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Gyrolab을 사용하여 100% 혈청 중유리 항원의 정확한 측정
날짜:2025-11-05읽기 :0


약물 개발 과정, 특히 단일 클론 항체/다중 특이성 항체 치료제의 약대동력학/약효동력학(PK/PD) 연구에서는 혈청 중유리 항체/항원의 농도를 정확하게 측정하는 것이 중요하다.전통적인 방법은 샘플이 희석되거나 부화 시간이 너무 길거나 항체-항원 복합체가 불안정하여 결과의 편차를 초래하는 경우가 많다.


로씨의 Gregor Jordan 등은 Gyrolab 플랫폼을 기반으로 다음과 같은 유리 물질 분석에서 도전을 해결하기 위해 전 혈청에서 유리 항원을 검출하는 면역 분석 방법을 개발했습니다.



샘플의 희석으로 항원-항체 복합체 해리,유리 항원 농도를 과대평가하다.


항체-항원 복합체 반감기 짧음(<100초), 기존 LBA 방법으로는 정확하게 포착 불가능


치료성 항체가 존재할 때, 유리와 결합 상태의 항원을 구분하기 어렵다

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

이 방법은 브리지 면역 분석 원리를 채택하며 구체적인 단계는 다음과 같습니다.

1

표시된 포획 항체 패키지를 스트렙토마이신 친화 기둥에

2

가입미희석 혈청 샘플, 유리 항원과 포획 항체를 결합

3

가입표시된 검사 항체항원의 또 다른 표위와 결합

4

검측 신호, 정량 유리 항원

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

주요 접근 방식 요구 사항






포획 항체 및 검측 항체 식별의 항원 표위겹치지 않음


포획 항체와 치료성 항체경쟁 결합 항원의 동일 표위


매우 짧은 부화 시간 (우선 <2초)


샘플 희석 없이 복합체 해리 방지

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
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연구 목적

CCL2에 대한 항체 약물의"제거 효율"을 평가한다. 즉 항체가 유효하게 결합되어 유리 CCL2를 제거하는지 여부이다.

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

研究방법

플랫폼 및 방법

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
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실험 설계

01

커브 및 품질 조정

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

교정 범위: 2430pg/mL → 10pg/mL

QC 샘플:

높은 QC: 1820 pg/mL

중간 QC: 230 pg/mL

낮은 QC: 30 pg/mL

허용 기준:

±20% 편차,CV < 15%

02

약물 간섭조

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

CNTO0888: 단일 특이성 항CCL2 항체(대조)

CKLO2-SG1095: 이중 특이성 항 CCL2 항체(실험군)

농도 설정:

저용량: 7.5 ng/mL 또는 15 ng/mL

고용량: 10μg/mL

결과 및 토론

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定


CNTO0888 고농도에서 유리 CCL2를 거의 모두 제거


CKLO2-SG1095는 비효율적이지만 훨씬 우수함빈 그룹


낮은 용량의 이중 저항은 여전히 중간 정도의 제거 능력을 가지고 있으며, 그 용량 의존성을 제시한다




使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
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연구 목적

희석되지 않은 혈청 샘플에서 유리 보체 C5의 농도를 빠르고 정확하게 측정하여 항 C5 항체 약물 (예: eculizumab, crovalimab) 의 체내 약효를 평가하는 데 사용됩니다.

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

研究방법

플랫폼 및 방법

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

실험결과


표준 커브 선형 범위: 0.55-3000ng/ml


LOQ:0.5 ng/mL,<0.1%의 유리 C5를 감지하기에 충분(인간 총 C5 400 nM)

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定
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요약

방법 기술적 이점

使用Gyrolab实现100%血清中游离抗原的准确测定

Gyrolab 플랫폼에는 부화 면제 스트리밍 모드가 있습니다.기질 중의 비특이성 결합을 크게 낮추어 기질의 간섭을 효과적으로 낮추다, 유리물 분석에서 지원 가능전혈청 검사, 그리고부화로 인한 항체-항원 복합체의 해리 감소유리물의 분석을 더욱 정확하고 효율적으로 한다.






참조 문서:

[1] 샘플에서 항체의 자유 항원을 결정하는 방법, Gregor Jordan, Martin Schaefer, Maria Viert;술집 번호 US2023/0393125 A1.