액상크로마토그래피시스템의 용제관리시스템은 적합한 류동상을 제공하는데 류동상은 일반적으로 여러가지 용제가 혼합되여 형성되는데 례하면 메탄올, 아크릴, 물 등이다.서로 다른 샘플과 분리 수요는 서로 다른 구성과 유동상을 필요로 한다.예를 들어 반상액 크로마토그래프에서 유동상의 경우 그룹 세척 순서에 영향을 주고 그룹 세척 능력이 약하다.펌프는 용제관리시스템에서 관건적인 역할을 하는데 이는 류동상을 지속적으로 안정적으로 수송하여 크로마토그래피과정의 평온한 진행을 확보할수 있다.흔히 볼 수 있는 펌프는 이원펌프와 4원펌프가 있는데 4원펌프는 4가지 용제를 혼합하여 수송할 수 있어 유동상 구성을 더욱 유연하게 조정할 수 있다.
샘플링 시스템은 분석할 샘플을 크로마토그래피 기둥에 도입하는 것을 책임진다.분석 결과의 정확성과 반복성을 보장하기 위해 샘플링을 정확하게 제어해야 합니다.현대 액상 크로마토그래프 시스템은 일반적으로 자동 샘플링 머신을 사용하며, 사전 설정 절차에 따라 정확하게 샘플을 추출하고 주입하여 분석 효율을 높일 수 있다.
분리 시스템의 핵심은 크로마토그래피 기둥으로 기둥 안에 특정한 고정상이 채워져 있다.고정상의 종류는 다양하다. 예를 들어 실리콘, 결합상 등이다. 서로 다른 유형의 고정상은 서로 다른 성질의 샘플 분석에 적용된다.크로마토그래피 과정에서 샘플은 고정상과 유동상 사이에서 끊임없이 분배되고 각 조분은 두 상과의 작용력이 다르기 때문에 점차 분리된다.
검사 시스템은 분리된 그룹을 모니터링하고 측정하는 데 사용됩니다.흔히 볼 수 있는 검측기는 자외선 검측기, 형광 검측기 등이 있다.자외선 검출기는 특정 파장의 자외선에 대한 시료의 흡수를 측정하여 정량 분석 성분을 분석하여 광범위하게 응용한다;형광 검출기는 샘플의 형광 특성을 기반으로 측정되며 감도가 높습니다.
데이터 처리 시스템은 탐지기가 출력하는 신호를 수집, 처리 및 분석합니다.이는 크로마토그래피봉의 보존시간, 봉높이, 봉면적 등 정보를 기록하고 표준품과 대비하거나 관련 소프트웨어를 사용하여 계산하여 견본중의 각 조분의 함량과 순도 등을 확정할수 있다.
액상 크로마토그래피 시스템의 검정 방법:
1. 외관 및 무결성 검사:
- 수액펌프, 샘플링기, 크로마토그래피 기둥, 검출기 등 각 부품이 완비되어 있는지, 외관의 손상, 변형, 부식 등은 없는지 검사한다.
- 각 연결 배관이 잘 되어 있는지, 파손, 노후, 누출 등의 문제가 없는지 확인하여 배관이 긴밀하게 연결되어 있는지 확인한다.
2. 기능 검사:
- 수액펌프: 수액펌프를 열어 정상 작동 여부, 이상 소음 또는 진동 유무를 확인한다.펌프의 압력이 정상인지, 설정된 압력 범위 내에서 안정적으로 작동하는지 검사한다.이와 동시에 펌프의 류속조절기능을 검사하여 부동한 류속을 정확하게 설정하고 안정적으로 출력할수 있는가를 보아야 한다.
- 샘플링기: 수동 샘플링기의 경우 작업이 원활한지, 샘플링 핀이 막히거나 손상되었는지, 샘플링 정밀도가 요구 사항을 충족하는지 확인합니다.자동 샘플링기의 경우, 샘플링 바늘의 상태를 검사하는 것 외에 샘플링 순서, 샘플링 양의 정확성과 중복성 등 기능이 정상인지 검사해야 한다.
- 검출기: 검출기 검출 방법은 유형에 따라 다릅니다.례를 들면 자외선검측기는 그 광원이 정상적으로 발광되고 파장조절이 정확한가를 검사한다.형광 검출기는 자극 파장과 발사 파장의 설정이 정확한지, 감도가 정상인지 등을 점검해야 한다.이와 동시에 검측기의 기선이 안정되였는지, 이상소음이나 표류가 없는지를 검사한다.
- 크로마토그래피 기둥: 크로마토그래피 기둥의 모양이 손상되었는지, 기둥 이음매가 온전한지 확인합니다.스펙트럼 기둥의 표지가 명확한지 검사하는데 기둥의 길이, 내경, 충전재 유형 등 정보를 포함한다.
3. 시스템 적응성 시험:
- 이론탑판수 측정: 나프탈렌 등 적합한 표준물질을 선택하여 일정 농도의 용액으로 조제하여 규정된 크로마토그래피 조건에서 샘플을 넣어 분석한다.크로마토그래피 피크의 보존 시간과 반고폭에 따라 이론 탑판 수를 계산하여 크로마토그래피 기둥의 분리 효능을 평가한다.
- 분리도 측정: 다양한 성분을 포함하는 혼합 표준 용액을 사용하여 선택한 크로마토그래피 조건에서 분리 분석합니다.인접한 두 그룹의 보존 시간, 피크 폭 등의 매개변수를 측정하여 분리도를 계산하고 서로 다른 그룹의 분리 능력에 대한 시스템의 요구 사항을 충족하는지 확인합니다.
- 반복 시험: 동일한 농도의 표준 용액을 연속적으로 여러 번 샘플링하여 각 샘플링의 보존 시간, 피크 면적 또는 피크 고등 매개변수의 일관성을 관찰하여 시스템의 반복성을 평가합니다.