연어 배아세포;CHSE-214

연어 배아세포;CHSE-214 기초는 팀이 정성껏 최적화하여 장기적인 테스트를 거쳐 본 제품은 쥐의 원대폐대식세포의 우수한 성장상태를 유지할수 있다.

본 제품에는 이미 쥐의 원대 폐대식세포의 성장에 필요한 각종 성분이 포함되어 있으며, 어떠한 성분도 첨가할 필요가 없으며, 쥐의 원대 폐대식세포의 배양에 직접 사용할 수 있다.

주의사항

과학 연구용으로만 한정하다.

배양체계 중 일부 성분은 인체 건강에 해로운 물질이므로 노출된 피부로 배양체계의 액체와 배양체계가 있는 액체가 남아 있는 용기 내부에 접촉하지 마십시오.이 부분의 유해물질은 농도와 위해성이 모두 낮아 접촉이 있으면 즉시 수돗물로 씻어내면 된다.

소생

1) 항온수욕솥의 물을 37 ℃ 로 예열한다.

2) 15ml 원심관을 준비하고 FBS 10%를 함유한 배양기 5ml를 넣고 37℃ 수욕솥에 넣어 예열한다.

3) 고글, 두꺼운 털실 장갑을 착용한 후, 액체 질소 탱크에서 소생할 세포를 꺼내어 가능한 한 빨리 37 ℃ 의 항온 수욕솥으로 들어간다

복온은 복온속도를 높이기 위해 냉동보관관을 흔들어놓는다.

4) 녹은 동존관 속 세포를 미리 준비한 원심관에 흡입해 섞은 후 1000rpm 원심 5min;

5) T-25 배양병을 준비하여 세포명, 날짜를 쓰고 4ml 배양기를 첨가한다.

6) 원심분리가 완료되면 상청을 버리고 1ml 배양기로 세포를 중현시킨 후 T-25 세포배양에 들어가 골고루 섞은 후 전입

CO2 배양함에서 정적 배양.

전대 (세포전대 권장 일전이)

1) 세포의 합류도가 85% 이상이면 대물림이 가능하다.

2) 생물안전궤 안에서 배양병 병의 입구를 열고 병 안의 배양기를 수집한다.

3) 배양병에 무균의 1×PBS 3ml를 넣은 후 배양병을 수평으로 배치하여 PBS가 배양병 밑면의 모든 면적에 침윤하여 PBS를 흡입할 수 있도록 한다.

4) 병에 소화액 1ml를 넣고 밑면을 적신 후 37℃ CO2 배양함에 넣어 1~2min 부화한다.

5) 부화가 완료된 후 거꾸로 현미경 아래에서 세포가 둥글게 떠다니는지 관찰하고, 모두 소화되면 배양병에 10% FBS를 함유한 배지 2ml를 직접 첨가하여 현액을 원심관 15ml로 흡입한다;

① 무균의 원심관 15ml를 준비하고 FBS 10% 함유 배양기 2ml를 첨가한다.

② 소화된 세포를 ①의 원심관 내중화(불지 않기 ③)로 흡입한다.앞서 소화한 배양병에 1ml를 넣어 2min 정도 계속 소화하고, 배양병을 가볍게 두드리면 95% 정도 세포가 빠져나간다.

6) 1000rpm 원심분리 5min;

7) 새로운 T-25 배양병 2개를 준비하고 각각 4ml 배양기를 넣는다.

8) 원심분리가 완료되면 상청을 버리고 2ml 배양기로 원심분리세포를 중현시키고 중현후의 세포를 2개의 T-25 배양병에 전입하여 각 배양병에 각각 1ml씩 한다.

9) 수평으로 배양병을 배치하고 진동이 고르게 섞인후 배양병을 37 ℃, 5% CO2 배양상자에 넣어 조용히 배양한다.

냉동 보관 (세포 냉동 보관은 T25 한 병당 한 개씩 냉동 권장)

1) ~ 6) 이전 단계 참조

7) 원심분리가 완료되면 상청을 버리고 1mL의 동존액으로 중현세포를 침전시킨 후 1.8ml의 동존관으로 들어간다;

8) 냉동보관관을 이소프로필렌글리콜을 가득 채운 프로그램 냉각함에 넣은 후 -80 ℃ 냉장고에 넣어 밤을 새워 온도를 낮춘다;

9) 이튿날, 온도를 낮추어 완성한 서열냉각함의 랭장관을 꺼내 될수록 빨리 액체질소탱크에 들어가 보존해야 한다.

말기 당기화 종말 산물 수체(AGER)재조합 단백질재조합 고급 글리코실레이션 최종 제품 특정 수용기 (AGER)

EPCAM 단백질 인간재구성인EpCAM / TROP-1 / TACSTD1은단백질

NRP1은재구성인뉴로필린-1/NRP1단백질(Fc)라벨) 단백질

HA 단백질 H1N1재조합 신종플루H1N1(A/WSN/1933)혈응소HA1 (Hemagglutinin)단백질

하다재구성인LALBA / 알파 알알파 라라크탈부민단백질(Fc)라벨) 단백질

쥐 입자 세포 대식 세포 집락 자극 인자(GMCSF/CSF2)시약함 , 영어 이름:GMCSF/CSF2 ELISA 키트

마우스 케라티노세포 아오크린 인자 (KAF) ELISA 키트 / 암피레구린 (AR) ELISA 키트쥐 각화 세포 내분비 인자(KAF)시약함/이중 단백질(AR)시약함

Mousebonemorphogeneticproteins, BMPsELISAKit의쥐뼈 형성 단백질(BMP)시약함96T/48T수입 분장

CLIAKitforHumanpaxillin, PaxELISAKit는인간 말뚝 단백질

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P물질항체

연결 접착 분자2항체

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HA 단백질 H1N1재조합 신종플루H1N1(A/WSN/1933)혈응소HA1 (Hemagglutinin)단백질

무균 조작:세포배양은 무균 환경에서 해야 하며, 사용 전 초정 작업대에 자외선 조사 멸균을 하고 정기적으로 배양함을 청소해야 한다.실험인원은 작업복, 신발커버를 교체하고 마스크, 장갑을 착용해야 한다.

기자재 멸균:유리그릇, 금속기구 등은 고압증기멸균을 사용할수 있으며 플라스틱제품은 에폭시멸균을 많이 선택하거나 이미 멸균된 제품을 구매한다.

시약 선택:사용하는 배양액, 혈청, 완충액 등 시약은 무균, 무오염이어야 하며 사용 전에 무균 검사를 해야 한다.서로 다른 세포는 배양액 성분에 대한 요구에 차이가 있으므로 세포 유형에 따라 적합한 배양액을 선택해야 한다.

양성 조건:대부분의 포유류 세포의 적정 배양 온도는 37 ℃ 이며, 편차는 ± 0.5 ℃ 로 조절되어야합니다.배양함은 양호한 밀봉성을 유지하고 정기적으로 가스 농도와 유량을 검사해야 하며, 세포 배양은 보통 5% CO2가 배양액 pH 수치를 안정적으로 유지해야 한다.배양함 안의 습도는 95% 정도를 유지해야 한다.

‌일상 관찰:매일 현미경 아래에서 세포의 형태, 생장 상태와 배양액의 색깔 변화를 관찰한다.

정기 검사:정기적으로 세포에 대해 지원체, 세균, 진균 등 오염 검사를 한다.