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고속 역류 크로마토그래프의 재현성
날짜:2017-06-20읽기 :1
고속 역류 크로마토그래프재현성
고속 역류 크로마토그래피 (High-speed Countercurrent Chromatography, 약칭 HSCCC) 는 1982년 미국 국립보건원 Ito 박사가 연구 개발한 신형, 연속적인 액액 분배 크로마토그래피 기술로 다른 크로마토그래피 기술과 달리 고체 캐리어가 필요 없기 때문에 고체 캐리어 표면과 샘플이 반응하여 샘플의 오염, 불활착, 역착, 변성 등의 영향을 피할 수 있다.동시에 적용 범위가 넓고 빠르며 샘플링량이 많고 비용이 낮으며 회수율이 높은 장점도 가지고 있다.그러므로 이미 생물, 의약, 식품, 재료, 화장품과 환경보호 등 분야에서 광범위한 응용을 얻었으며 특히 천연산물의 활성성분의 분리순화분야에서 더욱 중시를 받고있다.
고속 역류 크로마토그래피는 단방향성 유체 동력 균형 체계 위에 세워진 일종의 역류 크로마토그래피 분리 방법으로, 회전관의 유체 동력 균형을 연구할 때 우연히 발견되었다.나선관이 느린 속도로 회전할 때, 나선관의 양상은 모두 한쪽에서 다른 한쪽으로 분포된다.한 상을 다른 한 끝에서 다른 한 끝으로 이동할 때 다른 상이 나선관에 있는 보존치는 약 50% 이지만, 이 보존량은 이동상 유속이 증가함에 따라 줄어들어 분리 효율이 떨어진다.그러나 나선형 파이프의 회전 속도를 빠르게 하면 양상의 분포가 변경됩니다.회전 속도가 임계 범위에 도달하면 두 상은 나선관 길이 * 를 따라 분리되는데, 그 중 한 상은 모두 첫 끝의 한 단락을 차지하는데, 우리는 이 상을 첫 단상이라고 하고, 다른 한 단락은 모두 끝의 한 단락을 차지하는데, 이를 끝단상이라고 한다.고속 역류 크로마토그래프는 바로 양상의 이런 단방향성 분포 특징을 이용하여 높은 나선관 회전 속도에서 꼬리에서 첫 단상으로 보내면 꼬리 단상을 지나 첫 단으로 이동하며, 마찬가지로 첫 단상에서 두 단상으로 보내면 첫 단상을 지나 나선관의 꼬리로 이동한다.분리할 때 나선관에 먼저 그중의 1상 (고정상) 을 주입한후 적합한 한쪽끝에서 이동상으로 펌프하여 견본을 싣고 나선관에서 무한히 분배하게 한다.계기의 회전 속도가 빠를수록 고정상이 많이 보존되고 분리 효과가 좋으며 분리 속도를 크게 높였기 때문에 고속 역류 크로마토그래프라고 부른다.
고속 역류 크로마토그래프의 제품 이점을 간단히 설명합니다.
1. 용제시스템의 구성 및 배합비례는 무한히 많을수 있기에 리론적으로 말하면 그 어떤 극성범위내의 견본의 분리에도 적용될수 있으며 천연화합물을 분리하는 면에서 독특한 점을 갖고있다.폴리테트라 플루오로에틸렌 튜브의 고정상은 액체이기 때문에 고상 캐리어가 필요하지 않기 때문에 고-액 크로마토그래프에서 고상 캐리어 사용으로 인한 흡착 손실을 제거할 수 있으며, 특히 극성 물질을 분리하는 데 적합하다.
2. 조작이 간편하고 쉽게 파악할 수 있다: 고속 역류 크로마토그래프의 조작이 간단하고 샘플에 대한 예처리 요구가 낮으며 일반적인 조제물로 할 수 있는 제조 분리 또는 분석.
3. 회수율이 높다: 고상 캐리어가 필요 없고, 고상 캐리어에서의 샘플의 불가역적 흡착과 분해로 인한 손실을 제거하며, 이론적으로 샘플의 회수율은 도달할 수 있다.실험에서 분리 조건만 잘 조정하면 일반적으로 높은 회수율을 가지고 있다.
4. 재현성이 좋다: 만약 샘플이 비교적 강한 표면활성작용을 하지 않는다면 산염기성도 강하지 않다. 설사 여러번 샘플을 넣더라도 그 분리과정은 모두 아주 안정적이고 재현성도 상당히 좋다.