전염급 선형 폴리에틸렌 아민(MW40000)

제품 소개

전염급 선형 폴리에틸렌 아민(MW의40000)는 폴리에틸렌 아민을 기반으로 한 순간 전염 시약 제품으로 전염 효과가 높다.폴리에틸렌아민은 고양의 이온전하를 가진 유기대분자중합체로서 음전하를 띤 핵산분자와 쉽게 결합되여 양전하를 띤 복합체를 형성할수 있다.이 복합체는 세포 표면의 음이온과 결합해 내삼키는 작용을 통해 세포로 들어간다.이 전염 시약은 세포의 독성이 낮고 다양한 세포계에 적용되며 재조합 단백질,AAV는등의 생산.

와MW25000의 전염 시약에 비해,MW의40000전염 시약은 용해성이 좋아 직접 물에서 용해할 수 있으며 산성 알칼리성 보조 용해를 조절할 필요가 없다;조작이 더욱 간편하고 전염 효과가 좋다.

기본 정보

사용 설명

시약 배치

필요한 재료:

이온제거수 또는 그 이상의 생물급수,1개의 mol/L*（NaOH는), 일회용0.1~0.2μm PES는진공 무균 필터, 무균HDPE는또는 폴리프로필렌 저장병.

저장액 구성:

⑴ ~을1 그램전염급 선형 폴리에틸렌 아민(MW40000) 용해900 ml이온을 제거한 물에 자력 믹서에 용해될 때까지 잘 섞기;

⑵ 쓰다1개의 mol/L* 조정pH다음6.9~7.1(예:pH보다 큼7.1, 염산으로pH값 조정6.9~7.1）；

⑶ 용액을 계량기 (또는 계량컵) 에 넣다안쪽, 물정용1 L；

⑷ 일회용0.2 µm필터 진공 여과 제균, 즉1개의 mg/mL의 저장액;

⑸ 필요에 따라 저장액을 분장하여4℃ 보존 가능1개월.

조작 프로세스 전염

세포 접종: 전염 효율을 높이기 위해 전염 전날 세포 접종을 권장하여 전염 시 세포 밀도를에서70~80%적합하다；

준비DNA-전염 시약 복합물:

⑴ ~을DNA는, 전염 시약과 희석제는 먼저 실온으로 회복한다;

⑵ 적당한 무혈청 배지 로 적당량 희석 하다DNA는；

⑶ 일정 비율 에 따르다(각1 μg DNA필요1-5 μL전염 시약, 자체 모색 배합 권장), 희석된 전염 시약을 장착할 때까지 첨가DNA는용액의 시험관(추가 순서를 뒤바꾸지 마십시오.), 한쪽살살소용돌이, 실내 온도 고정10~25분부화。

전염 세포:

⑴ 무혈청 조건에서 전염 시 세포배지를 제거하고 무혈청배지로 교체한다.

⑵ 세포 에 적당량 을 첨가 하다DNA-전염 시약 복합체, 가볍게 섞기, 전염6-8시간 후 신선한 예열 배양기 교체；

⑶ 에서적합한 조건중배양, 전염 후24시간전입 유전자의 발현 (자체적으로 적합한 검사 시간을 결정할 수 있음) 을 검출할 수 있다.

운송 및 저장 조건

운송조건: 실온운송

보관 조건: 가루는 실온이나4℃ 보존, 유효기간2년.

주의사항

1. 대부분의 세포에 대해1 μg DNA사용3 μL전염 시약은 비교적 높은 전염 효율을 얻을 수 있으며, 매 시도 가능1 μg DNA사용1.5 ~ 4 μL전염 시약을 최적화하다.

2. 안전과 건강을 위해 실험복을 입고 일회용 장갑을 끼고 조작하십시오.

3. 본 제품은 과학 연구 용도로만 사용됩니다.