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브롬화 수소 글리세린 겔

협상 가능업데이트05/06
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원산지 Place of Origin

개요

CNBr activated Sepharose 4B$r$n 브롬화 수소 글리세린 겔 4B$r$n 적용: 친화적 계층 분석 충전재 $r$n 포장: 15g

제품 정보

CNBr 활성화된 세파로스 4B
브롬화 수소 글리세린 겔4B
응용: 친화층 분석 충전재
포장: 15g, 100g, 250g 고체 포장

제품의 성능과 안심할 수 있는 작동을 위해 사용하기 전에 이 매뉴얼을 자세히 읽고, 궁금한 점이 있으면 본사의 판매 후 기술 지원 또는 현지 판매원에게 문의하십시오(부록 참조).

1. 제품 소개

CNBr Focurose 4FF는 브롬화 시안을 활성화한 후 시안산 에스테르 기단을 함유한 빠른 유속 순화 매체로 우연성 단백질, 폴리펩티드, 핵산 등 아미노가 함유된 생물 분자에게 적용된다.생물의약 순화 공정에서 반복적인 검증을 거쳐 광범위하게 응용되었다.

특징은 다음과 같습니다.

a. 광범위하게 활용,브롬화 수소 글리세린 겔우연성 암모니아를 함유한 생물류 대분자에 적용할 수 있다.

b. 다중점 우연으로 간단하고 유연하며 빠르고 효과적이며 생물 분자의 생물학적 활성과 안정성을 효율적으로 유지할 수 있다.

c. 유속이 빠르고 생산률이 높으며 확대하기 쉽다.

표 1: 미디어 성능 매개 변수

기질

높이 교련 4% 의 글리세린

입경 범위

45-165µm

평균 입경

90µm

결합 적재량

30mg(Trypsinogen)/ml(미디어)

pH 안정성

3-11(장기) 2-11(단기)

최대 유속

700cm/h

작동 압력

≤0.3MPa

저장 용액

100% 아세톤

저장 온도

4-8℃

2. 짝짓기 조건

a. (A액) 세척

적당량의 침강 접착제(0.83g 세척 완료 후 약 1.0ml)를 취하여 5배 부피의 A액으로 매체를 다시 매달고 5min 후 용액을 말린다.이 단계를 5회 반복합니다.

참고: 이 단계는 매체를 활성화하는 데 사용되며, A액의 세척 부피가 충분하고 세척 시간이 0.5h 정도로 고정되어야 합니다 (너무 오래 된 매체 위의 기단은 수해됩니다).

b. 배합 용액의 제조

짝짓기하려는 생물분자를 B액으로 용해하거나 생물분자를 B액으로 치환한다 (생물분자농도는 1-10mg/ml, 5mg/ml 권장).

참고: 짝짓기 시 pH 및 소금 농도가 B액과 일치하는지 확인합니다.

c. 짝짓기

세척된 매체와 준비된 시료를 같은 비율(부피비)로 섞어 실온 조건에서 3~4h 부드럽게 섞는다. 짝짓기 성공(짝짓기 전후 생물분자 함량 측정을 통한 짝짓기 효율 확인)을 확인한 뒤 용액을 말린다.

비고: 우연은 실온 조건에서 3-4h를 우연으로 하는 것이 좋습니다. 불안정한 배기의 경우 4-8℃ 우연으로 밤을 보내는 것이 좋습니다.

d. (C액) 세척

5배 부피의 C액으로 우연히 연결된 매체를 다시 매달아 용액을 말린다.이 단계를 세 번 더 반복합니다.

참고: 이 단계는 미디어에 남아 있는 생체 분자를 세척하는 데 사용되며, 세척은 *.

e. 폐쇄

5배 부피의 C액으로 중현하고 실온 조건에서 3~4시간 부드럽게 섞은 후 용액을 말린다.

