T0P10感受态细胞*

T0P10 감수성 세포*
상품명: *0 Chemically Competent Cell
상품번호: G6015-20(20개 100ul), G6015-100(100개 100ul)
사양 / 소개: G6015-20(20개 100ul), G6015-100(100개 100ul)

유전자유형

F-mcrA는△(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZ△M15는△lacX74 recAl ara는△139△(araleu) 7697 galU galK rpsL (StrR) endA1 nupG

간략한 설명：

T0P10 균주는 MC1061 균주에서 유래한 것으로 현재 실험실에서 사용되는 감수성 세포 중 하나로 유전자형은 DH10B와 고도로 유사하다(DH10B는 galE15형이고 T0P10은 galU형).CLBio *0은 성장 속도가 빠르다(DH5a보다 빠르지만 Mach1-T1보다 성장 속도가 느리다), 10시간 동안 클론을 볼 수 있으며, recA1과 endA1의 돌연변이는 DNA의 안정과 고순도 입자 DNA 추출에 삽입된다.클론 구축, 청백반 필터링 등의 실험에 사용할 수 있으며 체인 * * 저항성이 있습니다.CLBio 시리즈 T0P10 감수성 세포는 특수 공정으로 제작되었으며 pUC19 입자 검사를 통해 전환 효율이 > 108cfu/μg입니다.

작업 지침:

1.CLBio *0 감수성 세포는 얼음에 넣어 녹인다 (또는 손바닥이나 실온에 잠시 놓아 균체가 얼음물이 혼합된 상태일 때 신속하게 얼음에 삽입된다), 목적 DNA (입자 또는 연결 산물) 를 넣고 손으로 EP관 바닥을 쳐서 가볍게 섞는다. 얼음은 25분 동안 가만히 있다.

2.42 ° C의 수욕열은 45초 동안 격렬하여 신속하게 얼음 위에 올려놓고 2분 동안 가만히 두면 흔들림이 전환 효율을 떨어뜨린다.

3. 원심관에 항생제가 함유되지 않은 2YT 또는 LB 무균배지 700μ1을 넣고 섞으면 37°C, 200rpm이 60분간 소생한다.

4.5000rpm 원심분리는 1분간 균을 수거하고 100μ1 정도의 상청을 남겨 중현균괴를 가볍게 불어 넣고 상응한 항생제를 함유한 2YT 또는 LB배지에 도포한다.

5. 평판을 거꾸로 37°C 배양함에 놓고 밤을 새워 배양한다.만약 청백반 선별 조작을 한다면, 평판을 37°C에 놓고 적어도 13h를 배양한다.

주의사항：

1. CLBio 감수성 세포가 얼음 위에서 녹는다.얼음은 약 5분 정도 놓으면 녹는다. 녹으면 8분 안에 입자를 넣는다. 그렇지 않으면 전환 효율에 영향을 줄 수 있다.

2. 입자를 섞거나 결과물을 연결할 때는 부드럽게 조작해야 한다.

3.고농도의 입자 또는 고효율의 연결 산물을 전환하면 최종 도포판에 사용되는 균의 양을 상응하게 줄일 수 있다.

T0P10 감수성 세포*