사람 림프구 기능 관련 항원 3 ELISA 시약함

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ELISA는시약함 조작 주의사항

1. 시약함은2-8℃, 전실 온도 균형 사용20분.냉장고에서 꺼낸 농축 세척액에는 결정이 있을 수 있는데, 이는 정상적인 현상에 속하며, 수욕 가열로 결정*을 녹인 후 사용한다.

2. 실험에서 사용하지 않는 판자는 즉시 자봉주머니에 넣고 밀봉(저온건조)하여 보존해야 한다.

3. 표준품 희석액은 음성 대조 또는 공백으로 볼 수 있다;사전 처리된 견본은 희석할 필요 없이 직접 채취한다10μL견본을 추가하면 된다.

4. 엄격히 설명서에 명시된 시간, 가액량 및 순서에 따라 온육 조작을 진행한다.

5. 모든 액체를 조합하여 사용하기 전에 충분히 흔들어라.

시약 준비

20×세척 완충액의 희석: 증류수에 따라1：20희석, 즉1몫20×세척 완충액 더하기19분의 증류수.

세판 방법

1. 수공 세척판: 구멍 안의 액체를 다 털어내고, 구멍마다 세척액을 가득 채우고, 가만히 둔다1분뒤에 구멍 안의 액체를 다 털어내고, 흡수지에 두드려 말리고, 이렇게 판을 씻는다.5차.

2. 자동 세판기: 구멍마다 세액 주입350μL, 담그기1분, 세판5차.

작업 단계

1. 실온에서 균형을 맞추다20분뒤의 알루미늄 포일 주머니에서 필요한 판자를 꺼내고, 나머지 판자는 자봉봉지로 밀봉하여 다시 놓는다4℃。

2. 표준품공과 견본공을 설치하고 표준품공에 각각 다른 농도의 표준품을 첨가한다50μL；

3. 테스트 대기 샘플 구멍에 테스트 대기 샘플을 추가하십시오.10μL샘플 희석액을 더하면40μL；

4. 그 후 표준 제품 구멍과 샘플 구멍에 매운 뿌리 과산화물 효소(HRP는) 표시된 검사 항체100μL, 봉판막으로 반응구멍을 막고,37℃수욕솥 또는 항온상자 온육60분。

5. 액체를 버리고, 흡수지를 두드려 말리고, 구멍마다 세척액을 가득 채워 고정시킨다.1분, 세척액을 뿌리고, 흡수지를 두드려 말리고, 이렇게 반복해서 세척판을5차 (또한 세판 기계로 세판할 수도 있음).

6. 구멍마다 베이스 추가A、B각50μL，37℃빛을 피해 부화하다.15분。

7. 구멍마다 종료액 넣기50μL，15분안쪽450nm파장에서 각 구멍의OD는값.

결과 판단

표준 커브 그리기:Excel은작업표에서 표준품 농도를 가로 좌표로 하여 대응한다OD는값은 누진 좌표로 표준 품선형 회귀 곡선을 그리고 곡선 방정식에 따라 각 견본의 농도 값을 계산한다.

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