HPLC 제조 크로마토그래피 기둥은 고효율 액상 크로마토그래피(High Performance Liquid Chromatography) 기술에서 화합물을 분리하고 순화하는 데 중요한 도구다.

- 기둥 파이프: 일반적으로 스테인리스 스틸 또는 유리로 만들어지며 내압성과 화학적 안정성이 우수합니다.기둥관의 내경은 크로마토그래피 기둥의 장전량과 분리 규모를 결정하며, 일반적으로 제조된 크로마토그래피 기둥의 내경은 50~200mm 범위이다.

- 충전재: 크로마토그래피 기둥의 핵심 부분으로 흔히 볼 수 있는 충전재는 실리콘, 산화알루미늄, 유기중합체 마이크로볼 등이 있다.실리콘 기질의 충전재는 비교적 좋은 기계적 강도와 화학적 안정성을 가지고 있으며, 서로 다른 관능단 (예: C18, C8, C4 등) 을 결합하여 서로 다른 극성 화합물에 대한 분리를 실현할 수 있다.

- 체판: 기둥 파이프의 양쪽 끝에 위치하며, 충전재를 지탱하고, 충전재의 누출을 방지하며, 동시에 유동상이 균일하게 크로마토그래피 기둥을 통과할 수 있도록 보장한다.

HPLC 제조 크로마토그래피 기둥의 사용 단계:

1. 준비 작업

- 안전 검사: 실험실 구역의 안전성을 확보하고 실험실 옷, 장갑, 고글 등 개인 보호 설비를 착용한다.

- 계측 검사: HPLC 설비의 상태를 검사하여 기둥, 검측기, 펌프 등의 부품이 정상적으로 작동하도록 한다.HPLC 시스템을 켜고 적절한 온도, 유속 등의 매개변수를 설정하여 시스템이 안정 상태에 도달하도록 합니다.

- 유동상 준비: 실험 요구에 따라 유동상을 조제하여 용매 또는 유동상을 0.2μm 여과지로 여과하고 그 속의 기포와 불순물을 제거하기 위해 초음파 탈기를 한다.

- 시료 준비: 측정 대기 시료를 적정 용매로 녹여 적정 농도로 희석하고, 마찬가지로 0.2μm 여과막으로 여과하여 시료 용액이 불순물이 없도록 한다.

2. 크로마토그래피 기둥 설치: 제조 크로마토그래피 기둥을 HPLC 시스템에 설치하고 액체가 새지 않도록 긴밀하게 연결해야 합니다.설치 전에 크로마토그래피 기둥의 외관이 손상되었는지 등을 확인할 수 있습니다.

3.시스템 균형: 크로마토그래피 기둥을 유동상으로 씻는다. 일반적으로 씻는 시간은 15-30분이다. 기선이 평온할 때까지 크로마토그래피 기둥 안에 유동상이 가득 차 있고 균형 상태에 도달할 수 있도록 한다.

4.샘플링 측정: 적절한 샘플링 방식과 샘플링 양을 선택하여 샘플을 HPLC 시스템에 주입합니다.데이터 수집을 시작하여 크로마토그래피 피크의 보존 시간, 피크 폭, 피크 등의 정보를 기록합니다.

5. 데이터 처리 및 분석: 기록된 데이터에 근거하여 이론 탑판 수, 비대칭 인자, 분리도 등 크로마토그래피 기둥의 관련 파라미터를 계산하여 크로마토그래피 기둥의 성능을 평가한다.흔히 볼 수 있는 데이터 처리 방법은 피크 면적의 측정, 피크 높이의 측정, 정량 분석과 정성 분석 등을 포함한다.

6. 크로마토그래피 기둥 세척 및 보존: 측정이 완료되면 적절한 용매로 크로마토그래피 기둥을 세척하여 남아 있는 시료와 유동상을 제거한다.반상 크로마토그래피 기둥의 경우, 일반적으로 먼저 메탄올 또는 아크릴로 씻은 다음 순수한 물로 씻는다;정상 크로마토그래피 기둥의 경우 메탄 등 유기용제로 씻을 수 있다.세척이 끝나면 크로마토그래피 기둥을 잘 보존하여 건조와 오염을 피한다.