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상해시 가정구 묵옥로 185번지 1층 J
개요
임상급 냉동 보관액은 박리 용액으로 냉동 보관할 세포를 수집하고 세포 수를 계산한다.
제품 정보
CP-1 세포 동존액(임상급 동존액)
・일본 재생의학 등 제품 재료에 대한 자격 인증 획득
1.제품 1992년부터 보급 응용
2. 일본 내 GMP 설비에서 생산 제조
3. 비임상실험을 하였다
5. -80℃ 냉장고에서 냉동보관 가능
6. 동물 유래 성분이 포함되지 않음
7. 성분 공개 투명
8. 일본 원료약 등록증 보유(MF)
인스턴스 적용
I 부유세포와 밀착세포의 냉동법
II CP-1HG를 사용하여 조혈모세포를 냉동 보존/해동하는 방법
III。CP-1HG 간 충질 줄기세포 냉동 보존/해동 방법 사용
냉동 보존액의 제조
· 1. CP-1 고등급, 25% HSA, 매체를 4 ℃ 로 냉각한다.
· 2. CP-1 고급 6.8mL, 25% HSA 3.2mL 및 10.0mL 배지를 원심관에 넣고 골고루 섞는다.
· 3. 사용하기 전에 4 ℃ 에 보관하십시오.
세포 냉동 보존
· 1. 박리용액으로 냉동 보관할 세포를 수집하고 세포 수를 계산한다.
· 2. 원심에서 상청액을 제거한다.
· 3. 4°C로 냉각된 CP-1 고품격/25% HSA/배지(냉동보존액-2의 제조)를 미리 추가하여 1×106 세포/mL로 균일하게 부상한다.
· 4. 각 1mL를 냉동관에 넣고 냉동용기에 담아 -80°C에서 천천히 냉동한다.
· 5. 다음날 액체 질소 또는 -150 ℃ 의 깊은 냉동고로 옮긴다.
해동 세포
· 1. 원심관에 9mL 배양기를 미리 준비한다.
· 2. 액체질소에서 냉동된 냉동관을 꺼내 37°C의 온수욕에서 빠르게 녹인다.
· 3. 해동된 모든 세포를 배지에 첨가하고 원심분리한다.
· 4. 상청액을 제거하고 적당량의 배지를 첨가한다.
· 5. 각 사용하는 세포 유형의 최적 조건에서 배양한다.IV 평가결과(간충질줄기세포 냉동보존)
V는 CP-1HG를 사용하여 iPS/ES 세포를 냉동 보관하고 평가
Ⅰ．부유 세포와 밀착 세포의 냉동 방법
■ CP-1®고급차가운얼다저장/ 해얼다조혈간가늘다포의 방법CP-1®고급적용 대상충질마른다가늘다포랭얼다저장/ 해얼다측법
냉동 보존액의 제조
· 1. CP-1 고등급, 25% HSA, 매체를 4 ℃ 로 냉각한다.
· 2. CP-1 고급 6.8mL, 25% HSA 3.2mL 및 10.0mL 배지를 원심관에 넣고 골고루 섞는다.
· 3. 사용하기 전에 4 ℃ 에 보관하십시오.
세포 냉동 보존
· 1. 박리용액으로 냉동 보관할 세포를 수집하고 세포 수를 계산한다.
· 2. 원심에서 상청액을 제거한다.
· 3. 4°C로 냉각된 CP-1 고품격/25% HSA/배양기(냉동보존액-2의 제조)를 미리 추가하고,
1 × 106 세포 / mL로 균일하게 부상합니다.
· 4. 각 1mL를 냉동관에 넣고 냉동용기에 담아 -80°C에서 천천히 냉동한다.
· 5. 다음날 액체 질소 또는 -150 ℃ 의 깊은 냉동고로 옮긴다.
해동 세포
· 1. 원심관에 9mL 배양기를 미리 준비한다.
· 2. 액체질소에서 냉동된 냉동관을 꺼내 37°C의 온수욕에서 빠르게 녹인다.
· 3. 해동된 모든 세포를 배지에 첨가하고 원심분리한다.
· 4. 상청액을 제거하고 적당량의 배지를 첨가한다.
· 5. 각 사용하는 세포 유형의 최적 조건에서 배양한다.
Ⅳ．평가값매듭과일 (간충질마른다가늘다포랭얼다저장）
[목적] 장차 재생의학에 사용될 것으로 기대되는 인간충질줄기세포(hMSCs)를 CP-1 높은 등급에 냉동 보관할 수 있고, 저렴하고 편리한 드라이아이스를 통해 안정적으로 장기 운송할 수 있는 것에 관하여?
[방법] 사람의 지방 유래 간충질 줄기세포(MSC-AT) 또는 사람의 골수 유래 간충질 줄기세포(MSC-BM)를 CP-1High Grade 또는 대조(아래 그림의 A)(1x106 세포)/mL)에 냉동해 액체질소 탱크에 저장한다.액체질소 탱크에 저장한 후에는 드라이아이스 운반(-80°C·7일, -60°C·3일, 60°C·7일)을 가정해 녹인 즉시 생존율과 다음날 배양하는 각 조건에서 혈관에 대한 접착률(접착률=살아있는 세포 수/접종된 살아있는 세포 수)을 확인하도록 저장해야 한다.
[결과] 모든 조건에서 녹은 생존율은 90% 이상으로 차이가 관찰되지 않았다(아래 그림 B). 그러나 냉동된 hMSC를 대조한 결과 해동 다음 날 -60 ° C에 저장할 때 배양함에 달라붙지 않은 많은 사세포가 관찰되었지만 CP-1에 냉동된 hMSC에서는 사세포가 거의 관찰되지 않았고 거의 관찰되지 않았다.세포를 연결합니다 (아래 그림의 B와 C).
[결론] 드라이아이스 자체의 온도는 약 -80 ° C이기 때문에 CP-1High Grade에서 냉동 된 hMSC는 드라이아이스를 사용하여 안정적이고 장기적으로 운송 될 수 있다고 생각합니다.
