pU6 Ets2 (마우스) - sgRNA3 Cas9 EGFP

주의사항: 전환 전에 이 입자의 상응하는 항생제 명칭, 항생제 사용 농도, 감수성 명칭과 배양 온도를 정확하게 찾으십시오.

1、말린 입자 가루를 받은 후 먼저5000rpm원심1분, 재가입20μl ~ 50μl무균수 또는pH 8.0의1 * TE완충액으로 입자를 용해하여 실온에 놓다1분；

2, 부터-80℃냉장고에서 상응하는 감각 상태를 꺼내 아이스박스에 넣어 해동하고 표시를 한다;

3、取2μl입자 추가100μl감각 상태, 빙욕30분；

4、42℃열 자극90년대얼음목욕2분；

5, 가입900μl의무항성의LB는액체 배양기,180rpm진동배양45분；

6、6000rpm원심5분, 전용100ul상청 혼합 균체 침전;

7, 균일한 후의 균액을 대응 항성에 첨가한다LB는평판에 적당량의 유리구슬을 붓고 액체를 고르게 칠한다.

8, 평면을 정방향으로 배양한다1시간, 재거꾸로 배양12h~16h；

9, 단일 클론 균을 골라 대응 저항성에 떨어뜨린LB는액체 배지 중, 진동 배지12h~16h, 실험 필요에 따라 입자 추출