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TRAP 염색 시약 상자

협상 가능업데이트05/06
모델
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제품 카테고리
원산지 Place of Origin

개요

제품 개요 product description 베이브 BBcellProbe항주석산산성 인산효소 염색액은 나프탈렌 AS-BI를 바탕물로 세포 내에 산성 인산효소가 분해되어 인산과 나프탈렌을 방출하고, 나프탈렌과 중질소염이 짝을 이뤄 유색 산물을 생성하여 세포질에 위치하며, 세포 내의 ACP가 항주석산의 활성이 있으면 양성 반응을 보인다.항주석산산성인산효소(tartrate resistant acid phosphatase, TRAP/TRACP)는 주로 정상인 폐포대식세포 등에 존재하는 TRAP와 세포백혈환자에 존재하는 비장 TRAP는 모두 세포여포에 있어 혈액으로 방출되지 않으며, 혈액 중 TRAP의 대부분은 파골세포에서 유래한다.따라서 혈중 TRAP를 측정하면 파골세포의 기능 상태를 알 수 있다.항주석산산성인산효소는 뼈의 흡수와 파골세포의 활성에 좋은 표지물로서 TRACP를 측정하면 생리조건과 각종 병리조건에서의 골대사상황을 료해하는데 도움이 된다.정상인의 폐포대식세포와 백혈에 존재한다......

제품 정보

온도 저장
2-8 ℃ 피광
주의사항
1. 유효기간은 시약함을 개봉하기 전에 요구조건에 따라 보존하는 유효기간이다.
2. 시약은 개봉 후 빨리 사용하세요!
유효기간
3개월 (주의: 안에 있는 부화액은 한꺼번에 배합하면 일주일 안에 효과가 있다!)
검사 방법
현미경
적용 샘플
1. 파라핀 슬라이스
2. 얼음 슬라이스
3. 세포 도포, 파편
4. 피도포 등
계기 준비
1 광학 현미경
2. 염색 독
3. 이액기
4. 스톱워치
5. 아이스박스
시약 준비
순수한 물
소모품 준비
1. 유리 조각을 싣다
2. 헤드 흡입
3. 일회용 장갑
사용 시 고려 사항
1. TRAP 부화액은 효력을 잃기 쉬우므로 본 방법은 피부에 관통혈을 바르고 말린 후에 제때에 염색해야 한다.
2. 얼린 슬라이스를 염색할 때는 슬라이스가 실온에 노출되는 시간을 줄여야 한다.
3.샘플은 신선해야 한다.취재 후 즉시 처리해야 한다.그렇지 않으면 효소의 활성에 영향을 줄 수 있다.
4.조직 고정은 4 ℃ 냉장고에서 해야 한다.시간은 24h를 초과해서는 안 된다. 그렇지 않으면 효소의 활성이 약화되거나 사라진다.
5. 일반적으로 파라핀으로 슬라이스하는 것은 권장되지 않습니다.만약 파라핀으로 슬라이스를 해야 한다면, 조직이 파라핀에 파묻혔을 때, 온도가 56 ℃ 보다 높아서는 안 된다.용해점이 52~54 ℃ 인 파라핀을 사용하여 왁스를 침출해야 한다. 침출 시간은 짧아야 한다. 그렇지 않으면 효소의 활성이 약화되거나 사라진다.
6. 파라핀 슬라이스는 고정할 필요가 없다.

사용 방법
(주의: 안에 있는 부화액은 한 번에 배합하면 일주일 안에 효과가 있습니다!)
주의: 기타 작업액은 사용하기 전에 신선하게 조제하고, 조제 후 즉시 사용하며, 한 번에 다 사용하면 방치할 수 없습니다.

샘플의 염색 처리:
1. 피도편 및 골수도편
1. 푸시:
전혈 또는 골수 3ul 정도를 취하여 유리조각에 설치하고, 유리조각을 30° 각도로 유지하여 유리조각과 30° 각도로 유지하고, 혈방울의 정면에 놓고, 약간 뒤로 이동하여 혈방울과 접촉하고, 혈방울은 유리조각의 하연을 따라 흩어지고, 다시 균등한 속도로 유리조각의 평면을 따라 평온하게 앞으로 미끄러지며, 혈방울이 혈막을 깔 때까지 한다.세포가 너무 적거나 너무 두껍지 않도록 너무 얇게 하지 마십시오. 너무 겹치지 않도록.
2. 고정:
코팅을 공기 중에 자연스럽게 말리게 한 다음 이 시약함의 고정액 A에 넣어 2-3분 동안 고정하고 30-60초 동안 물세탁한다.
3. 부화:
물세탁 후 아직 마르기 전에 바탕물 부화액에 넣어 빛을 피해 60분간 부화한다.너무 건조하면 염색 효과가 떨어진다.
4, 재염색:
부화가 끝나면 물을 꺼내 1분 동안 씻고 유리 조각이 마르기 전에 재염색을 한다.소목소를 1~2분 재염색하거나 메틸록색으로 2~3분 재염색할 수 있으며 둘 중 하나를 선택하면 된다.

