DH5a 감수성 세포

DH5a 감수성 세포

상품명: DH5a Chemically Competent Cell

제품 코드: G6016

저장 조건: -80°C

상품번호, 수량, 사양: G6016-20(20개 100u1), G6016-100(100개 100u1)

pUC19 (통제 p10pg μ 1) 10μ 1

유전자형

F-φ80 라크 Z△M15는△(lacZYA-arg F) U169 엔드알 recAl

hsdR17 (rk-, mk+) supE44 λ- thi -1 gyrA96 relAl phoA

작업 설명

1. CLBioDH5a 감수성 세포얼음에 녹여 (또는 손바닥이나 실온을 잠시 놓고 균체가 얼음물이 혼합된 상태일 때 신속하게 얼음에 삽입) 목적의 DNA (입자 또는 연결 산물) 를 넣고 손으로 때리다EP 파이프 바닥을 가볍게 섞고 얼음 위에 25분 동안 가만히 둔다.

2.42 ° C의 수욕열은 45초 동안 격렬하여 신속하게 얼음 위에 올려놓고 2분 동안 가만히 두면 흔들림이 전환 효율을 떨어뜨린다.

3. 원심관에 항생제를 함유하지 않은 무균배지(2YT 또는 LB) 700μ1을 섞어 섞은 후 37°C에서 200rpm이 60분간 소생한다.

4.5000rpm 원심분리는 1분간 균을 수거하고 100μ1 정도의 상청을 남겨 중현균괴를 가볍게 불어 넣고 상응한 항생제를 함유한 2YT 또는 LB배지에 도포한다.

5. 평판을 거꾸로 37°C 배양함에 놓고 밤을 새워 배양한다.청백반 선별 작업을 할 경우 평판을 37 ° C에 놓고 최소 17h 배양합니다.

주의사항

1. CLBio 감수성 세포제안얼음 위에서 녹다.얼음은 약 5분 정도 놓으면 녹는다. 녹으면 8분 안에 입자를 넣는다. 그렇지 않으면 전환 효율에 영향을 줄 수 있다.

2. 입자를 섞거나 결과물을 연결할 때는 부드럽게 조작해야 한다.

3.고농도의 입자 또는 고효율의 연결 산물을 전환하면 최종 도포판에 사용되는 균의 양을 상응하게 줄일 수 있다.