일차법 반딧불이 형광소 효소 보고 유전자 검사 시약함

보고 유전자 검사는 현대 분자생물학 연구 분야에서 구조 유전자 옆 영역의 잠재적인 순식 소자 (예를 들어 시동자, 증강자, 침묵자 등) 와 반식 작용 인자의 상호 작용 관계를 분석하는 중요한 도구이다.
반딧불이 형광소 효소는 유전자 조절과 약물 선별 등에 광범위하게 응용된다.반딧불이 형광소 효소는 분자량이 약 61kD인 단백질로 ATP, 마그네슘 이온, 산소가 존재하는 조건에서 형광소를 촉매하여 산화반딧불이 (Oxyluciferin) 를 생성할 수 있으며 형광소가 산화되는 과정에서 광신호가 발생한다. 그림 1과 같다.
이 시약함의 광신호는 일종의 순간광으로서 작업액을 첨가한후 즉시 검사해야 한다.광신호 반감기는 약 5min이다.

제품 그룹:

1. 작업액 배치
(1) 모든 성분을 실온으로 회복한다.
(2) A조분으로 B조분 (저장액) 을 충분히 희석하여 0.2mg/mL의 반딧불이 반딧불이 효소 작업액으로 배합하여 와선진탕하여 충분히 혼합되도록 확보한다.
주: 반딧불이 형광소 효소 작업액은 반복적으로 얼려서는 안 되며, 1회 실험 용량이 적으면 1회 사용량에 따라 나누어 담는 것을 권장합니다.실온에서 작업액을 3h 배치하면 활성이 약 10%, 5h 후에는 활성이 약 25% 감소한다.
2. 화학 발광치 검측
(1) 배양상자에서 세포배양판을 꺼내 실온에서 20min 부화시켜 실온(22~25°C)으로 회복시킨다.
(2) 배양판에 배양기 등 부피의 반딧불이 반딧불 효소 작업액을 넣고 골고루 섞는다.
(3) 실온부화 5min.
주: 부화시간은 세포류형과 세포수에 따라 적당히 조절할수 있다.
(4) 다기능효소표시기 또는 화학발광기로 수치를 읽는다 (기계매개변수: 측정시간은 10s, 측정간격은 2s).

- 80 ℃ 보존.B조분은 미리 무균수를 사용하여 2mg/mL 저장액, A조분 및 저장액으로 구성된 B조분을 사용하는 것이 좋으며, 실험에 따라
소량 분장이 필요합니다.검측 작업액은 반복적으로 얼지 않도록 즉시 배합하여 사용할 것을 건의한다.

1. 사용하기 전에 제품을 순간적으로 튜브 밑으로 원심 분리한 후 후속 실험을 진행하십시오.
2. 반딧불이 반딧불이 효소가 촉매하는 생물발광의 zui 강파장은 560nm이다.
3. 구멍 간의 간섭을 방지하기 위해 흰색 비투광 대시보드를 사용하는 것이 좋습니다.

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