다중 형광 면역 조화 검사

　　다중 형광 면역 조화 검사의 주요 기술 원리는 TSA(타이레놀 아미드 신호 증폭) 기술에서 비롯됩니다.TSA는 매운 뿌리 과산화효소(HRP)를 이용해 표적 단백질이나 핵산을 고밀도 원위치로 표시하는 효소학적 검사법이다.이 기술은 타민티라미드의 과산화물 효소 반응을 이용해 항원-항체 결합 부위에 다량의 효소 촉진물을 생성한다.이러한 산물은 주위의 단백질 잔기와 결합하고, 나아가 형광 기단과 결합하여 검측 신호를 기하급수적으로 증폭시킨다.이 기술은 Alexa Fluor, 전통적인 형광 염료 등과 같은 고성능 염료와 호환되어 다중 형광 마커를 구현할 수 있습니다.

다중형광면역조화기술은 여러 분야에 널리 응용되고있다.

　　단세포 분석: 단일 세포 수준에서 여러 단백질의 발현을 동시에 감지 할 수 있습니다.

　　칩 분석: 바이오칩에서 높은 통량의 다중 단백질 검사를 실현한다.

　　조직 형태 및 기능 분석: 조직에서 서로 다른 단백질의 공간 분포와 상호 관계를 연구한다.

　　종양 미세 환경 분석: 종양 면역 침윤, 면역 검사 지점, 종양 세포와 면역 세포의 공간 관계 등을 파노라마적으로 분석한다.

　　자가면역질환 분석: 자신의 면역 질병의 발병 메커니즘과 병정 진전을 탐구한다.

　　배이 반응 평가: 모니터링 및 평가 후 면역 배이 반응.

다중형광면역조화검사의 대체적인 절차는 다음과 같다.

　　샘플링: 일반적으로 슬라이스 방법을 사용하여 테스트할 조직 샘플을 가져옵니다.

　　고정 처리: 포름알데히드나 에탄올 등 물질로 조직 샘플을 고정시켜 형태 구조를 유지한다.

　　슬라이스 처리: 고정된 조직을 얇게 썰어 보통 두께가 4-5마이크로미터입니다.

　　항체 표시: 특정 항체를 선택하여 목표 단백질에 표시한다. 이런 항체는 보통 형광소나 효소 등 물질과 결합한다.

　　TSA 확대: TSA 기술을 이용하여 신호 증폭을 진행하여 형광소가 항원-항체 결합 부위에 대량으로 퇴적되도록 한다.

　　염색처리: 형광 염색 방법을 통해 표시된 항체를 특정 조직 세포와 결합시킨다.

　　이미지 수집 및 분석: 형광 현미경 또는 공초점 현미경을 사용하여 이미지를 수집하고 정량 및 정성 분석을 수행합니다.

다중 형광 면역을 그룹화하는 이미지 분석 방법은 다음과 같습니다.

　　정성 분석: 형광 신호의 분포와 강도를 관찰하여 목표 단백질의 조직에서의 표현과 위치를 판단한다.

　　정량 분석: 이미지 처리 소프트웨어를 이용하여 형광 신호를 계량화하고 서로 다른 샘플이나 서로 다른 조건에서의 단백질 표현 차이를 비교한다.

　　공통 위치 분석: 서로 다른 형광 신호 간의 공간 관계를 분석하고 단백질 간의 상호작용과 공동 위치 상황을 탐구한다.

이러한 분석 방법을 통해다중 형광 면역 조화 검사기술은 풍부한 생물학 정보를 제공할 수 있어 세포의 생리와 병리 과정을 깊이 이해하는 데 도움이 된다.