식물성 매생이당 - 6-인산(T6P) ELISA 키트

　　식물성 매생이당 - 6-인산(T6P) ELISA 키트사용 설명서

BS-8050-A 식물성 매생이-6-인산(T6P) ELISA 키트 96T

BS-8050-B 식물성 매생이-6-인산(T6P) ELISA 키트 48T

1. 실험원리

이 키트는 이중 항체 협심법 효소연면역흡착시험(ELISA)으로 식물 조직이나 세포에서 T6P 수준을 측정한다.마이크로 공판은 T6P 항체를 미리 포장하고, 샘플에서 T6P와 고상항체를 결합한 후 매운 뿌리 과산화물 효소(HRP) 표시의 2항을 넣어 복합체를 형성한다.바탕물인 TMB 발색을 첨가하면 TMB는 HRP 촉매로 파란색으로 전환되고, 산이 종료되면 노란색으로 나타나며, 발색 깊이는 샘플의 T6P 농도와 상관관계가 있어 450nm 파장에서 흡광도를 측정하여 농도를 계산한다.

2. 시약함 구성

그룹 지정 저장 기준

사전 패키지는 마이크로 슬레이트 12 홀 × 8 개 2-8 ℃ 로 밀봉되어 건조됩니다.

표준품 동결건조분-20 ℃ 재용해 분장

HRP 마커 검사 항체 액체 피광 2-8 ℃

발색 바탕물(TMB) A액 + B액 현용 현배, 피광

종지액 2M 황산실온

농축 세척액 액체 40 ℃ 수욕 용해 결정

샘플 xishi액 액체 안정제 함유

주: 서로 다른 브랜드의 성분에 차이가 있을 수 있습니다. 자세한 설명서는 구체적인 설명서를 참조하십시오.

3. 견본처리

1. 샘플 유형

식물조직: 0.1g의 조직을 취하고 1mL의 추출액인 빙욕균장을 첨가하여 원심에서 청을 취한다.

세포/세균: 원심분리를 수집한후 상청을 버리고 초음파파쇄세포에서 상청을 추출한다.

2. 조건 저장

단기간: 2-8 ℃ 보존≤48시간.

장기: 분장 후 -20 ℃ 동존, 반복적인 동융을 피한다.

3. 희석 권장 사항

일반 시료: 5-20배 희석하는 것을 추천한다 (예를 들어 20μL 시료 + 180μL 희석액을 취한다).

고농도 샘플: 사전 실험으로 희석 배수를 확정하고 최고 100000배 (3단계 희석법) 를 희석해야 한다.

4. 조작 절차

표준품 배합

동결건조 표준품은 희석액 1mL를 첨가하여 다시 녹이고, 고루 섞은 후 10분 동안 가만히 둔다.

시리즈 희석 (예: 8pmol/L→4pmol/L→...→0.5pmol/L).

샘플링

표준 구멍: 50 μL/구멍.

샘플 구멍: 먼저 40 μL 희석액을 넣고 10 μL 샘플(총 5 배 희석)을 추가합니다.

빈 구멍: 샘플 및 이항이 없습니다.

부화

37 ℃ 부화 120분, 세판 3회 (매번 1분 담근다).

발색 및 끝

각 구멍에 TMB 발색액 100 μL, 37 ℃ 피광 부화 15분.

종료액 50 μL 종료 반응을 더하고 30분 이내에 OD값을 측정한다.

5. 주의사항

샘플은 피한다: 질소나트륨 (NaN3) 샘플 (HRP 활성 억제) 을 함유하고 있다.

시약 균형: 사용 전 실온 균형 20분, 농축 세척액은 40 ℃ 의 수욕 용해 결정.

품질 제어: 표준 커브 R²는 ≥ 0.95이어야 하는 복수 구멍을 설정하는 것이 좋습니다.

6. 결과 분석

표준 커브: 농도에 대한 OD값으로 네 개의 매개변수 방정식을 그립니다.

농도 계산: 샘플 OD값은 곡선 방정식을 대입하고 희석 배수를 곱한다.

주: 이상은 참고용으로만 제공되며 실제 데이터로 사용되지 않으며 실험은 설명을 엄격히 따르거나 기술 선생님에게 문의해야 합니다.

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