끝 입자 길이 체크

텔로미어 길이 검사 (telomere) 는 진핵 생물 선형 게놈 DNA 말단의 특수 구조로 DNA 서열과 단백질이 형성된 복합체로 정상 염색체 끝부분 간에 융합이 일어나지 않도록 하여 각 염색체의 완전성을 보장하고 세포의 성장과 분열 주기를 통제하며 세포의 쇠망, 세포의 전환과 영생화와 밀접한 관련이 있다.

　　끝 입자 길이 체크(telomere) 는 진핵생물선형게놈DNA말단의 특수한 구조로서 DNA서렬과 단백질이 형성한 복합체로서 정상적인 염색체의 끝부분간에 융합이 일어나지 않도록 하고 매개 염색체의 완전성을 보장하며 세포의 생장과 분열주기를 통제하며 세포의 쇠망, 세포전환과 영생화와 밀접한 관계가 있다.인간의 텔로미어 반복 시퀀스 DNA는 반복적으로 정렬된 TTAGGG로 구성됩니다 (오른쪽 그림 참조).

정상인 세포는 분열 과정에서 DNA의 복제가 그 맨 끝의 작은 서열을 복제할 수 없어 세포가 분열될 때마다 DNA가 좀 짧아지는'염색체 끝 축소'다. DNA 끝에는 텔로미어 서열의 보호가 있기 때문에 DNA 복제는 정상적인 DNA 서열을 위협하지 않고 텔로미어 서열의 일부만 손실된다.세포가 여러 번 복제되어 텔로미어가 어느 정도 단축되면 정상적인 DNA 서열이 불안정해지고, 이때 세포도 노화와 사망으로 나아가기 시작한다.연구에 따르면 정상적인 상황에서 인체 세포는 평균 50회 정도 분열 복제된 후 자체 독소로 인해 괴사할 수 있는데, 이를'하이프릭 한계'라고 한다.

본 제품 시약함은 2색 형광 qPCR(SYRBgreen+VIC)로 단립의 상대 길이를 측정하며, 검사 대상은 혈액, 구강 면봉 또는 세포 DNA이다.이 시약함은 다음과 같은 특징을 가지고 있다.

1.안정: 전 과정 폐관 조작, 교차 오염 없음.

2.신뢰성: 단립자와 내삼단관검측으로 구멍간의 교란을 감소시킨다.

내삼 유전자는 다중 복제본으로 단립량과 차이가 떨어진다.

3. 편리함: 조작이 간단하고 전기 수영 절차가 필요 없다.

4.정량:△CT값,단립자의 상대 길이를 정량적으로 측정할 수 있습니다.

　　끝 입자 길이 체크비교적 간단한 검사로서 대량의 시작DNA (약 50ng) 가 필요하지 않다.평균 TL(Telomere Length, 텔로미어 길이)에 정비례하는 T/S 비율을 측정하여 상대 TL을 식별하는 데 사용될 수 있습니다. 이 기술의 성질은 대량 검사에 적용될 수 있기 때문에 대규모 인구 연구에 널리 사용됩니다.그러나 Q-PCR은 상대적 정량만 제공하기 때문에 데이터는 다른 방법으로 결정된 평균 TL을 가진 참조 세포계와 비교하지 않는 한 kb 형태의 절대 텔로미어 길이로 나타나지 않습니다.이 방법의 측정 결과의 변이 계수가 10% 보다 높을 수 있다는 연구결과가 있다.그리고 단일 복제 유전자가 다르기 때문에 실험실마다 결과가 크게 다를 수 있다.또한 Q-PCR은 최단 텔로미어에 대한 정보를 제공하지 않습니다.마지막으로 TL 측정에 사용되는 Q-PCR은 암 연구에 적합하지 않을 수 있으며, 그 중 내삼단 복제 유전자는 비정배성으로 인해 복제되거나 분실될 수 있다.따라서 Q-PCR의 적용성은 정상 2배체와 핵형이 안정된 샘플에 국한된다.

텔로미어는 모든 척추동물의 선형 염색체 끝에 있는 비코딩 직렬 반복성(TTAGGG) n 서열이다.텔로미어의 3'말단 단일 체인은 이중 체인 DNA에 침투하여 T 링을 형성하는데, 이는 또한 체인의 변위를 초래하여 단일 체인 텔로미어 D- 링을 생성한다.T링은 텔로미어의 특수한 구조로 텔로미어 보호 단백질인 쉘테린 복합체와 직간접적으로 결합해 염색체 끝이 DNA 이중사슬이 끊어진 것으로 식별되지 않도록 보호한다.

텔로미어는 진핵세포 염색체 말단이 중복성dna 서열과 특수한 텔로미어 결합 단백질로 구성된 특수한 구조로, 그 중 척추동물의 텔로미어는 g가 풍부한 짧은 쌍사슬 중복 서열인 ttaggg가 직렬로 구성되어 있다.텔로미어는 염색체 말단의 분해, 융합, 재배열을 방지하여 염색체의 독립성, 완전성, 안정성을 유지할 수 있다.텔로미어는 코딩 기능을 갖추지 못했지만 과학자들은'생명의 시계'라고 부른다. 텔로미어의 길이와 안정성이 세포의 수명을 통제하고 세포의 암 변화와 노화와 밀접한 관련이 있기 때문이다.

