인자궁내막 암세포 EFE184

인자궁 내막 암세포EFE184는

소개:EFE184 세포계는 69세의 자궁내막암이 재발한 여성의 복수에서 만들어졌다.이 세포는 단층 상피세포로 매우 느리게 자란다.EFE184 세포계는 3D 세포 배양과 암 연구에 활용할 수 있다.

상품 번호：WS-S1480의

규격：1 × 10 ⁶세포/T25 배양병

1. 세포 기본 정보

- 세포 출처: 제자리: 자궁;전이부위: 복수

- 세포형태: 상피세포양, 벽에 붙어 자라기

- 세포 함량:> 1×10 ⁶ 세포/병

- 포장 사양: T25 배양병 / 1mL 냉동보관관

- 제품 용도: 과학 연구용,동물이나 인간의 질병을 치료하는 제품으로는 사용할 수 없다.

2. 배양기와 배양조건

1.배지

RPMI1640 배양기;10% 태아 소 혈청;1% 이중 저항

추천 혈청:WinSera FBS500-WP-002는

2. 배양조건

- 기상: 95% 공기 + 5% CO₂ 온도: 37 ℃;배양함 습도: 70% - 80%

3.냉동 저장 및 저장

- 동존액: 90% 태우 혈청 + 10% DMSO(현재 배합)

- 저장 조건: 액체 질소 장기 보존

3. 운송형식과 접수처리

1.상온 배송(T25병 살아있는 세포)

세포를 받고 먼저 T25 배양병 몸체는 표면 소독을 한다;배양병을 배양함에 넣고 2-3시간 동안 가만히 두기;세포밀도와 성장상태를 관찰하고 2~3장의 선명한 사진을 촬영하여 판매에 피드백한다.세포밀도가 표준에 도달하면 대물림을 진행할 수 있으며, 전기 대물림 비율은 1: 2로 건의한다;세포가 다시 가득 차면 그 중 한 병의 세포를 1mL 동존관 1개로 동존시키고 다른 한 병은 계속 대물림한다;2-3개 종자세포를 반복적으로 동결보관한후 다시 증폭실험을 진행하여 돌발상황으로 인해 세포가 단종되지 않도록 할것을 건의한다.

비고: 운송용 배양기(관액배양기)는 더 이상 세포배양에 사용할 수 없습니다. 설명서 세포배양조건에 따라 새로 배합한 배양기로 바꾸어 세포를 배양하십시오.세포 후차 전대 건의를 받다 T25 배양병은 1: 2로 대대로 전해진다.

2. 드라이아이스 배송(냉동보관세포)

일반 배송: 2개의 냉동 보관관, 1개의 소생, 1개의 예비 보관을 권장한다;만약 지출회복에 실패하면 엄격히 공장표준회복절차에 따라 제2지출을 조작한다.둘 다 소생에 실패하면 즉시 소생 전 과정 사진을 보관하고 판매 처리를 알리는 시간을 갖습니다.

4. 세포배양절차

1. 동존세포 소생

- 1mL 세포현액동존관을 37 ℃ 의 수욕에 넣고 해동될 때까지 빠르게 흔들어준다.

- 4-6mL 배지를 포함하는 원심관을 넣고 부드럽게 섞기;

- 1000RPM 원심분리 3-5분, 상청액 버리기;

- 배지 중현세포로 배지 6-8mL를 함유한 배지병/그릇에 접종한다.

-37 ℃ 배양으로 밤을 보내고 다음날 현미경으로 세포의 생장 상태와 밀도를 관찰한다.

2. 밀착 세포 전대의 경우 다음과 같은 방법을 참고할 수 있다: (세포 밀도 80% - 90% 전대 가능)

-상청 배양을 버리고 칼슘, 마그네슘 이온이 함유되지 않은 PBS로 세포를 1~2회 윤세한다.

- 0.25% (w/v) yi 프로테아제 첨가 - 0.53 mM EDTA를 배양병(T25병 1 - 2mL, T75병 2 - 3mL)에 37 ℃ 배양함에 넣어 1-2분 (소화가 어려운 세포는 소화시간을 적당히 연장할 수 있음) 소화시킨 후 현미경으로 세포의 소화 상태를 관찰한 후 세포가 대부분 동그랗게 변하고 탈락하면 신속하게 작업대로 가져가 배양을 몇 번 두드려 FBS - 10ml 배양을 종료한 후 10ml를 첨가한다.

- 가볍게 두드린 후 빨아들여 1000RPM 조건에서 원심분리 3-5min, 상청액을 버리고 1-2mL 배양액을 보충한 후 불어준다.세포현액을 1: 2의 비율로 새 T25병에 나누어 6-8ml의 설명서의 요구에 따라 배치한 새로운 배양기를 첨가하여 세포의 생장활력을 유지하고 후속전대는 실제상황에 따라 1: 2-1: 5의 비율로 진행한다.

3. 부유 세포의 경우 전대는 다음과 같은 방법을 참고할 수 있다.

- 참고: 차전대 권장 전대 비율은 1: 2로 추후 전대 비율은 고객의 필요에 따라 결정할 수 있습니다.

- 방법 1: 세포를 수집하여 1000RPM 조건에서 4분간 원심을 분리하고 맑은 액체를 버리고 1-2mL 배양액을 보충한 후 골고루 불어 세포현액을 1:2에서 1:5의 비율로 새로운 8ml 배양기를 함유한 새 그릇이나 병에 나눈다.

- 방법 2: 반수 환액 방식을 선택할 수 있으며, 반수 배지를 버린 후 남은 세포를 매달아 세포현액을 1: 2에서 1: 3의 비율로 새로운 8ml 배지를 함유한 새 그릇이나 병에 나눌 수 있다.

4.세포동존: 세포를 접수한후 배양전 3세대에 일련의 세포종자를 동존시켜 후속실험에 사용할것을 건의한다.

5. 생물안전 주의사항

1.모든 동물 세포는 잠재적 생물 위해성을 가진 것으로 간주하고, 반드시 er급 생물 안전 캐비닛 내에서 조작하고, 개인 방호를 잘 해야 한다;모든 폐액 및 세포에 접촉한 그릇은 멸균 처리를 거친 후에 버릴 수 있다.

2.소생동존세포시, 반드시 보호장갑, 보호fu 및 방지hu마스크를 착용한다;냉동 보관관이 액체 질소에 담그면 누출이 발생하여 액체 질소에 주입될 수 있으며, 해동할 때 액체 질소 기화는 용기가 터지고 병뚜껑이 날아가 사람이 긁히는 등 상해를 초래하기 쉬우므로 조작할 때 반드시 신중해야 한다.