하나,고통량 동적 광 산란기작업 전 준비
환경 요구 사항
평온하고 건조하며 온도가 적당한 장소를 선택하여 계기를 설치하여 계기의 밑부분이 지면과 평온하게 접촉하고 광로가 지면에 수직하며 계기의 밑부분이 지면에서 적어도 50센치메터 떨어져있도록 확보해야 한다.
공기 흐름, 진동 및 강력한 전자기 간섭원 (예: 대형 모터, 고주파 장치) 을 피하고 측정 환경의 안정을 보장합니다.
샘플 제조
분산성: 견본은 액체매체에 균일하게 분산되여 뭉치거나 침전되지 않도록 해야 한다.분산제는 투명해야 하며 용질립자의 굴절지수와 달리 깨끗하고 려과할수 있다.
농도 조절:
단백질 샘플: 14kDa 단백질 농도는 1mg/ml, 28kDa 단백질 농도는 0.5mg/ml를 권장합니다.
기타 시료: 입경 크기에 따라 농도를 조정하여 다중광 산란 (농도가 너무 높음) 이나 신호가 너무 약하다 (농도가 너무 낮다).
기포 제거: 샘플은 12000rpm 원심 분리 10 분, 맑은 액체를 취하여 기포가 측정에 영향을 미치지 않도록합니다.
샘플 양: 샘플 풀 용량은 약 14 μl이며 채워지지 않도록 20 μl 샘플을 준비하는 것이 좋습니다.
계기 검사
전원, 연결선, 광로 시스템이 정상인지 확인하고 레이저, 탐지기, 온도 제어 모듈 등 부품이 튼튼하게 연결되어 있는지 확인한다.
예열 기구는 10-15분 후에 시스템이 안정된 후에 측정한다.
2. 전원과 소프트웨어 연결
전원 켜기 단계
전원을 켜고 호스트, 온도 제어 모듈 및 컴퓨터 전원을 차례로 켭니다.
측정 소프트웨어(예: Zetasizer, IRSoft 등)를 실행하고'Connect'또는'Hardware'를 클릭하여 소프트웨어와 기기의 연결을 설정하고 연결 성공 후 아이콘이 녹색으로 변하는지 확인합니다.
매개변수 설정
레이저 강도: 시료 농도에 따라 조정 (고농도 시료는 신호 과부하를 피하기 위해 출력을 낮춰야 함).
온도: 측정 온도 (예: 25 ℃) 를 설정하고 시료 온도를 안정시키기 위해 120 초 동안 항온을 설정합니다.
용매 매개변수: 온도 변화에 따라 실시간으로 업데이트해야 하는 용매의 굴절률(RI)과 점도(Viscosity)를 입력합니다.
샘플 매개 변수: 단백질 샘플과 같은 샘플의 굴절률(RI)과 흡수율(Absorption)을 입력하려면 "Material" 유형을 선택하고 해당 매개 변수를 입력합니다.
측정 시간: 샘플 안정성 설정에 따라 (예: 120초당 3회 연속 측정)
산란 각도: 일반적으로 90 ° (작은 입자) 또는 173 ° (큰 입자) 를 선택합니다.
데이터 필터링: 편차 범위(예: Baseline=1±0.003)를 설정하여 예외 데이터를 필터링합니다.
3. 샘플 배치 및 측정
샘플 풀 세척
미량 취액기와 시료 풀을 물로 씻어 오염을 피하다.
미량 취액기를 사용하여 샘플을 천천히 샘플 풀에 주입하여 바늘이 풀 밑이나 옆벽에 부딪히지 않도록 한다.
샘플 풀을 샘플실에 넣고 화살표가 자신을 향하는지 확인하고 샘플실 뚜껑을 덮는다.
데이터 수집
측정을 시작하려면'Start'또는'Measure'를 클릭하면 산란광의 강도가 시간에 따라 자동으로 기록됩니다.
측정 과정에서 기기나 샘플 풀에 손을 대지 않도록 하여 광로의 오프셋을 방지한다.
빨간색 데이터는 설정된 범위를 벗어난 값이며 분석할 때 사용되지 않습니다.
4. 데이터 분석 및 저장
입경 분포
소프트웨어는 흐름 역학 반지름 (Rh) 및 다중 분산 지수 (PDI) 를 자동으로 계산하여 입경 분포도 (예: 대수 양의 분포, MSD 다중 크기 분포) 를 생성합니다.
상관 관계 함수
빛의 강한 파동과 시간의 관계를 분석하고 샘플의 균일성을 평가한다.
데이터 내보내기
CSV, Excel 또는 PDF 형식으로 저장하여 추가 작업 또는 보고서 생성을 용이하게 합니다.
5. 운영 후 유지 보수
샘플 풀 세척
측정이 완료되면 즉시 물로 시료못을 씻고 말린후 보관하여 잔류시료오염을 피면한다.
광학 소자 청결
레이저 창, 탐지기와 같은 광학 부품을 정기적으로 청소하고 먼지 없는 천이나 전용 세척제를 사용합니다.
계기 검사
기기 내부에 잡동사니나 먼지가 있는지 검사하고, 광로 시스템 건조관의 흡습 상태를 유지한다 (예를 들어 흡습은 건조하여 재생해야 한다).
정기적으로 표준 입자 (예: 폴리스티렌 라텍스) 를 사용하여 교정하여 측정의 정확성을 확보합니다.
스토리지 환경
기기를 사용하지 않을 때는 건조, 통풍, 부식성 가스가 없는 환경에 보관하고 전원을 끊고 방진 덮개를 덮는다.
위험한 화학품과의 접촉을 피하여 안전사고를 방지하다.
여섯,고통량 동적 광 산란기FAQ 처리
광 산란 강도가 너무 높다.
현상: 기기에 자체 보호 프롬프트가 나타납니다.
원인: 샘플의 농도가 너무 높거나 입경이 비교적 크다.
해결: 샘플 농도를 낮추거나 레이저 강도를 조정합니다.
데이터 균일성 저하
현상: 관련성 함수의 파동이 크다.
원인: 샘플이 고르지 않거나 큰 알갱이가 존재한다.
해결: 원심 샘플을 다시 분리하여 균일한 분산을 확보합니다.
광선 오프셋
현상: 측정 데이터 예외.
원인: 조작 과정에서 기기나 샘플 풀을 건드린다.
해결: 광선을 재조정하여 광선, 물체 및 탐지기 간의 수직 및 평행 관계를 보장합니다.