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CTF-LTM 2D 형광세포 활력 검사 키트

협상 가능업데이트05/06
모델
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제품 카테고리
원산지 Place of Origin

개요

CTF-LTM 2D 형광세포 활력 검사 키트는 폴리펩타이드 산물에 대한 세포단백질효소의 분해를 기반으로 형광신호를 생성한다.세포막의 완전성이 손상되면 이 단백질효소는 바탕물에 대한 분해활성을 잃게 된다.

제품 정보

CTF-LTM 2D 형광세포 활력 검사 키트

제품 설명
묘사
세포 활력 검사에는 염료 배출, ATP 농도 변화, 효소 활성 변화 등 다양한 방법이 있다.세포 검사는 때때로 세포 독성의 메커니즘 연구와/또는 내삼 대조를 진행해야 하는데, 이로 인해 다중 (multiplex) 분석 수요가 발생한다. 즉 같은 샘플에 대해 여러 가지 분석 방법으로 검사하고, 서로 검사 메커니즘이 다르며, 서로 방해하지 않는다. 이렇게 하면 관련 대비를 진행할 수 있다. 따라서 세포 독성의 메커니즘을 밝히거나 시스템 차이를 배제할 수 있다.해외 CellTiter Fluor (CTF) 클래스 제품은 이러한 원리를 바탕으로 설계되었습니다.당사는 동종의 형광세포 활력 검사 시약함(Fluorescent Cell Viability Assay Kit)을 자체 개발하여 출시하였으며, 성능상 해외 브랜드 제품과 뚜렷한 차이가 없습니다.본 제품은 살아있는 세포 내의 단백질 효소가 폴리펩타이드-형광 기단 바탕물 산물에 대한 분해를 바탕으로 형광 신호를 생성한다.세포막 완전성이 손상되면 이 프로테아제는 바탕에 대한 분해 활성을 잃어 형광 신호를 생성하지 않는다.CTF-LTM형광소효소시약함 검사원리와 달리 검사방법도 다르다. 그 검사민감도는 형광소효소법보다 못하지만 더욱 초기의 경미한 세포손상을 검사할수 있으며 두개의 검사는 상용성이 좋아 멀티플렉스검사를 진행할수 있다.
제품 특징:
1. 성능
신호 감지,Window,민감도와 특이성은 해외 브랜드의 동종 제품과 유사하다.
2、相容性
CTG와 같은 일반적인 분석 시약과 호환되며 상호 영향을 형성하지 않습니다.
3. 특징
세포 조기막 손상에 더 민감해.
4, 편리함
"가입-혼합온육-검측"은 전반 실험절차가 간단하고 조작하기 쉽다.
제품 구성:
프로테아제 바탕물, 완충액을 혼합하여 10 mL 또는 100 mL의 갈색 병 및 2 ml 튜브에 주입합니다. 사양은 다음과 같습니다.
규격 CTF 바탕 CTF 완충액 감지 가능한 96-슬레이트 구멍 수 감지 가능한 384- 슬레이트 구멍 수
10ml 100uL의 10ml 100 500
2×50ml 2 × 500uL 2×50ml 1000 5000
사용 방법
1. 세포 준비:
(1) 96공 또는 384공 세포배양판에 적합한 밀도의 검사대기세포를 깔아야 한다.칠판을 사용하는 것이 좋습니다. (예를 들어 발광 시약과 함께 사용하면 화이트보드를 선택할 수 있습니다.)
(2) 검사 대기 화합물을 준비한다.세포판 구멍에 적합한 농도의 대기 화합물을 첨가하다.배양액 중 유기용매 농도는 1~2% 이하를 유지한다.화합물을 넣지 않은 대조 그룹을 만들다.프로젝트 수요에 따라 적당한 시간을 계속 키우다.
2. 세포 활력 검사:
(1) CTF-L 꺼내기TM세포 활력 검사 시약, CTF 완충액 wan 모두 용해 후 실온까지 균형.CTF 바탕의 소용돌이 진동은 che 밑바닥을 고르게 섞고, 순간 원심은 CTF 바탕을 파이프 밑바닥까지 수집한다.
