DH5 a 람다 pir 감수성 세포*

DH5 a 람다 pir 감수성 세포*

상품명: DH5α≠pir Chemically Competent Cell
상품번호: G6018-10(100개 100ul), G6018-100(100개 100ul)
사양 / 소개: G6018-10(100개 100ul), G6018-100(100개 100ul)

유전자형

F-φ80 라크 Z△M15는△(lacZYA--arg F) LAMpir U169 엔드A1

recAl hsdR17 (rk-, mk+) supE44 λ- thi -1 gyrA96 relAl phoA

간략한 설명

CLBio DH5a 인파이어 균주는 DH5a에서 유래한 것으로, DH5a 대장균 게놈에 LAMpir, 즉 DH5a 인파이어를 도입하는데, 이 균주는 PIR 단백질을 표현할 수 있어 R6Kg ori 복제자가 함유된 입자가 그 안에서 정상적으로 복제될 수 있다.DH5a는 pir 균주에 핵산 내접효소 (enda) 가 결핍되어 입자 DNA의 생산량과 품질을 향상시켰습니다.재조합 효소 결함형 (recA) 은 삽입 세그먼트의 동원 재조합 확률을 감소시켜 DNA 삽입의 안정성을 보장합니다.lacZOM15의 존재로 DH5a는 파란색, 흰색 반점 필터링에 사용할 수 있습니다.그러나 DH5a는 pir 균주에 들어가 성장 속도가 느리기 때문에 평판 배양이나 액체 요균 시 성장 시간을 늘려야 한다.CLBio DH5a 람다 pir 감수성 세포는 특수 공정으로 제작되었으며 pUC19 입자 검출 전환 효율은 1X109 cfu/μg DNA입니다.

작업 지침:

1.DH5a 람다 pir 감수성 세포는 -80 ° C에서 꺼내 얼음에 빠르게 삽입하고 5 분 후 균괴가 녹을 때까지 기다리며 목적 DNA (입자 또는 연결 산물) 를 넣고 손으로 EP 관 바닥을 두드려 혼합하고 얼음은 25 분 동안 고정됩니다.

2.42*C 수욕열격은 45초, 신속하게 얼음을 다시 넣는다.2분 동안 고정된 상태에서 흔들면 전환 효율이 떨어진다.

3. 원심관에 항생제를 함유하지 않은 무균 LB 배양기 700μ1을 넣고 섞으면 37°C, 200rpm이 70분간 소생한다.

4.5000rpm 원심분리 1분간 균체를 수집하여 100μl 정도의 상청을 남겨 중간균괴를 가볍게 불고 상응한 항생제를 함유한 LB배지에 도포한다.

5. 37 ° C 배양상자에 태블릿을 최소 18 시간 동안 거꾸로 놓습니다.

주의사항：

1. 감수성 세포제안얼음 속에서 사르르 녹다.얼음에 8분 동안 삽입하면 목표 DNA를 넣고 얼음에 너무 오래 방치해서는 안 되며 장시간 보관하면 전환 효율이 떨어진다.

2. DH5a 람다 pir 균주는 성장이 느리므로 평판에 배양하거나 액체로 균을 흔들 때 균체의 성장시간(37°C, 18시간 이상)을 연장해야 한다.

3.고농도의 입자 또는 고효율의 연결 산물을 전환하면 최종 도포판에 사용되는 균의 양을 상응하게 줄일 수 있다.

DH5 a 람다 pir 감수성 세포*