RiboNAT™신속 무균 검사 시약함

RiboNAT™ 신속 무균 검사 시약함

주사용약의 안전성검사에서 다국약전이 규정한 무균검사법은 적어도 14일간 배양해야 한다.그러나 일부 세포 치료는 생산 후 며칠 이내에 환자에게 주입되어야하므로 약을 공급하기 전에 무균 검사를 완료하기가 어렵고 결과를 더 빨리 제공 할 수있는 무균 검사 방법에 대한 수요가 증가하여 환자의 안전성을 향상시킵니다.

RiboNAT™ 핵산증폭검사(NAT) 기술을 적용한 신속무균검사 시약함으로 7시간 만에 검사를 마칠 수 있어 기존 방법에 비해 검사 시간을 대폭 단축했다.기존 NAT 검사가 미생물만을 대상으로 하는 게놈 DNA와 달리RiboNAT™검출된 것은 리보핵RNA(rRNA)다.rRNA는 미생물에 많이 함유되어 있기 때문에 검사를 더욱 민감하게 한다.이와 동시에 전통적인 방법은 사균잔류DNA 또는 환경 및 재료중의 오염DNA로 인해 가양성을 초래하기 쉬우며 RiboNAT은™ 이 문제를 효과적으로 줄이고 검사의 정확성을 높였다.

◆ 특징

● 검사 당일 결과 얻기 (약 7시간)

● rRNA를 이용한 실시간 역전 PCR법(RT-rt PCR) 검사, gDNA 검사보다 감도(9CFU/mL) 높아

● 사균과 잔류 DNA로 인한 가짜 양성 감소

● 한 번에 여러 종류의 세균 (산소 요구와 염산소) 과 진균을 동시에 검출할 수 있다

◆ 실험 프로세스

◆ 테스트 키트 사양

◆ 시약함 구성

◆ 감도 체크

그림 1. 민감도 측정

약전에 규정된 6가지 미생물에 대해 농도가 9CFU/mL인 미생물 현액을 제조했다.RiboNAT 활용™이 현액에서 RNA를 추출하고 핵당체 RNA(rRNA)를 검사한다.모든 미생물의 rRNA가 성공적으로 검출되었으며 Ct 값은 35 미만입니다.

그림2. 세포 현액 샘플에서의 검측 민감도

약전에 규정된 6가지 미생물에 대하여 농도 9 CFU/mL의 미생물 현액을 제조하였으며 각각 0.25 × 10과⁶ cells/mL의 HEK293 세포 혼합.RiboNAT 활용™혼합 현액에서 RNA를 추출하고 rRNA를 검사합니다.모든 미생물의 rRNA가 성공적으로 검출되었으며 Ct 값은 35 미만입니다.

또한 6개의 모든 균주가 다음 조건에서 체크 아웃됩니다 (데이터가 표시되지 않음).

· 간충질줄기세포(MSC): 0.5×10⁶세포/mL

· T 세포: 1.0 × 10⁶세포/mL

◆ 민감도 높은 검사법

■ 균 농도: 2CFU/mL

■ 부화시간: 3~15h

그림3. 민감도가 높은 검측 방법

브라질 페니실린(Aspergillus brasiliensis), 산포소균(Clostridium sporogenes), 여드름 아세트균(Cutibacterium acnes)에 대해 농도를2개의 CFU의 미생물 현액.리보낫은 하지만.™일반적인 조작 절차에 규정된 부화 시간은 3시간이지만, 이 실험은 부화 시간을 3~15시간으로 지연시켰다.부화가 끝나면 RiboNAT 사용™RNA를 추출하고 rRNA를 검사합니다.그 결과 엄격한 혐기성 균(산포소균)과 성장이 느린 세균(여드름 아세트균)을 포함한 세 균주가 14시간 이상 부화한 뒤 모두 검출에 성공해 Ct 수치가 35보다 낮았다.

◆ 가짜 양성 감소

RiboNAT™ 사균 DNA 불활성화 시약 및 DNase 처리 절차가 포함되어 있어 시료에 DNA가 남아 있어 발생하는 가짜 양성 위험을 효과적으로 줄일 수 있다.

그림 4. 가짜 양성 감소

상업화된 무균 PBS를 테스트 시료로 사용해 세균 핵산 검사(NAT)를 한다.그 중 한 세트의 실험 (위 사진) 은 시판 시약함을 사용하여 DNA를 추출한 후 세균 표적 실시간 형광 정량 PCR 검사를 진행한다.RiboNAT을 사용한 또 다른 실험 그룹 (아래 그림)™RNA를 추출한 후 실시간 역전록 형광 정량 PCR 검사를 진행한다.DNA 기반 방법에서 6 개의 증폭 곡선이 관찰되고 RiboNAT 사용™증폭 신호가 감지되지 않았습니다.

◆ 제품 목록