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[응용 기사] NanoCoulter 평가 5 가지 세포 외낭포 분리 방법: 효율과 순도 비교
날짜:2024-10-21읽기 :0
세포 외낭포란?
EVs는 세포에서 방출되는 나노급 낭포를 말하며, 혈액, 소변, 타액 등 체액에 광범위하게 존재한다.이 낭포에는 기능 단백질, 소분자, 핵산 및 기타 대사물이 풍부하다.EVs는 혈장, 소변, 타액, 모유를 포함한 거의 모든 종류의 세포와 체액에 존재한다.EVs가 가지고 있는 단백질, 지질, miRNA의 종류와 함량은 그 출처의 유형을 직접 반영할 수 있다.EVs의 연구는 세포 생리학과 병리학을 더 잘 이해하는 데 도움이 되며, 임상에서 EV는 질병 진단에 큰 잠재력을 보여줄 뿐만 아니라 약물 배달의 새로운 도구가 될 수도 있다.따라서 특정 실험 요구를 충족시키는 순도 높은 EV의 분리 및 표징 방법이 특히 중요해졌다.
다섯 가지 분리 방법을 전면적으로 비교하다.
이 연구에서 연구자들은 다음과 같은 다섯 가지 일반적인 EV 분리 기술에 대해 상세하게 평가했습니다.
1.기존 차속 과속 원심분리법(UC): 회전 속도가 30000r/min 이상인 것을 과속 원심이라고 한다.과속 원심분리에 더해 원심속도를 점차 높이는 방법으로 다양한 크기의 샘플을 분리하면 고순도의 EV를 효과적으로 분리할 수 있어 흔히 나노입자 추출'골드 스탠더드'로 여겨진다.
5가지 분리 방법에 대한 TEM 결과
RPS 기술
저항 펄스 감지 (RPS) 기술은 새로운 나노 단일 입자 표징 기술이며 현재 전기학에 기반한 것입니다.과립 표징방법.미세한 나노구멍을 통한 전류 변화를 측정하여 세포 외낭포의 크기와 농도 및 제타 전위를 평가한다.이 방법은 정확하고 빠르며 간편하고 민감도가 높으며 낭포 분리 방법의 품질을 평가하는 데 이상적인 도구가 될 수 있습니다.
다섯 가지 분리 방법의 입경 데이터 비교
다섯 가지 분리 방법의 농도 데이터 비교
다섯 가지 분리 방법의 제타 전위 데이터 비교
분리배후의 비밀: 효율과 순도 싸움
RPS 기술을 통해 연구원들은 각 분리 방법의 입경 분포, 입자 농도 및 순도를 상세하게 분석했다.그 결과 초여과법, qEV 기둥 계층 분석법, ExoQuick 방법을 사용하면 높은 입자 농도를 얻을 수 있지만, 전통적인 차속 과속 원심법은 순도에서 가장 잘 나타났다.
입경 분포: UC, UF, exoEasy, qEV에서 분리된 EV의 입경은 약 71nm 정도로 비교적 일치하지만, ExoQuick에서 분리된 EV의 입경은 평균 77nm로 약간 크다.
과립 농도: 초여과법(UC)은 2.10 × 10의 가장 높은 입자 농도를 보여줍니다.12/mL，반면 UC법의 입자 농도는 7.33 × 10으로 상대적으로 낮다10/ ml 입니다.
순도: UC 법의 EV 순도가 가장 높으며 mg 당 단백질에 포함 된 입자 수가 7.88 × 10에 달했습니다.11。
5가지 분리 방법의 EV 순도 데이터 비교
어떻게 적당한 분리 방법을 선택합니까?
각각의 분리 방법은우세.연구 결과에 따르면 과속 원심법은 조작이 복잡하고 시간이 길지만 순도가 높은 EVs를 실험할 때 초이법은 여전히 첫 번째 선택이다.그러나 고효율과 대규모 생산을 추구하는 응용 시나리오에 대해 초여과법과 qEV 기둥 계층 분석 법칙은 더 빠른 분리 속도와 더 높은 입자 농도를 제공합니다.
