NLuc 형광소 효소 검사 키트

엔루크 형광소 효소는 유전자 공학을 통해 개조된 소분자 효소(19.1kDa)로 성능 zhuo일수록 생체발광 보고 유전자 단백질이다.반딧불이 (Photinus pyralis) 나 하이신 형광소 효소보다 약 150배 밝으며, 새로운 종류의 카테킨 유사물 (Furimazine) 을 사용하면 고강도, 휘광형 발광 신호를 생성할 수 있다.이 발광 반응은 ATP에 의존하지 않으며 이 바탕의 발광 신호를 억제함으로써 가장 높은 감지 감도를 얻습니다.
NLuc Reporter Gene Assay Kit은 NLuc 형광소 효소가 존재하는 상황에서 강한 신호를 생성할 수 있는 민감도가 높은 간단한 1회 첨가 가능한 시약을 제공합니다.
제품 그룹:

1. 자체 재료:
PBS；다중 소총;백색 불투명/흑색 세포 배양판;화학 발광기나 효소 측정기.
2. 테스트 전 준비:
(1) NLuc 검출 베이스(50×)와 NLuc 검출 베이스 완충액을 실온에 미리 배치한다.
(2) 실제 사용량에 따라 1: 50의 비율로 적당량의 NLuc 검사 바탕물(50×)을 NLuc 검사 바탕물 완충액과 혼합하여 실온에서 빛을 피하여 준비한다.예를 들어, 10mL 반응액이 필요한 경우 0.2mL의 검출 베이스를 넣어야 합니다.
주: 현재 배합하여 즉시 사용할 것을 건의하며, 나머지 신형 바탕물을 함유한 반응액은 이번 실험이 끝난 후에 보관하는 것을 건의하지 않는다.
3. 운영 방법:
(1) 세포배양함에서 세포배양판을 꺼내 5-15min 정도 두어 실온으로 회복한다.
참고: 흰색 불투명 또는 검은색 세포 배양판을 사용하여 구멍 사이의 신호 간섭을 줄입니다.
(2) 검사용액 첨가
다도배총을 사용하여 각 세포구멍에 실온까지 균형을 맞춘 바탕물이 함유된 반응액을 첨가하고 표본부피는 세포배양액의 부피와 같으며 균일하게 혼합한다.예를 들어, 96 공판은 일반적으로 80-100 μL 배양액을 첨가하고 그에 따라 80 μL-100 μL 검사 용액을 첨가합니다.384공판은 보통 20-30μL 배양액을 넣고 그에 따라 20-30μL 검사 용액을 넣는다.
(3) 발광 검사
혼합 후 화학 발광기나 효소 표시기에서 NLuc 형광소 효소를 검출하여 유전자 활성을 보고한다.
참고: 최상의 결과를 얻으려면 검사 시약을 넣은 후 1시간 이내에 검사를 완료하십시오.
4. 분석 데이터:
(1) 실험설계: 실험목적에 따라 각 배양판에 대조군, 실험군 및 공백대조군을 설치해야 한다.실험의 정확성을 보장하기 위하여 리론적으로 매개 실험조 (대조조를 포함.) 는 공백대조조의 반딧불이 반딧불이 효소의 발광측정값을 빼야 한다.
① 빈 대조 그룹:
배경F: 미전염세포+반응액.
참고: 공백 대조 그룹의 샘플 양은 실험 샘플 양과 동일해야하며 실험 샘플과 동일한 배양기/혈청 조합을 포함하고 wan과 동일한 검사 시약을 모두 추가해야합니다.
② 실험군: 전염세포는 실험화합물처리(즉 실험군F)를 거친다.
③ 대조군: 전염세포를 처리하지 않고 표준화된 결과(즉, 대조군F)로 사용한다.
(2) 계산 결과:
실험 그룹 = 실험 그룹 F- 배경 F.
대조군 = 대조군 F- 배경 F.
표현 배수 = 실험군 / 대조군.

-20 ℃ 보존, 유효기간 1년.NLuc 검사 베이스 (50 ×) 는 -80 ℃ 로 나누어 보관하는 것이 좋습니다.

1. 효소 촉진 반응은 온도에 비교적 민감하며, 샘플링 검사 전에 반드시 모든 시약을 실온 (20-25 ℃) 으로 균형 있게 재사용한다;
2. 테스트할 때 흰색이나 검은색의 96공판을 사용해야 한다.일반 투명 96 공판을 사용하면 인접 구멍 간에 상호 간섭이 발생합니다.
3. 검측기기: 화학발광을 검측할 수 있는 기기는 모두 적용되지만, 서로 다른 기기의 설치와 민감도가 다르기 때문에 측정된 광신호값도 다를 수 있다;
4. 단관형광측정기 측정, 각 샘플과 측정시약을 혼합한 후 측정 전까지 시간은 일치해야 한다;
5. 당신의 자신의 안전을 위해 실험하기 전에 효과적인 방호를 잘 하세요;