셀룰로오스 스펙트럼 MMP(2/9) 검출 실험

셀룰로오스 스펙트럼 MMP(2/9) 검출 실험

효소분광법(Zymography)은 SDS-PAGE 전기영역과 반상겔 염색에 기반한 프로테아제 검출 방법으로 MMP-2, MMP-9 활성을 측정해 ELISA 방법보다 민감도가 10pg까지 높다.

기본 원리와 절차는 콜라겐 효소 바탕이 있는 SDS-PAGE 젤로 단백질 효소가 함유된 샘플을 분리하고, 전기 수영이 끝난 후 젤과 효소 반응 Bufer를 꺼내 부화시키며, 젤 염색과 탈색한다.젤라틴에는 베이스 단백질이 함유되어 있어 깊이 염색되어 짙은 색의 배경을 형성하지만 프로테아제 스트랩이 있는 위치에서 프로테아제는 젤라틴의 베이스 단백질을 분해하여 염색되지 않고 투과 영역을 형성하며 MMP-2, MMP-9의 위치 (효소 스펙트럼) 를 동시에 표시할 수 있으며 혈액, 삼출액, 세포 추출물 등을 검사할 수 있다.

서비스 주기: 10일 (영업일 기준)

결과 제공: 결과 보고서, 대표 사진, 조작 절차 및 관련 시약 기기 정보.

셀룰로오스 스펙트럼 MMP(2/9) 검출 실험샘플 제공 사항:

1) 고객은 실험 그룹, 번호 및 배경 설계 자료를 알려주고 구체적인 요구는 사전에 설명하십시오.

2) 표본 수집, 보존 및 운송:

① 조직 시료: 신선한 조직은 액체 질소 또는 -70도로 보관하고 조직은 100mg 이상이어야 한다.

② 배양세포: 세포계수를 통해 EP관에 2x106개 이상의 세포를 취하여 생리식염수 0.5ml를 첨가하고 고루 섞은 후 냉장고(-70°C, 반복적으로 얼지 않음)에 보관한다.

③ 혈액세포 표본: 항응고관으로 혈액 샘플을 보존하거나 림프구 분리액으로 세포를 분리한 후 생리식염수 0.5ml를 첨가하여 보존(-70°C에서 장기간 보존할 수 있으며 반복적으로 얼지 않도록 한다)

④ 혈청 또는 세포배양액 표본: 원심분리하여 불순물을 제거한 후 EP관에 제거하여 보존(49C는 15-20일, -70°C는 장기간 보존하여 반복적으로 얼지 않도록 한다)

4) 샘플 운송:

① 조직 샘플, 세포 샘플은 드라이아이스로 운송한다.

② 세포 샘플도 배양병을 직접 부칠 수 있다(오염되지 않고 배양액이 새지 않도록 밀봉한다).

③ 혈청 또는 상청액을 직접 얼음주머니에 넣어 부친다 (송시로정은 근 23일이면 도착할수 있다.)

고객 참고 사항:

검사 시스템에는 양성 참조 또는 내삼이 포함되어 있으며, 견적에는 단백질 추출이 포함되어 있다

실험 고려 사항:

1. 폴리아크릴아미드를 제조할 때는 기포 배출에 주의해야 한다.

젤라틴 스펙트럼의 활성은 칼슘 이온, 아연 이온, 및 PH 수치 등의 요소의 영향을 받기 때문에 완충액 배합은 엄격하고 정확해야 하며, 가능한 한 초순수를 사용하고 부화 온도도 잘 파악해야 한다.

3. 큰 빗으로

4. 부화액의 PH는 7.5-7.6, 복성의 TRITON 시간이 길면 솜 모양의 물건이 있기 때문에 실험할 때 최대한 신선한 구성을 사용한다.

5. 부화하는 37도는 CO2 배양함에 있지 말아야 한다. 부화액의 PH 수치가 바뀌기 때문에 일반 부화함에 있으면 된다.

6. 젤라틴은 4도 보관, 배합 후 1주일 이내 사용

실험 대행 서비스: