ZETA LIFE 세포 증식 및 독성 검사 - CCK 키트

ZETA LIFE 세포 증식 및 독성 검사 - CCK 키트

가격: ￥615 - 2800

브랜드:제타 라이프.

상품번호:K009

생산지:미국

공급업체:상하이흡사생물과학기술유한공사

수량:1000

영어 이름: cck8

유통기한:24 개월

조건 저장: 4°C 피광 저장

규격:500T-3000T

ZETA LIFE 세포 증식 및 독성 검사 - CCK 키트

CCK 키트라고 약칭하는 CellCounting Kit은 WST (수용성 테트라졸염, 화학명: 2-(2-메탄산기-4-니트로벤젠)-3-(4-니트로벤젠)-5-(2,4-이황기벤젠)-2H테트라졸단나트륨염) 를 기반으로 세포 증식과 세포 독성에 널리 사용되는 빠른 고령도 검사 키트이다.

CCK는 MTT의 업그레이드 대체 제품으로 XTT. MTS와 같은 MTT나 다른 MTT 유사 제품과 비교할 때 뚜렷한 장점이 있습니다.

-CCK가 미토콘드리아 내의 탈수소효소에 의해 환원되는 formazan은 수용성이기 때문에 특정 용해액이 용해될 필요가 없으며, WST와 XTT, MTS에서 발생하는 formazan은 모두 수용성이 아니기 때문에 후속 용해 단계를 생략할 수 있다.

-CCK는 XTT나 MTS보다 안정적이어서 실험 결과를 더 안정적으로 만든다.

-CCK는 MTT, XTT 등에 비해 선형 범위가 넓고 민감도가 높습니다.

CCK 법과 다른 검사 방법의 비교:

작업 지침:

1. 표준곡선을 제작(세포의 구체적인 수량을 측정할 때)

1. 먼저 세포계수판으로 제조한 세포현액중의 세포수를 계산한후 세포를 접종한다.

2. 비례 (예: 1/2 비율) 에 따라 순서대로 배양기 등비로 - 하나의 세포 농도 사다리로 희석한다. 일반적으로 3~5개의 세포 농도 사다리를 만들어야 한다. 각 그룹은 3~6개의 복공이다.

3. 접종 후 2-4시간 배양하여 세포를 벽에 붙인 후 CCK 시약을 첨가하여 배양-시간을 정한 후 OD값을 측정하여 세포 수를 횡좌표(X축)로 제작한다.

OD값은 누진(Y축)의 표준 커브입니다.이 표준 곡선에 따라 알 수 없는 샘플의 세포 수를 측정할 수 있습니다 (이 표준 곡선을 시험하는 전제는 실험의 조건이다).

따라서 세포의 접종 수량과 CCK 가입 후 배양 시간을 쉽게 확인할 수 있습니다.

2. 세포 활성 검사

1. 96공판에 세포현액(100ul공)을 접종한다.배양판을 배양함에 넣어 미리 배양한다(379C, 5% CO2의 조건에서).

2. 각 구멍에 110ul의 CCK 용액을 첨가한다(구멍에 기포가 생성되지 않도록 주의한다. 이들은 OD값의 판독수에 영향을 줄 수 있다.)

3. 배양판을 배양상자에서 14시간 동안 부화시킨다.

4. 효소 측정기로 450nm에서의 흡광도를 측정한다.

5、OD값을 일시적으로 측정하지 않고 나중에 측정할 계획이라면 구멍마다 10ul 0. 1M의 HCL 용액 또는 1% wIv SDS 용액을 넣고 배양을 숨길 수 있다

판피광은 실온 조건에 보존한다.24시간 동안 흡광도는 변하지 않습니다.

3. 세포증식~독성검사

1. 96공판에 100u의 세포현액을 배치한다.배양판을 배양함에서 24시간 사전배양(379C, 5% CO2의 조건에서).

2. 배양판에 10ul의 다른 농도의 측정 대기 물질을 첨가한다.

3. 배양판을 배양함에서 적당한 시간 (예: 6, 12, 24 또는 48시간) 동안 부화시킨다.

4. 구멍마다 10ul CCK 용액을 넣고 싶다 (더 이상 구멍에 기포가 생성되지 않도록 주의하라. 그들은 OD값의 판독수에 영향을 줄 수 있다.)

5. 배양판을 배양상자에서 1-4시간 동안 부화시킨다.

6. 효소 측정기로 450nm에서의 흡광도를 측정한다.

7, OD값을 잠시 측정하지 않고 나중에 측정할 계획이라면 각 구멍에 10ul 0.1M의 HCL 용액 또는 1% wIv SDS 용액을 넣고 배양판을 덮어 빛을 피하여 실온 조건에 보관할 수 있다.24시간 동안 흡광도는 변하지 않습니다.

주의: 측정 대기 물질이 산화성이나 환원성이 있다면 CCK를 추가하기 전에 신선한 배지(배지를 제거하고 배지로 세포를 두 번 세척한 후 새로운 배지를 넣는 것)를 교체해 약물 영향을 제거할 수 있다.물론 약물의 영향이 비교적 적은 경우에는 배지를 교체하지 않고 배지에 약물을 첨가한후의 공백흡수를 직접 공제하면 된다.

준비:

①먼저 몇 개의 구멍을 만들어 접종 세포의 수와 CCK 시약을 넣은 후의 배양 시간을 모색하는 것을 권장한다.

②조건부로 다중 채널 변액기를 사용하는 것이 좋으며 평행 구멍 감소의 차이를 줄일 수 있습니다.가입

CCK 시약은 배양판 벽에 비스듬히 붙여 넣을 것을 권장하며, 배양기 페이지 아래에 꽂지 말고 넣으면 기포가 생기기 쉬워 OD값 판독을 방해할 수 있다.

③백혈구는 배양하는 데 시간이 오래 걸릴 수 있다.

④표준 96 공판을 사용할 때 밀착 세포의 작은 접종량은 적어도 1000 개/공 L (100 u 배양기)입니다.백혈구 검출 시 감도가 상대적으로 낮기 때문에

권장 접종량은 F구멍(100ul 배양기) 2천500개 이상이어야 한다.24홀 또는 6홀 실험을 사용하려면 먼저 구멍당 접종량을 계산하고 구멍당 배지 전체 부피의 10%에 CCK 용액을 넣는다.

⑤450nm 필터가 없는 경우 430-490nm 사이의 흡광도를 가진 필터를 사용할 수 있지만 450nm 필터는 감지 민감도가 높습니다.。

⑥배양기에서 페놀홍의 흡광도는 계산할 때 공백구멍의 본바닥의 흡광도를 공제하여 제거할수 있기에 검측에 영향을 주지 않는다.

모바일 컴퓨팅:

세포활력*(%) = [A(가약)-A(공백)] / [A(가약)-A(공백)] x 100

A(가약): 세포, CCK 용액 및 약물 용액이 있는 구멍의 흡광도

A(공백): 배양기와 CCK 용액이 있고 세포가 없는 구멍의 흡광도

A(0가약): 세포, CCK 용액이 있고 약물 용액이 없는 구멍의 흡광도

* 세포 활력: 세포 증식 활력 또는 세포 독성 활력

저장 기준:

49C 피광 보존, 유효기간 1년.

온성 힌트: 임상 치료에 사용할 수 없습니다.