단백질 양방향 전기 수영 실험 서비스

하나,단백질 양방향 전기 수영 실험 서비스실험 기술 소개

2D-WB는 양방향 전기 수영과 전통적인 western blot를 결합한 기술입니다.일반적으로 실험절차는 항원단백질혼합물이 먼저 쌍방향전영을 거쳐 분리된후 겔단백질을 지지막에 복사한후 다시 항체교잡을 통해 색을 나타내는것이다.2D-WB 기술은 항원 등 전점이나 분자량에서 일어나는 미세한 변화를 감지할 수 있어 단백질 번역 후 수식 연구에 잘 활용된다.2D-WB는 질량 스펙트럼 감정 기술을 결합하여 단백질 혼합물에서 면역 원성이 더 강한 항원을 찾을 수 있다.

2.단백질 양방향 전기 수영 실험 서비스개요

2D-WB는 양방향 전기 수영과 전통적인 western blot를 결합한 기술입니다.일반적으로 실험절차는 항원단백질혼합물이 먼저 쌍방향전영을 거쳐 분리된후 겔단백질을 지지막에 복사한후 다시 항체교잡을 통해 색을 나타내는것이다.2D-WB 기술은 항원 등 전점이나 분자량에서 일어나는 미세한 변화를 감지할 수 있어 단백질 번역 후 수식 연구에 잘 활용된다.2D-WB는 질량 스펙트럼 감정 기술을 결합하여 단백질 혼합물에서 면역 원성이 더 강한 항원을 찾을 수 있다.

3. 서비스 내용

1. 단백질 추출과 정량;

2. 쌍방향 전기 수영;

3. 전막, 폐쇄, 부화, 현상 표시.

4. 실험 조작 절차

1, 두 번째 - 종목 전기 수영 (IEF), 테이프 균형, 두 번째 종목 전기 수영 SDS-APGE.

2. 제2항 전기수영이 끝난후 겔을 꺼내 전막을 진행하는데 전막방법은 습법전이와 반건법전이를 선택할수 있다.흔히 사용하는 필름은 NC 필름과 PVDF 필름이다.

3. 폐쇄, 5% 탈지분유 또는 5% BSA 폐쇄 1시간 (실온) 또는 하룻밤 (4도).

4, 항부화, 항체 설명서에 따라 부화 시간을 선택하고, 일반적인 부화 조건은 실온 1시간 또는 4도로 밤을 보내고, 항부화 후 필름을 꺼내는 것이다

TBST 세탁 3회, 1회당 5분.

5, 2항 부화: 1항에 따라 적합한 2항 (항쥐, 항인, 항토끼 등) 을 선택하고 실온에서 부화한 후 1시간 후 필름 TBST를 꺼내 5분씩 3회 세탁한다.

6. 현상: A, B 바탕물을 비율에 따라 희석하여 혼합대에 균일하게 한 후 막에 떨어뜨리고 암실에서 필름을 막에 놓고 압편핀을 덮어 일정 시간 노출된 후 필름을 현상액에 넣어 현상한다. 선명한 단백질 밴드가 나타날 때까지 맑은 물을 헹군 후 정착액에 정착한다. 노출 시간은 종합대가 단백질의 상량, 항체 희석 농도, 부화 시간 등을 고려해야 한다.

7, 정착 후, 필름 세척, 건조, marker 식별, 스캔 사진 및 2D Western blot 사진 분석.

샘플 발송 주의사항, 2D Western blot 기술 서비스가 순조롭게 진행될 수 있도록 샘플 발송은 다음과 같은 요구를 만족시켜야 한다.

1. 고객 제공: 조직, 세포, 단백질 용액 등;일항. [연구회사에 맡겨 대리 구매할 수 있다.]

2. 운송 요구: 드라이 아이스 또는 액체 질소 포장 발송.

주: 견본은 각종 오염과 반복적인 동융을 피해야 한다.

5. 기술 서비스 보고 내용

1. 단백질 정량 결과 및 전기 수영 샘플;

2. 원본 필름, 전자 사진 및 사진 분석 결과;

3, 2D Western blot 완전한 실험 보고서, 실험 단계, 사용 기기 및 시약 등.

첨부: 2D Western blot 실험 단계

1, 2D Western blot 단백질 샘플 제조, 제조의 주요 원칙은 가능한 한 모든 단백질을 용해하고, 단백질과 단백질 간의 상호 작용을 파괴하며, 각종 간섭 물질을 피하고, 샘플 제조와 IEF 호환 등이다.

2、양방향 전기 수영의 주요 단계, 제 - 항 전기 (IEF), 테이프 균형, 제 2 항 전기 수영 SDS-APGE.

3. 제2항 전기수영이 끝난후 겔을 꺼내 전막을 진행하는데 전막방법은 습법전이와 반건법전이를 선택할수 있다.흔히 사용하는 필름은 NC 필름과 PVDF 필름이다.

4. 폐쇄, 5% 탈지분유 또는 5% BSA 폐쇄 1시간 (실온) 또는 하룻밤 (4도).

5. - 부화 방지, 항체 설명서에 따라 부화 시간을 선택, 일반적인 부화 조건은 실온 1시간 또는 4도 하룻밤, 1 부화 방지 후 분리막 TBST 세탁 3회, 매번 5분.

6, 2항 부화: -항에 따라 적합한 2항 (항쥐, 항인항토끼 등) 을 선택하여 실온에서 부화한 후 1시간 후 필름을 꺼내 TBST를 3회 세탁하고 매번 5분.

7. 현상: A, B의 바탕물을 비례에 따라 희석하여 골고루 섞은 후 필름에 떨어뜨리고 암실에서 필름을 필름에 넣고 압편핀을 덮고 일정 시간 노출된 후 필름을 현상액에 넣어 현상한다. 선명한 단백질 밴드가 나타날 때까지 맑은 물을 헹군 후 정착액에 정착시킨다. 노출 시간은 단백질을 종합적으로 고려해야 한다.상량, 항체 희석 농도, 항체 부화 시간 등 요소.

8, 정착 후, 필름 세척, 건조, marker 식별, 스캔 사진 및 2D Western blot 사진 분석.

에서2011년부터우리전념하다생명 과학 분야에서、생물의학 실험 아웃소싱 및 논문 윤색 서비스, 고객의 각종 실험 서비스 및 논문 윤색 협조십여 년신뢰할 수 있는 연구 파트너!

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