폴리펩티드 합성 및 수식 기술 서비스

실험기술소개: 폴리펩티드합성은 하나의 고상합성순서로 일반적으로 C단 (카르복실기단) 에서 N단 (아미노단) 으로 합성된다.과거의 폴리펩타이드 합성은 용액에서 이루어진 것을 액상합성법이라고 한다.1963 년 Merrifield가 고체 폴리펩타이드 합성 방법을 성공적으로 개발 한 이래, 끊임없는 개선과 *를 거쳐 오늘날까지 고체법은 폴리펩타이드와 단백질 합성에서 자주 사용되는 기술이 되었으며, 고전적인 액체 합성 방법 *의 장점을 나타냄으로써 각 단계의 제품 정제의 난이도를 크게 줄였습니다.폴리펩타이드 합성은 전반적으로 고상합성과 액상폴리펩타이드 합성 두 가지로 나뉜다.

실험 기술 원리:

폴리펩타이드 합성기는 고상합으로 반응원리가 되여 밀페된 폭발방지유리반응기에 아미노산을 이미 알고있는 순서 (서렬, 일반적으로 C단-카르복실기단에서 N단-아미노단으로) 에 따라 끊임없이 첨가, 반응, 합성하여 조작한후 폴리펩타이드 담체를 얻는다.고상합성법은 매 단계의 제품 정제의 난이도를 크게 경감시켰다.부반응의 발생을 방지하기 위해 반응에 참가하는 아미노산의 사이드체인은 모두 보호한다.카르복실기단은 유리되어 있으며 반응하기 전에 활성화되어야 한다.

실험 작업 프로세스:

1. 보호제거: Fmoc이 보호하는 기둥과 단일체는 반드시 -종알칼리성용제 (piperidine) 로 암모니아의 보호기단을 제거해야 한다.

2. 활성화와 교련: 다음 아미노산의 카르복실기는 일종의 활성제에 의해 활성화된다.활성화된 단일체와 유리된 아미노기 반응이 교차하여 펩타이드를 형성한다

키.이 단계에서는 많은 양의 초농도 시약을 사용하여 반응이 완료되도록 유도합니다.주기: 이 두 단계의 반응은 합성이 완료될 때까지 반복됩니다.

3. 세척 및 탈보호: 폴리펩티드는 기둥에서 씻어내고 그 보호기단은 일종의 탈보호제 (TFA) 에 의해 세척 및 탈보호된다.

폴리펩티드 코스메틱 유형:

1. C단 태그 기술:

C단아미드화(Amidation, C-termainal)

알데하이드(Aldehydes), 알콜화(Alcohols), pNA(P-Nitroanilide)

AMC、AFC、메틸에틸아민화(Cysteamide), 에스테르(Ester), N-알킬화(N-AlkyI Amides) 등

2. N단 태그 기술:

아세틸화 Acetylated(Acetylated), Palmytolyl, HYNIC, 바이오매스 마커(Biotinylated), Br 아세틸화(Bromoacetylated)

집게 반응 (DOTA, DTPA conjugated), 포름알데히드 (Formylated), 14 알킬, 18 알킬화 (Myristoylated) 호박 아세틸화, 팜 산화, 사과 산화, 지방 산화 등 (Succinylated)

3. 형광 표기 수식:

C단 코스메틱: AFC, AMC, Dap(Dnp), Lys(Dye), pNA, Rh110

N端修饰:Bodipy-FL, Cy3, Cy5, 텍사스 레드, 5-Tamra, 5-odoacetamido fluoresceinRhodamine 110 및 Rhodamine B 루시페린, EDANS

FAM, FITC, MCA, 로크스, Sulforhodamine 101, 5-TAMRA

4. 환화반응:

처음과 끝이 고리가 되고, 가운데가 고리가 되고, 특수가 고리가 된다(N -> C or Head to Tail)

2대2_황 키, 3대2 황 키(Disulfide(S-S bond formation). Triulide formation) 천연산물 활성 펩타이드 링(Cyclic-natural peptides)

5. 메틸화 수식:

사이드체인 메틸화Lys(For),LysS(Me), Lys(Me)2, Lys(Me)3, Arg(Me)2 symmetrical, D-Tyr(Me),D-Tyr(Et)N엔드 메틸화 (N-Me Arg, N-Me-Asp, N-Me-Glu, N-Me-Leu, N-Me-Nle, N-Me-Nva, N-Me-Phe, N-Me-S N-

Me-Ser, N-Me-Trp, N-Me-Thr, N-Me-Val)

6. 몇 가지 특수 수식:

다양한 짝짓기(BSA, KL H conjugated peptides for antibody production), 인산화(Phosphoserine, Phosphothreonine, Phosphotyrosine), 술폰화(Sulfated Tyrosine or Serine), MAPS(MultipleAntigenic Peide), 당펩타이드(Glide)

실험 고려 사항:

고객이 제공하는 기능:

1. 폴리펩티드 서열, 수량, 순도 및 특수 요구

2. 동결건조 폴리펩티드는 -20도에서 보존하거나 실온에서 보존할 수 있다

3. 용액펩타이드는 동결건조형태보다 훨씬 불안정하며 용액은 중성PH (5-7) -20도로 보존해야 한다.

4, 샘플의 반복적인 동결을 피하기 위해,하오견본으로 나누어 보관하다.

제공 기준:

폴리펩티드, 데이터.

기타:

대부분의 폴리펩티드의 첫 번째Xuan은용제는 초순수 공기 흡입수로 묽은 Z산이나 암모니아수는 각각 알칼리성이나 산성 폴리펩타이드 용해에도 도움이 된다.이 방법들을 사용한 후에도 녹지 않는 폴리펩타이드는 DMF, 요소, guanidiniam, chloride, acetonitnle로 녹이는 것이 좋습니다.

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