정상적인 인간체세포에서 텔로미어의 길이는 세포가 분열됨에 따라 점차 단축된다. 세포가 분열될 때마다 텔로미어의 길이가 한 토막 단축되어 20~30개의 뉴클레오티드를 손실한다. 텔로미어가 어느 정도 단축되면 핵단백질 구조의 결핍을 유도하고 복제성 노화를 촉발하여 세포증식 감소, 성장 정체, 건성 감퇴, 분화 능력 상실 등의 현상이 나타난다.이와 동시에 단축된 단립에서 일부 단립특수결합단백질의 분실은 세포가 단립말단을dna단렬위치점으로 잘못 식별하여 dna복원기능을 가동하여 단립염색체간의 말단융합을 초래하게 되는데 염색체의 융합은 세포유사분열이상을 초래하고 세포주기가 정체되여 p53단백질이 유도하는 세포의 쇠망을 초래하게 된다.

이밖에 p53 등 유전자돌연변이로 세포주기검사점의 결함을 초래한 세포는 복제성로쇠를 뛰여넘어 지속적으로 분열되여 최종적으로 위기기에 진입하게 되는데 이 시기에 극소수의 세포는 단립자효소를 표현하고 단립자효소의 활성을 활성화하며 세포의 단립자길이를 복구하고 유지하여 세포를 암세포로 영생화시킨다.직장암, 유방암, 폐암, 전립선암 등 90% 의 암세포에서 텔로미어 과다 단축과 텔로미어 효소 활성이 발견됐다.텔로미어 이상으로 인한 질환으로는 백혈병, 재생장애성 빈혈, 골수증식 이상과 선천성 각화 불량 등이 꼽힌다.텔로미어는 인간의 노화와 질병의 발생 과정에서 매우 중요한 역할을 하며, 텔로미어 반복 서열의 길이 변화는 세포의 운명을 결정하기 때문에끝 입자 길이 체크단립생물학 연구에서 중요한 실험 방법이다.

또한끝 입자 길이 체크노화 질환과 종양에서도 중요한 진단 가치가 있다.종속 차이로 인해 인간 염색체의 단립 길이 (이중 체인 구역 길이는 일반적으로 0.5~20kb) 는 대부분의 실험실 모델 생물보다 훨씬 작습니다.또한 개체에 따라 세포중의 단립단축정도가 다르며 세포내의 부동한 염색체의 단립단축정도도 다르다.길이가 3kb 미만인 텔로미어는 짧은 텔로미어로 정의되며, 평균 텔로미어가 아닌 가장 짧은 텔로미어의 길이는 텔로미어 기능이 상실되어dna 손상을 유발하고 세포의 생존을 제한하는 데 중요한 역할을 한다.따라서 단일 염색체 수준에서 인간의 텔로미어 길이와 짧은 텔로미어 비율을 정확하고 간단하며 빠르고 통량적으로 측정 할 수있는 방법이 시급합니다.

텔로미어 관련 유전 질환의 발전 과정에서 텔로미어가 비교적 짧을 때 질병의 조발을 초래할 수 있다.연구가 깊어짐에 따라 사람들은 비만, 흡연, 운동 부족, 만성 스트레스 등 생활 방식 요인도 순환 외주혈 백혈구 중의 텔로미어 길이에 영향을 줄 수 있다는 것을 점점 더 인식하고 있다.또 텔로미어 기능 장애를 유발하는 텔로미어 단축은 불임증, 관절염, 당뇨병, 암, 심혈관·신경퇴행성 질환 등 많은 연령 관련 질환과 관련이 있다.따라서 이러한 질병의 발생을 예측할 수 있는 안정적이고 반복 가능한 텔로미어 길이 측정 방법이 중요하다.

그러나 기본적으로 발표된 모든 텔로미어 관련 질병의 대규모 인구 연구는 본질적으로 관련성 연구이며 텔로미어의 평균 길이 또는 상대 텔로미어 길이에 대한 정보만 제공합니다.DNA 손상 반응을 촉발하는 것은 가장 짧은 텔로미어여서 포유동물의 복제성 노화를 초래한다는 증거가 많다.최단단립의 길이는 세포의 운명과 로쇠의 시작을 결정하는 관건적인 생물표지물이지만 단단립을 검사할수 있는 방법은 시간과 힘을 들여 높은 통량요구를 실현할수 없다.그러므로 기존의 단립길이측정방법은 우열을 가리지 않고 각기 천추가 있다.

텔로미어 길이의 비정상적인 변화는 질병 초기에 발생할 수 있으며, 텔로미어 길이는 수십 년 후에 일부 질병의 조기 선별 검사 지표가 될 수 있으며, 심지어 보조 진단 지표 또는 예후 평가 지표가 될 수 있다.간단하고 실행하기 쉬운 높은 통량 검사 방법은 대규모 사람들의 역학 연구에서 텔로미어 관련 질병을 찾는 데 사용할 수 있으며, 서로 다른 텔로미어 길이 분포의 더 정확한 검사 방법을 제공하여 텔로미어 길이와 관련 질병 사이의 가능한 메커니즘을 찾는 데 사용할 수 있다;물론 높은 통량과 정확성, 다방면의 정보를 제공할 수 있는 텔로미어 검사 방법은 더욱 우리 연구의 목표가 되어야 한다.