재조합 인간 뼈 형태 발생 단백질 3 (BMP-3)

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BMP-3는골생성소라고도 하는데 성인의 뼈에 함량이 높은 것이다BMP는적어도15종 구조 및 기능 관련BMP는중 하나TGF-베타 초가족.TGF-베타 가족 구성원은 세포 증식, 분화, 기질 합성과 쇠망의 핵심 조절 인자이다.이름과 같이BMP뼈와 연골의 발육, 성장, 재창조를 가동, 촉진, 조절할 수 있다.그 외에도,BMP다른 다양한 조직과 기관의 산전 발달, 산후 성장, 재창조 및 유지에도 관여합니다.BMP-3는성인 뼈에 많이 존재하고 그 다음은 태아 연골이다.BMP-3는신호 종속 연결을 활성화함으로써 옹색은 골세포 생성소의 신호 전도를 촉진하여 성골과 뼈 형성을 억제한다.

태그:

1. 세포배지와 EdU 용액을 500:1의 비율로 혼합하여 2×EdU 마커 배지를 만든다.

2. 2×EdU 마커 배지를 미리 예열한 다음 2×EdU 마커 배지 150㎖를 등체적 세포 배지와 혼합해 1×EdU 용액을 얻는다.

[주]: ① 모든 배양기를 교체하는 것을 권장하지 않는다. 이렇게 하면 세포 증식의 속도에 영향을 줄 수 있다.② 배치된 배양기는 즉시 사용하고 즉시 배합하며 용량은 세포를 통과하지 않은 것이 좋다.

3. 세포를 2h 부화시키고 배양기를 버린다.

[주]: ①배양시간은 세포의 증식속도와 성장상태에 의해 결정된다.② 대부분의 종양세포와 접착세포계는 2h의 부화시간을 사용할 수 있다.

4. DNA가 섞이지 않은 EdU 잔류를 제거하기 위해 세포를 1xPBS로 두 번 5min씩 세척한다.

[주]: 벽에 잘 붙지 않는 세포는 세척 강도를 낮출 수 있다.

실험 단계:

1. 세포를 세포/구멍 104-105개 밀도로 96공판으로 접종하고 100μL 배양기를 넣어 측정 대기 화합물을 함유하거나 포함하지 않는다.CO2 배양함에서 37℃에서 24시간 동안 세포를 배양한다.

2. 판자에 10μL의 다른 농도의 측정 대기 물질을 넣는다.

3. 배양함에서 배양판을 적당한 시간 (예: 6, 12, 24 또는 48시간) 에 배양한다.

4. 판의 각 구멍에 CCK-8 용액 10μL를 넣는다.풍선이 구멍으로 유입되지 않도록 주의하십시오.

5. 배양함에서 1 ~ 4시간 동안 판넬을 부화시킨다.

6. 판독에 앞서 레일 발진기에 가볍게 섞는다.

7. 효소 측정기를 사용하여 450nm의 흡광도를 측정한다.

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Klenow 파편사양:1500 단위

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T4 DNA 중합酶사양:100 단위

T4 DNA 중합酶사양:500 단위

T7 DNA 중합酶사양:300 단위

phi29 DNA 중합酶사양:250 단위

phi29 DNA 중합酶사양:1000 단위

phi29 DNA 중합酶사양:5000 단위

T3 RNA 중합酶사양:2000 단위

T3 RNA 중합酶사양:10000 단위

T3 RNA 중합酶, HC사양:10000 단위

T7 RNA 중합酶사양:5000 단위

T7 RNA 중합酶사양:5x5000 단위

T7 RNA 중합酶, HC사양:25000 단위

SP6 RNA 중합酶사양:2000 단위

SP6 RNA 중합酶, HC사양:5000 단위

종말 Deoxynucleotidyl 전송酶사양:500 단위

종말 Deoxynucleotidyl 전송酶사양:2500 단위

M-MuLV 역전역酶사양:1000 단위

M-MuLV 역전역酶사양:5000 단위

Taq DNA 중합酶 (재조합)사양:500 단위

Taq DNA 중합酶, LC (재조합)사양:500 단위

Taq DNA 중합酶 (재조합)사양:5x500 단위

Taq DNA 중합酶 (재조합)사양:10x500 단위

Klenow Fragment, 외부–사양:300 단위