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강소성 소주시 녹지대로 1355호
인교종 세포U373
소개:문제 세포선: 잘못 식별 / 오염.U-251MG 파생물이라는 것으로 나타났습니다.이 세포선은 우프살라 대학교에서 1973년에 설립된 원래의 천성세포종 세포선이 아닙니다.원래의 U-373MG 세포선은 U-373MG Uppsala (Cellosaurus=CVCL_2818)를 참조하십시오.
상품 번호:WS-S1465는
규격:1 × 10 ⁶세포/T25 배양병
1. 세포 기본 정보
- 세포 출처: 뇌
- 세포형태: 상피세포양, 벽에 붙어 자라기
- 세포 함량:> 1×10 ⁶ 세포/병
- 포장규격: T25배양병/1mL 냉동보관관
- 제품 용도: 과학 연구용,동물이나 인간의 질병을 치료하는 제품으로는 사용할 수 없다.
2. 상온세포 수거 당일 처리 세칙
단계: 수거 및 검사
· 실행 섹션 (일반 프로세스) 의 1, 2단계.
2단계: 배양기 교체 및 세포 수집
· 소독병 뒤에 초정화 작업대에서 병뚜껑을 연다.
· 상품에 따라 증정하는 배양기로 교체한다.
· 특히 주의: 현미경에서 비교적 많은 세포부상이 발견되면 병내의 모든 배지를 무균원심관으로 전이하고 원심(예를 들면 1200rpm, 5min)은 세포를 수집하여 낡은 배지를 버려야 한다.
· 교체 또는 수집을 완료한 후, 배양병을 배양함에 넣고 2-3시간 동안 계속 가만히 둔다.
3단계: 정적 후 처리 (세포 밀도에 따라)
세포밀도 상황 |
처리 시나리오 |
밀도 > 80% |
진행전대. 전대 비율 추천1: 2에서 1: 3. 확실하지 않으면 기술 지원 서비스에 문의하십시오. |
밀도 < 80% |
계속 키우다. 가스 교환을 보장하기 위해 뚜껑을 느슨하게 조이거나 통기병 뚜껑을 사용하십시오. |
부유세포 |
원심분리로 모든 배지의 세포를 수집하여 신선한 배지로 중현시킨 후 계속 배양해야 한다. |
대량의 밀착 세포가 떠다니다 |
원심에서 세포를 수집한 후 원심관에서 소화 전대를 시도하거나 (아래 특수 처리 참조) 기술 지원에 즉시 연락할 수 있다. |
셋, 세포 전대 조작 절차
A. 밀착세포전대
1. 준비: 오래된 배양기를 폐기한다.
2. 세척: 배양병 옆벽을 따라 PBS 등 세척액을 천천히 넣고 가볍게 흔들어 빨아들여 잔류 혈청을 제거한다.
3.소화: 예열된 yi 효소 (예: T25에 1ml) 를 넣고 가볍게 흔들어 yi 효소가 모든 세포를 덮을 수 있도록 한다.
4. 부화: 실온 소화 약 2분(시간은 세포에 따라 다름).
5.관찰: 현미경으로 관찰하여 ≥ 90% 의 세포가 둥글고 탈락될 때까지 관찰한다.미달하면 30초마다 체크할 수 있습니다.
6. 종료: 세포가 충분해되면 즉시 yi효소 부피의 두 배를 첨가하는 예열의 배양기가 소화를 종료한다.
7. 드라이: 이액기로 병벽을 가볍게 불어 세포를 탈락시키고 단세포 현액으로 분산시킨다.
8.원심: 세포현액을 원심관으로 옮기고, 200×g 원심분리 3~5분, 상청을 버린다.
9.중현상 및 접종: 소량의 신선한 배양기 중현상 세포침전으로 적당한 비율로 희석한 후 새로운 배양병에 접종한다.
10. 배양: 배양함에 넣는다.만약 일반 병마개를 사용한다면, 반드시 병마개를 돌려 가스를 교환해야 한다.
B. 부유세포 전대
1. 수집 및 원심분리: 세포현액을 전부 원심관으로 전이, 1000rpm 원심분리 5분, 상청을 버린다.
2.중현: 1-2ml의 신선한 배양기를 첨가하여 가볍고 부드러운 중현세포.
3.접종: 1:2 비율로 세포 현액을 새로운 T25 배양병에 전달하고 총 배양 기량을 5-8ml로 보충한다.
4. 배양: 배양함에 넣어 계속 배양한다.
넷째, 특수 문제 처리: 운송 중 탈락한 밀착 세포
일부 벽에 제대로 붙지 않은 세포는 운송 중에 탈락하여 정상적인 현상에 속하며 다음 단계에 따라 처리합니다.
1. 수집: 병 안의 모든 배양기를 무균 원심관에 넣고 원심(1200rpm, 3-5min)을 제거한다.
2. 세척: PBS로 세포를 중현시키고 다시 원심분리(1200rpm, 3-5min)하여 PBS를 버린다.
3.소화: 약 1ml 0.25% yi 효소를 넣고 부드럽게 섞어 (심하게 불지 않음) 배양상자에 넣어 1~2분 정도 소화한다.
4.종료와 분산: 제거 후 가볍게 불어 세포단을 분산시키고, 신속하게 3-5ml 배양기를 첨가하여 소화를 종료하고, 원심(1200rpm, 3-5min)은 상청을 버린다.
5.중매 및 접종: 배양기 중매 5ml를 첨가하여 비례에 따라 새 배양병/그릇에 접종한다.
6. 관찰: 거울로 관찰한다.만약 세포가 한 개이거나 3~5개의 세포만 있는 작은 덩어리라면 정상적으로 배양하여 벽에 붙어 생장할 수 있다.--
상황 |
정책 처리 |
전제 조건 |
세포 상태가 나쁘다/ 낮은 생산성 |
협상 가능 재발급 |
납품 당일사진 기록 및 기술 연계/ 영업 지원 |
미생물 오염 |
무료 재발급 |
수령24시간 이내선명한 사진 (개봉하지 않은 병의 외관 및 거울 아래 상태) 을 제공합니다. |
지원체 오염 |
무료 재발급 |
수령48시간 이내양성 판정을 받다.주의: 냉동 보관48시간 후에 감지된 결과가 유효하지 않습니다. |
누액 |
협상 가능 재발급 |
납품 당일사진 기록.원병 배양기를 보존하여 무균 용기에서 배양하고, 만약3일 이내 오염 발생。 |
고객 운영 오류 |
무료 재발급 불가 |
- |
비추천 외원 시약 사용 |
무료 재발급 불가 |
- |
비질량 문제 세포 사망 |
저가 재구매 신청 가능 |
수령일로부터 한 달 이내. |
실험 데이터가 이상적이지 않다. |
물러서지 않다/ 바꾸기 |
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중요 힌트: 예외 사항,시간 촬영영업 후 지원을 받기 위해 문의하십시오.