모기 생물인 소장류 기관 배양기 세트

인간 장 Organoid 키트

인소장류 기관 배양기 세트

1、 제품 설명

모기 생물인 소장류 기관 배양 시약함 (인간 장 Organoid 키트)는 사람의 장 성체 줄기세포의 유래를 구축하고 유지하는 데 사용되는 소장류 기관 배양기 세트로, 이 시약함은 소장 은닉으로부터 완전한 분리, 은닉처 회수, 은닉처 활성 분석 및 배양의 전체 시약을 제공한다.소장 은둔의 활성을 비교적 크게 유지하고 소장류 기관의 형성률을 높일 수 있다. 배양된 사람의 소장류 기관은 주로 소장 줄기세포, 빠른 증폭 세포, 장 흡수 세포, 판씨 세포, 컵 모양 세포와 소량의 장 내 분비 세포로 구성되어 있다. 자아 갱신 능력, 조직 구조, 세포 유형과 기능 면에서 사람의 소장류 기관은 부분적으로 사람의 장 상피의 특징을 재현할 수 있기 때문에 장 안정 상태와 체외 질병 연구의 이상적인 모델이다.

2、 제품 정보

3、 기타 자체 재료 및 시약

4、 인소장류 기관 배양기의 제조

무균 초정 작업대에서 인소장류 기관 배양기를 조제하다.배합하다10ml인소장류기관배지의 경우 필요량이 다르면 그에 따라 사용량을 조절할수 있다.

1、 빙상 해동인 소장류 기관 배양인자B(50x), 사람 소장류 기관 배양인자C(250x), 사람 소장류 기관 배양인자D(250x)。

주의: 해동 후, 사람 소장류 기관 배양 인자를 권장B(50x), 사람 소장류 기관 배양인자C(250x). 분리하여 포장한 후 보관하여 사용하며, 반복적으로 얼지 않도록 한다.

2、 배양기 해동 후 상하가 전도되어 충분히 혼합되어 생물 안전 캐비닛이나 청정 작업대에서 일상 수요량에 따라 분장하고, 분장하는 것을 추천한다10ml/의관.

3、 분장 후의 배양기는 밀봉하여 저장하시기 바랍니다-20℃, 사용 시 분장된 배양기를 꺼내 실온 균형을 맞춘 후 사용할 수 있다.

주의: 조제된 사람의 소장류 기관 배양기는2-8°C저장, 2주 이내 사용을 권장합니다.이밖에 인소장류기관배양인자B(50x)세균 및 진균 항생제를 함유하고 있다(50x)。

5、 인소장류 기관의 건립과 전대 배양

참고: 주요 인체 조직 재료와 관련된 연구는 모든 관련 기관 및 정부 규정을 준수해야합니다.주요 인체 조직 재료를 수집하기 전에 모든 피실험자의 알 수 있는 동의를 얻어야 한다.

a) 원대인 소장류 기관의 건립

1、 샘플링: 원심관을 사용하여 원래 세대의 소장 조직을 차가운 원래 세대 조직 보호액에 수집하고 조직 샘플을4°C, 분리가 시작될 때까지.

2、 세척: 조직 샘플을 사전 냉각 장치로 이동DPBS는완충액의 배양접시에는 장강 면이 위로 향하고, 한 손은 장조직 한쪽 끝을 끼우고, 다른 한 손은 조각을 사용하여 장강 표면의 장융모를 가볍게 긁어내고, 장융모가 깨끗이 깎인 후 장조직을 새로운 함축에 둔다DPBS는의 배양그릇에서 세척, 반복 세척2차.깨끗이 씻은 소장을2mm넓이, 새 배양그릇으로 옮겨, 사용DPBS는세척2두루

3、 소화: 세척된 장 부분을 함유로 옮기기5mM/L EDTA는의 예냉DPBS는중간 소화, 배치4℃깨진 얼음 속에서 부화하거나20~30분, 소화20분좌우는 이액기로 장단을 부드럽게 불고 상청현미경을 취하여 관찰할수 있으며 상청에 완전한 은구가 나타나면 소화를 중지할수 있으며 은구가 없으면 소화시간을 적당히 연장할수 있다.

4、 세척: 소화가 완료되면 조직 파편을 새로운 함으로 이동DPBS는의 배양그릇에서 세척, 반복2보조 제거EDTA는。

5、 다시 걸기: 사용5mL의이액관은 예냉에 있다0.1%BSA의DPBS는의 배양용 그릇 또는50ml원심관에서 조직 파편을 불고, 다시 매달아 조직이 반복적으로 이액관 끝을 통과하게 하여 기계적인 절단력을 발생시켜 은둔부와 기저층을 분리시키고, 일부 현액경을 취하여 검사하며, 대량의 은둔부 구조를 볼 수 있을 때 불기를 멈추고, 불기 후의 조직 현액을 진행시킨다70μm여과망 여과.

