체외 세포 독성 시험 양성 대조품

몸외세포 독성 시험 양성 대조품에 의하여하타노 연구소 (HRI)연구 생산，체외 세포 독성 실험에 광범위하게 응용하면 중국 약전을 만족시킬 수 있다-세포독성 검사 방법,ISO 10993의와YBB 00012003세포독성 검사법의 파라미터 요구.

체외 세포 독성 시험 양성 대조품일반 배양기를 사용하여 침출하다.침출 방법은 다음과 같다: 무균 조작, 채취1g체외 세포 독성 시험 양성 대조품배치15ml무균 원심관에서3ml / g침출 비율은 침출 매체 배양기를 넣고 수평 배치 진동,120rpm，37℃ 조건에서 침출24시간. 침출이 끝나면 위아래를 뒤집어 섞는다.10다음, 침출액을 추출하여 시험에 사용한다.침출에 사용된 배지를 공백 대조로 삼다.잘 배양된 배양기는4℃ 조건에서 2주를 초과하지 않고 저장한다.체외 세포 독성 시험 채택MTT는법 검측: 상태가 좋은 것을 취한다L929세포, 소화 원심, 배합 세포 현액, 접종96구멍배양판.그룹당 복수 구멍 설정, 구멍당 접종100µL세포현액,치37℃、5%이산화탄소의CO2는배양함 배양24시간. 원배지를 버리고 가입100µL침출액, 공백 대조액,CO2는배양함 계속 배양.24시간이후 현미경으로 세포 형태를 관찰한다.구멍 안의 액체를 버리고 구멍마다 첨가50µL1mg/mL의 무균MTT는용액 (MTT는쓰다MEM은배양기 배치, 현용 현배, 배양기 배합 불가), 계속 배양2시간구멍 안의 액체를 버리고100µL이소프로필렌글리콜, 진동 혼합,570nm와650nm파장에서 흡광도를 측정해 세포 생존율을 계산한다.

세포독성시험은 생체외 세포배양의 방법을 이용해 생체재료와 의료기기나 침출액의 잠재적인 세포독성을 평가하는 것으로, 생체재료 생물학적 평가체계에서 중요한 측정지표 중 하나이자 거의 다양한 용도의 의료기기와 생체재료를 반드시 검사해야 하는 항목이다.세포독성시험은 생물재료가 세포대사기능에 미치는 영향을 단시일내에 시험할수 있으며 재료가 잠재적인 세포독성을 갖고있는가를 재빨리 선별할수 있다.

세포독성시험은 생물재료의 독성을 검출하는 수단으로서 간편하고 민감성이 높으며 원가가 낮고 시험주기가 짧다는 등 장점이 있어 생물재료와 의료기기 제품의 생물상용성 검사와 평가 수단으로 널리 사용된다.생체재료의 세포독성에 대한 평가방법은 세포의 형태와 수량변화를 관찰하던데로부터 세포의 접착, 증식, 대사 등에 대한 평가로 발전하여 활력있는 세포수와 세포증식능력을 생체재료세포의 생물상용성을 평가하는 평가방법으로 삼았다.구체적인 실험으로는 중성홍색 섭취시험, 클론 형성시험,MTT는세포독성시험과XTT는세포독성시험 등 방법 중MTT는와XTT는세포독성시험방법은 재료의 세포독성을 정량적으로 측정할수 있기에 더욱 사람들에게 접수되고 응용도 더욱 광범위하다.

MTT는와XTT는세포독성시험검측원리는 활세포 미토콘드리아에서 호박산탈수소효소가 외원성을MTT는물의 불용성으로 환원된 청자색 결정 갑옷(포르마잔)그리고 세포에 축적되어 죽은 세포는 이런 기능이 없다.디메틸 아술폰(DMSO)또는 이소프로필알코올 또는 피라진 황산 메틸(PMS)세포 속의 메틸렌 결정을 용해시킬 수 있으며, 효소 측정기로570nm파장에서 그 광흡수치를 측정하면 일정한 세포수범위내에서 결정이 형성된 량은 세포수와 정비례한다.측정된 흡광도 값에 근거하여(OD)값), 살아있는 세포의 수를 판단하고,OD는값이 클수록 세포 활성이 강하고 독성이 적다.세포의 증식률을 계산함으로써 의료용 재료와 그 제품의 세포독성을 정량적으로 등급별로 평가할 수 있다.침출액의 농도에 따라 희석된 상태에서 세포의 생존도를 계산할 수도 있다IC50는세포 활성 억제50% 농도)생물재료와 그 제품의 세포독성을 평가한다.

체외 세포 독성 시험 양성 대조품차수 재현성이 좋고 성능이 안정적이며 규격 크기가 풍부한 특징을 가지고 있어 의료기기 생물학으로 평가할 수 있다-세포독성 측정에 이상적인 재료.