재조합 인간 신경성장인자-베타(베타-NGF)

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신경성장인자(NGF는) 교감신경과 감각신경계의 발육과 유지에 매우 중요하다.NGF는알파, 베타, 감마아기라는 세 가지 폴리펩타이드로 구성된 복합체로 확인됐다.그 중 베타 아기, 즉 베타NGF일종26.9 kDa의의 단백질, 함유 241 개의 잔기, 뉴런의 생존과 분화에 관여한다.또한βNGF아직TRKA는수용체의 배합체는TRKA는수체는 통각과 온각 신경원의 분화와 발육소이다.

태그:

1. 세포배지와 EdU 용액을 500:1의 비율로 혼합하여 2×EdU 마커 배지를 만든다.

2. 2×EdU 마커 배지를 미리 예열한 다음 2×EdU 마커 배지 150㎖를 등체적 세포 배지와 혼합해 1×EdU 용액을 얻는다.

[주]: ① 모든 배양기를 교체하는 것을 권장하지 않는다. 이렇게 하면 세포 증식의 속도에 영향을 줄 수 있다.② 배치된 배양기는 즉시 사용하고 즉시 배합하며 용량은 세포를 통과하지 않은 것이 좋다.

3. 세포를 2h 부화시키고 배양기를 버린다.

[주]: ①배양시간은 세포의 증식속도와 성장상태에 의해 결정된다.② 대부분의 종양세포와 접착세포계는 2h의 부화시간을 사용할 수 있다.

4. DNA가 섞이지 않은 EdU 잔류를 제거하기 위해 세포를 1xPBS로 두 번 5min씩 세척한다.

[주]: 벽에 잘 붙지 않는 세포는 세척 강도를 낮출 수 있다.

실험 단계:

1. 세포를 세포/구멍 104-105개 밀도로 96공판으로 접종하고 100μL 배양기를 넣어 측정 대기 화합물을 함유하거나 포함하지 않는다.CO2 배양함에서 37℃에서 24시간 동안 세포를 배양한다.

2. 판자에 10μL의 다른 농도의 측정 대기 물질을 넣는다.

3. 배양함에서 배양판을 적당한 시간 (예: 6, 12, 24 또는 48시간) 에 배양한다.

4. 판의 각 구멍에 CCK-8 용액 10μL를 넣는다.풍선이 구멍으로 유입되지 않도록 주의하십시오.

5. 배양함에서 1 ~ 4시간 동안 판넬을 부화시킨다.

6. 판독에 앞서 레일 발진기에 가볍게 섞는다.

7. 효소 측정기를 사용하여 450nm의 흡광도를 측정한다.

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