(2) CTF 반응액 조제: CTF 바탕물은 100x이며, 용량에 따라 CTF 완충액을 1x 반응액으로 배합하여 충분히 혼합한다.
(3) 측정 대기 세포 배양판을 제거하고 구멍마다 100 μl 배양액에 100 μl 1x CTF 반응액을 첨가하는 등 같은 부피의 CTF 반응액을 넣는다.
(4) 저속 진판 20초 혼합, 피광 37 ℃ 반응 60min 후 형광 검사를 진행한다.세포마다 CTF 바탕물을 절단하는 속도가 다르기 때문에 최적 판독 시간은 세포에 따라 최적화되어야 한다.빠르면 시약을 넣은 후 30분 후에 판독을 진행할 수 있다.일반적으로 60분 이상의 시간이 지난 후 판독판의 결과 노이즈가 더 높습니다.판독 시간은 최대 3hr를 초과하지 않는 것이 좋습니다.
(5) 형광판독기에서 형광신호를 읽고 광Ex 380-400nm를 자극하여 광Em 505nm를 발사한다.
(6) 필요에 따라 Caspases 3/7 세포 사멸 검사와 같은 다운스트림의 다중 분석을 계속합니다.
주의사항
1. 처음 사용한 후 바탕물을 -20 ℃ 로 나누어 보관하는 것을 권장하며, 매번 신선하게 반응액을 조제한다.
2. 엄격한 검증을 거치지 않고 반응시약 용량을 임의로 변경하는 것을 건의하지 않는다.
기본 정보
저장 / 저장 방법
-20 ℃ 이하 피광 저장, 유효기간 12개월.
실험 결과도
5000 세포/구멍의 Hela 세포는 96 구멍 화이트보드 투명 바닥 배양판에 접종되어 다른 농도의 도시지 삼나무 알코올을 첨가하여 처리됩니다.65시간 후에 꺼내어 일관형광세포 활력 검사-CTG 세포 활력 검사를 진행하며, 사용된 부피는 60ul medium-60ul 형광 검사 시약-60ul CTG 검사 시약이다.약물 처리를 하지 않은 반응 구멍 판독수는 100% 이며, 약물 처리 구멍 percent reading을 계산하여 IC50. 왼쪽 그림과 오른쪽 그림은 각각 해외 동종 브랜드 제품 및 CTF-L을 구한다.TM의 형광 검사 결과는 두 가지 검사 방법 IC50이 비슷합니다.
HEK 293 세포계수는 96공 배양판판으로 나뉘며 각 공 세포수는 표와 같다.제품 설명서별로 CTF-L 사용TM2D 형광세포 활력 검사 시약함 및 해외 동종 브랜드 PC 제품은 형광세포 활력 검사를 진행하는데, 그림에서 판독수는 60분 판독을 반복하는 두 개의 평균수를 나타낸다.그 결과 두 개의 시약함이 유사하게 검출되었음을 알렸다.
A549는 각각 백색과 흑색 투명 세포판, 구멍당 1.5e+04 세포, 100μL 배양기에 접종됐다.24hr 후 화합물 STSP(Staurosporine), 최고 농도 1μM, 3x 희석, 8개 농도, 용매 DMSO 최종 농도 1%, 24hr 첨가 후 검사: CTF 형광세포 활력 검사용 검정 판, CTF-L 기준TM2D 형광세포 활력 검사 키트 설명서 진행, 시약 첨가 후 60min/100min/120min Ex380/Em505 판독, 백색판은 세포 활력 CTG 검사용, CTG-LTM2D 세포 활력 검사 시약 상자 설명서 진행, 시약 10min/30min/60min 첨가 후 판독 용량 곡선 위 그림 참조: 아이비신 CTG와 CTF 두 가지 방법은 STSP가 A549 세포 EC50에 일치하는 것으로 측정되었다.
CTF-LTM 2D 형광세포 활력 검사 키트따스한 제시: 본 제품은 과학연구실험에만 사용되며 림상 등 연구를 지지하지 않는다