참고: 이 단계는 실온 조건에서 3-4시간 동안 부드럽게 섞인 미디어 위의 기단을 닫는 데 사용됩니다.

f. (D액과 E액) 세척

5배 부피의 D액으로 폐쇄된 매체를 다시 매달아 5min 후 용액을 말린다.다시 5배 부피의 E액으로 매체를 다시 매달고 5min 후에 용액을 말린다.이 단계를 세 번 반복합니다.

참고: 이 단계는 산성 알칼리로 짝짓기가 긴밀하지 않은 생물 분자를 씻어내는 데 사용됩니다.

g. 저장

5배 부피의 순화수로 매체를 다시 매달아 말린 다음 5배 부피의 20% 에탄올로 매체를 다시 매달아 말린 다음 마지막으로 20% 에탄올로 담가 보관한다.

참고: 이 단계는 미생물이 자라지 않도록 매체를 보존하는 데 사용됩니다.

h. 용액 조제

A액: 0.001MHCl, 0.5M NaCl, 조절 pH 3.0, 4-8 ℃ 보존(A액 사용 전 예냉 처리).

B 액체: 0.2M NaHCO3, 0.5M NaCl, pH 8.3 조절 (우연적으로 연결하려는 생체 분자가 IgG인 경우pH=8.5-9.0),실온 보존.

C액: 0.1M Tris-HCl, 조절 pH 8.3, 실온 보존.

D액: 0.05M Tris-HCl, 0.5M NaCl, pH 8.5 조절, 실온 보존.

E액: O.05M GAN 아미노산, 0.5MNaCl, 조절 pH 3.5, 실온 보존.

F액: 1.0M NaCl, 실온 보존.

3. 세척

세척 후 일부 강한 결합성 물질 (예를 들어 일부 강한 결합성 단백질, 변성 단백질, 지방 등) 을 제거하여 매체의 우수한 성능 (예를 들어 적재량, 유동성, 주효 등) 을 회복할 수 있다.

5회 사용 후 1회 세척을 권장하며, 구체적인 세척 빈도는 순화된 초기 샘플의 청정도에 따라 조정해야 한다.

(1) 일반 세척

a. 기둥 부피의 5-10배 순화수로 씻는다.

b. 기둥 부피의 5-10배의 D액으로 씻는다.

c. 기둥 부피의 5-10배의 E액으로 씻는다.

d. 기둥 부피의 5-10배의 F액으로 씻는다.

e. 기둥 부피의 5-10배 순화수로 씻는다.

f. 기둥 부피의 5-10배 에탄올 20%를 씻어 보관한다.

⑨ 격렬한 세척

a. 2-5배 기둥부피 0.2% 비이온형 오염제거제로 씻은 후 즉시 5-10배 기둥부피 순화수로 씻는다.

b. 기둥 부피 2-5배 6M 염산구니딘으로 씻은 후 즉시 기둥 부피 5-10배 순화수로 씻는다.

c. 5-10배 기둥 부피의 20% 에탄올로 씻어 보관한다.

비고: 격렬한 세척조건의 적용여부는 주로 우연한 생물분자의 안정성에 의해 결정되는데 이 조건을 채용하여 세척하기전에 먼저 소규모의 예비실험을 하여 생물분자의 안정성을 검증할것을 건의한다.

4. 활용 사례

사례 1

사례 2

5. 자주 묻는 질문

표 2: FAQ 및 솔루션

문제

가능한 원인

솔루션

짝짓기 효율이 낮다

1. B 액염농도나 pH가 안 맞아요.

B액 배합이 정확한지 검사하다

2. 짝짓기 시간 부족

짝짓기 시간 연장

3. 프리활성화 충전재 부적합

다른 종류의 예비 활성 충전재를 시도하다

순화 시 대상물이 매체와 결합되지 않음

또는 결합량이 낮음

1.이전 샘플 과부하

이전 샘플의 양을 낮추다.

2. 이전 속도가 너무 빠르다

상위 스플라인 유속 감소

3. 단백질이나 지방류가 매체에 모인다

적시에 효과적으로 매체를 세척하다.