2. 세포도안 및 세포파편
1. 고정:
세포도편 또는 세포기편을 본 시약함의 고정액A에 넣어 2~3분 고정시키고 30~60초 동안 물세탁한다.
2. 부화:
물세탁 후 아직 마르기 전에 바탕물 부화액에 넣어 빛을 피해 60분간 부화한다.너무 건조하면 염색 효과가 떨어진다.
3. 재염색:
부화가 끝나면 물을 꺼내 1분 동안 씻고 유리 조각이 마르기 전에 재염색을 한다.소목소를 1~2분 재염색하거나 메틸록색으로 2~3분 재염색할 수 있으며 둘 중 하나를 선택하면 된다.

3. 얼음절편
1. 회온:
-20 ℃ 냉장고에 보관 된 냉동 슬라이스를 슬라이스 선반에 5-10 분 동안 보관합니다.37 ℃ 부화상자에 넣어 온도를 회복하거나 절편대를 작은 상자에 놓고 상자를 37 ℃ 의 수욕솥에 넣어 온도를 회복할수 있다.
2. 수화물:
식힌 슬라이스를 1~2분 정도 물에 담가둔다.
3. 고정:
절편을 공기 중에 자연 건조시킨 다음 이 시약함의 고정액에 넣어 2-3분 동안 고정시키고 30-60초 동안 물세탁한다.
4, 부화:
물세탁 후 아직 마르기 전에 바탕물 부화액에 넣어 빛을 피해 60분간 부화한다.너무 건조하면 염색 효과가 떨어진다.
5. 재염색:
부화가 끝나면 물을 꺼내 1분 동안 씻고 유리 조각이 마르기 전에 재염색을 한다.소목소를 1~2분 재염색하거나 메틸록색으로 2~3분 재염색할 수 있으며 둘 중 하나를 선택하면 된다.

4. 파라핀 슬라이스
1. 탈랍:
디메틸벤젠 중 탈랍 5-10분.신선한 디메틸벤젠으로 5-10분 정도 갈아주세요.
2. 담그기:
무수 에탄올을 5분 동안 담그다.다시 각각 90%, 70% 에탄올을 2분씩 사용한다.
3. 수화물:
증류수를 2분간 담그다.
4, 부화:
아직 마르기 전에 바탕물 부화액에 넣어 빛을 피해 60분간 부화한다.너무 건조하면 염색 효과가 떨어진다.
5. 재염색:
부화가 끝나면 물을 꺼내 1분 동안 씻고 유리 조각이 마르기 전에 재염색을 한다.소목소를 1~2분 재염색하거나 메틸록색으로 2~3분 재염색할 수 있으며 둘 중 하나를 선택하면 된다.

결과 분석:
양성 반응은 선홍색 또는 진홍색 입자로 포장에 위치한다.

FAQ 분석
1 세포 유도 실패?
세포계나 기존 BMM 세포가 파골세포를 유도할 때는 세포인자의 질이 중요하다.유도 효과가 좋지 않을 때는 유도 조건을 조정하여 RANKL 농도를 높이거나 M-CSF를 추가할지 여부를 고려할 수 있습니다.

2. 양성세포는 어떻게 판단하는가?
일반적으로 형태 변화를 통해 설명하지 않고 RAW 세포는 매우 다양한 형태를 가지고 있으며 형태 변화는 문제를 설명 할 수 없습니다.일반적으로 다핵에 TRAP 양성이 더해져야 다핵파골세포라고 할 수 있다.
참고문헌
1.Guiping Chen 등
Bergapten은 NF-κB 및 JNK 신호 경로를 억제함으로써 RANKL 유발 骨질 생성과 난소 절단 유발 骨베베로증을 억제합니다.
생화학 및 생물리학 연구 통신 2019

2.Wen-Yong Fei 등.
Magnolol은 핵 요인 κB와 미토겐 활성화 된 단백질 키나즈 경로를 억제함으로써 마마그놀롤은 마마그놀롤을 통해 마마그놀롤은 난소절단 유발된 마그놀롤 손실을 방지합니다.
국제 분자 의학 저널 2019