NanoCoulter 입자 분석 플랫폼 작동 원리 설명도
서로 다른 분리 방법의 장단점을 이해하면 연구원들이 세포 외낭포 관련 실험 연구와 응용 개발을 더 잘 할 수 있도록 도울 것이다.이 기사는 RPS 기술을 통해 NanoCoulter의 정확한 성능으로 다섯 가지 세포 외낭포 분리 방법을 포괄적으로 평가하여 연구원들이 적합한 분리 기술을 선택할 수있는 과학적 근거를 제공합니다.
적합한 분리 방법을 선택하려면 분리의 효율, 순도 및 조작의 편리성을 포함한 실험 수요의 구체적인 요구를 고려해야 한다.적합한 입자 표징 방법을 선택하는 것도 마찬가지입니다.상술한 연구에서 NanoCoulter가 EV에 대한 표징은 다음과 같은 몇가지 우세를 구현하였다.
장점 1: 단일 입자 검사, 정확하고 간섭 없음
NanoCoulter는 첨단 나노 레벨 RPS 기술로 각 나노 입자를 정확하게 포착하고 분석합니다.복잡한 생물류체에서 나노구멍을 통과하는 모든 미소한 EVs는 그의"전면적인 신체검사"를 피할수 없다고 상상해보자.전통적인 광학 방법에서 큰 입자 신호가 작은 입자를 차단하여 결과가 왜곡되는 현상을 깨뜨렸다.특히 EVs와 같은 다분산크기, 농도 또는 zeta 전위를 막론하고 모든 데이터는 단일 입자에 대한 직접적인 측정에서 비롯되며 결과의 신뢰성을 보장합니다.이런 정확도는 세포 낭포 연구를 새로운 단계로 끌어올릴 수 있다!
이점 2: 고정밀도, 다중 매개변수 분석
NanoCoulter는 EVs에 대해 입경, 입경 분포, 입자 농도 및 zeta 전위를 포괄적으로 분석 할 수 있습니다.정확한 입경 분포 분석은 EVs 샘플의 실제 크기 분포 상황을 이해하는 데 도움이 되며, 입자 농도는 EVs의 풍도와 분리 품질을 반영하고, zeta 전위는 EVs의 안정성 및 공정화 EV의 약물 전달 표적성과 밀접한 관련이 있다.이러한 데이터는 EVs의 포괄적인 정보를 제공하며 나노 약물 과학 연구 및 임상 응용에 대한 견고한 데이터 지원을 제공합니다.
이점 3: 복잡한 샘플에 적합
기존의 광학 방법이 샘플의 입자를 전체적으로 분석하는 것과 달리 NanoCoulter는 복잡한 다분산 샘플에서 뛰어납니다.그것은 낮은 굴절률, 높은 이온 농도 또는 낮은 유동성 액체 중의 나노 입자를 정확하게 표징할 수 있으며, 복잡한 생물체액에서도 신뢰할 수 있는 결과를 얻을 수 있도록 보장하여 생물의약 분야의 연구에 전문적으로 적합하다.
이점 4: 빠르고 편리한 운영 프로세스
NanoCoulter는 복잡한 샘플 전처리와 장비의 히트머신 및 교정 단계가 필요 없이 쉽고 빠르게 작동합니다.모든 나노 구멍 칩은 생산 시 엄격한 기준과 검증을 거쳤으며, 사용자 측에서 표준품을 소모할 필요가 없다.이를 통해 연구자들은 더 빨리 결과를 얻고 과학적 발견을 가속화 할 수 있습니다.
이점 5: 광범위한 적용
NanoCoulter의 응용 분야는 EVs 연구에 그치지 않습니다.생물의약, 재료과학, 환경감시 등 여러 분야에서 거대한 잠재력과 가치를 보여주었다.높은 정밀도, 높은 안정성 및 광범위한 응용성으로 NanoCoulter는 과학 연구자들에게 필요한 유능한 조수가 되고 있습니다.