4. 샘플을 저장하거나 샘플을 올리는 과정에서 비활성화

순화 대기 샘플을 정확하게 저장하여 샘플의 활성을 유지하다.

5. 배합기와 목표물의 결합 비율이 비교적 낮다

짝짓기 농도를 높이려고 시도합니다

6. 배합은 짝짓기 또는 세척 과정에서 분해된다

짝짓기 또는 세척에서의 베이스 안정성 검사

세탁 시 목표물을 수집하지 못했습니다.

또는 소량의 목표물만 수집

1. 대상물이 매체와 결합되지 않았거나 결합량이 적다

스플라인 속도 감소 및 미디어 결합 확인

2. 세탁 조건이 부적합

상응하는 세척 조건을 변경하거나 세척액의 세척 능력을 강화하다

3. 대상물이 세척액 조건에서 집적 침전

대상물의 세척액 조건(소금 농도와 pH 등)에서의 안정성 측정

목표물의 순도가 비교적 낮다


1. 샘플은 전처리를 거치지 않았다

샘플은 기둥에 오르기 전에 반드시 원심 분리나 여과를 거쳐야 한다

2.샘플 점도가 너무 높음

밸런스액으로 적당히 시료를 희석하여 점도를 낮추다.

3. 잡동사니 씻기 *

베이스라인이 안정되고 밸런스 액체와 일치할 때까지 세척 부피를 늘립니다

4. 불순물 단백질이나 지방류가 매체에 모여 침전한다

적시에 효과적으로 매체를 세척하다.

5.세탁 조건이 좋지 않다, 세탁 속도가 너무 빠르고 경도가 너무 가파르다.

세탁 조건을 조정하다.

6. 목표물에 강해가 나타난다

목표물의 안정성 검사

7. 원단 장전 효과가 좋지 않다

재장전 또는 구매

8. 불순물에 비특이성 흡착이 나타난다

적당히 첨가제를 선택하여 비특이성 흡착을 낮추다

9. 분리 기둥 상단에 큰 샘플링 볼륨이 있음

원통 재장착 또는 스플라인 볼륨 감소

10. 매체에서 미생물이 자란다

미디어를 사용한 후 미디어를 올바르게 저장하십시오.

미디어 로드 감소

1. 이전 속도가 너무 빠르다

상위 스플라인 유속 감소

2. 단백질이나 지방류가 매체에 모여 적재량이 감소한다.

제때에 매체를 세척하다.

3. 사용 횟수가 너무 많아 배합기 탈락

새 미디어 다시 짝짓기

4.샘플은 저장하거나 샘플을 올리는 과정에서 활력을 잃어 배합기와 비교적 잘 결합할 수 없다

순화 대기 샘플을 정확하게 저장하여 샘플의 활성을 유지하다.

크로마토그래피 피크 상승이 느리다

미디어 패딩

재장착기둥

크로마토그래피 피크 드래그

미디어 장전이 너무 느슨함

재장착기둥

기둥 침대에 금이 가거나 마르다

유출 또는 대체적 기포 도입

파이프라인에 누설이나 기포가 있는지 확인하고 기둥을 다시 설치하세요

액류 가 비교적 느리다


1. 단백질 또는 지방류 집합

매체나 여과막을 제때에 세척하다.

2. 단백질은 매체에 침전된다

목표물의 안정성과 매체의 결합 효율을 유지하기 위해 평형액과 세척액의 성분을 조정하다

3. 기둥 속 미생물 생장 분리

사용한 시약은 반드시 여과와 탈기를 거쳐야 한다;

샘플은 기둥에 오르기 전에 반드시 원심 분리 또는 여과해야 한다


6. 주문 정보

표 3: 주문 정보 표

제품

사양 (ml)

상품 번호

CNBr 포쿠로스 4FF

25

HZ1001-2

CNBr 포쿠로스 4FF

100

HZ1001-2

CNBr 포쿠로스 4FF

500

HZ1001-2

CNBr 포쿠로스 4FF

1000

HZ1001-2

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