비색 그릇 측정 계산:ΔA는_공백=（A’는_{공백 1}-A_{공백 1}）-（A’는_공백2-A_공백2）=（1.372-0.205）-（0.166-0.112）=1.113，ΔA는_측정=（A’는_측정-A_측정）-（A’는_공백2-A_공백2）=（0.838-0.171）-（0.166-0.112）=0.613, 억제율 계산:

BchE 억제제 억제율(%）=（1.113-0.613）÷1.113×100%=44.924%。

참조 문서:

[1] Ellman GL, Courtney KD, Andres V Jr. et al. 아세틸콜린스테라제 활동의 새로운 빠른 색상 측정 [J].생화학 약학, 1961, 7(2): 88-95.

[2] Noor Atatreh, Sara Al Rawashdah, Shaikha S Al Neyadi.구조 기반 가상 스크리닝을 통해 새로운 부티릴콜리네스테라제 억제제의 발견 [J].효소 억제 및 약제 화학 저널, 2019, 34 (1) : 1373-1379.

[3] Li Q, Chen Y, Xing S. et al. 인지 개선과 신경 보호를 위한 매우 강력하고 선택적 인 부티릴콜린스테라제 억제제 [J].의학 화학 저널, 2021, 64(10): 6856-6876.

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