6、 수집: 여과망을 뚫은 조직 현액을 수집,300g원심력4℃원심3분。

7、 계수: 상청을 버리고 사용1mL0.1%BSA의DPBS는중현 조직 침전, 채취20μL현액은 거울검사와 은닉계수를 진행하며, 계수가 완료되면 필요한 은닉량을 포함하는 현액을 흡수하고,300g원심력4℃원심3분, 상청을 버리고 얼음 위에 놓는다.

8、 적당량의 기질 접착제로 중현 조직을 침전시키고, 중현 밀도를 매10μL기질 접착제 액체 포함70다음100은닉처, 다시 걸면 얼음 위에 놓고, 다시 걸면 시간을 초과하지 않는다30년대기질 접착제가 너무 일찍 굳는 것을 피하다.

참고: 기본 젤라틴 희석 비율은70%이상은 배양 과정 중 기질 접착제의 구조 안정성을 보장합니다.

9、 기질 접착제와 조직 세포의 혼합 현액을 점입하다24대시보드 하단의 양수, 각 구멍30μL좌우, 현액이 공판 측벽에 닿지 않도록.10.접종이 완료된 배양판을37℃이산화탄소 항온 배양 상자 중, 부화30분좌우 대기 젤라틴 응고.

10、 기질접착제가 응고되면 벽을 따라 이미 조제된 사람의 소장류기관배지를 천천히 첨가하고24대시보드 구멍당500μL, 응고된 구조의 파괴를 피한다.

11、 ~을24구멍 플레이트 배치37℃이산화탄소 배양함에서 배양하다.

12、 매2~3하루에 한 번 배지를 교체하고, 배지를 교체할 때는 기질 접착제를 파괴하지 않도록 해야 한다.장기의 생장 상태를 면밀히 모니터링하고, 이상적인 상황에서 사람의 소장류 기관은5다음7천내에 건설하다.

b) 인소장류 기관의 전대 배양

1、 사람을 대하는 소장류 기관은 직경으로 배양된다200~500μm큰 시간 (또는 검게 변하여 더 이상 커지지 않을 때), 사람의 소장류 기관의 전대 (각 세대의 약5일 정도).윤세액 윤세된 창머리로 스크래치 기관을 불어 긁고, 소장류 기관과 배양기 현액을 윤세액 윤세된 것으로 옮긴다1.5mLEP관리 중.

2、 윤세액을 거쳐 윤세된 총머리로 중현류기관부유액을 힘껏 불어 여러번 불어(5~10차) 소장류 기관과 기질접착제를 분리하여 불게 하고,300g원심3분。

3、 상청 을 버리고 가입 하다1ml기초배양기 다시 한번 류기관 취타5~10회, 소량의 현액경을 취하여 류기관의 상태를 관찰한다.

1) 만약 장기가 이미 산산조각이 났다면, 기계를 선택하여 장기를 분산시킨 후 직접300g원심3분, 원심분리 후 사용PBS는또는 기초배양기 세척2차.

2) 만약 장기가 비교적 완전하다면300g원심3분후, 상청을 버리고 가입5기질접착제와 인소장류기관의 혼합물체적보다 배가되는 류기관의 소화액은 불어서 고루 섞은후 놓는다37℃배양함에서 소화2분가입5소화액 부피보다 배가되는 기초배지 소화중지.원심 분리 후 사용PBS는또는 기초배양기 세척2차.

4、 적당량의 기질 접착제로 중현 세척 후의 유기관을 침전시키고, 중현 후 얼음 위에 놓으며, 중현 시간은 초과하지 않는다30년대기질 접착제가 너무 일찍 굳는 것을 피하다.

참고: 기본 젤라틴 희석 비율은70%이상은 배양 과정 중 기질 접착제의 구조 안정성을 보장합니다.

5、 기질 접착제와 유기관의 혼합 현액을 점입하다24대시보드의 아래쪽이 바르고 액체가 대시보드의 옆벽에 닿지 않도록 합니다. 각 구멍마다30μL左右。

참고: 이 단계는 기질 접착제의 실온 응고를 방지하기 위해 가능한 한 빨리 완료되어야 합니다.

6、 접종이 완료된 배양판을37℃이산화탄소 항온 배양 상자 중, 부화15분좌우로 기질 접착제가 굳으면 꺼낸다.

7、 사람의 소장류 기관 배양기를 조제하다.

8、 기질접착제가 굳으면 공벽을 따라 미리 예열한 사람의 소장류 기관배지를 넣고24대시보드 구멍당500μL。

9、 세포 배양판을 넣다37℃배양함에서 배양하고, 사람의 소장류 기관의 생장 상태를 면밀히 관찰하고,3하늘은 거꾸로 현미경으로 사진을 찍어 여러 시야에 있는 사람의 소장류 기관의 형태와 분포를 기록한다.

V2.0버전

업데이트 시간:2025/6/17