사용 대상

비스페놀A 친화 기둥은 특이성의 순화 샘플 중의 비스페놀 A와 비스페놀 S를 할 수 있는데, 그것은 기둥 모양의 글리세린 겔을 고상 담체로 사용하고, 글리세린 겔과 비스페놀 A 항체가 우연히 연결되어 면역 흡착제를 형성하며, 기둥을 담아 면역 친화 기둥을 만든다.샘플에서 비스페놀A를 특이적으로 순화시킬 수 있다. 비스페놀A 친화주는 식품과 음료 등 샘플 추출에 널리 활용되는데, 이 방법은 속도가 빠르고 조작이 간단하며 정확성이 높아 식품의 품질과 안전성을 높이는 데 매우 중요한 역할을 한다.

이 설명서 방법은 친화주 방법을 응용하여 식품 중의 비스페놀을 검측한다A의 검사 방법.

GB 5009.305-2025 식품안전 국가표준식품에서 비스페놀A, 비스페놀F 및 비스페놀S의 측정

저장 조건

이 친화기둥은2-8 °C 조건에서는 절대 냉동할 수 없으며 유통기한은 18개월이다.실온(18~30°C)에서 사용하는 것이 좋습니다.

실험 용액 제조

l메탄올- 수용액(80+20):메탄올 을 양취 하다80mL,물 20mL를 넣고 고루 섞는다.

l메탄올- 수용액(40+60):메탄올 을 양취 하다40mL,물 60mL를 넣고 고루 섞는다.

l盐酸溶液(10+90):측정10mL의 진한 염산을 물에 90mL를 넣고 고루 섞는다.

lPBS 용액:~을PBS 완충액 시약 키트(화물번호: G3001)는 순수한 물 1000mL로 용해되어 골고루 섞인다.

분석 단계

GB 5009.305-2025 방법

1.0 샘플 추출

1.1 고기 및 육류, 수산물, 고체 및 반고체 유제품(유분, 발효유 등), 영유아 조제식품

칭취시료 1g(정확히 0.01g까지), 폴리프로필렌 원심관 50mL에 50μL 동위원소 내표 혼합 사용액을 넣고 진동 혼합 후 30min 정지한다.물 2mL, 와선 진동 30s를 넣고 아크릴 와선 5mL를 넣어 섞는다.혼합액 초음파 추출 15min, 4℃에서 10000r/min 원심분리 10min.맑은 액체를 취하여 유리질소취관에 넣고 40 ℃ 에서 질소가스로 약 2mL로 천천히 불고 8mLPBS를 첨가하여 혼합하여 정화를 기다리다.

1.2 달걀, 유제품 및 액상 유제품

칭취시료 1g(정확히 0.01g까지), 폴리프로필렌 원심관 50mL에 50μL 동위원소 내표 혼합 사용액을 넣고 진동 혼합 후 30min 정지한다.아크릴 5mL를 넣고 소용돌이를 섞은 후 초음파 추출 15min, 4 ℃ 에서 10000r/min 원심분리 10min.맑은 액체를 취하여 유리질소취관에 넣고 40 ℃ 에서 질소가스로 약 2mL로 천천히 불고 8mLPBS를 첨가하여 혼합하여 정화를 기다리다.

1.3 곡물 및 영유아 곡류 보조식품

칭취시료 1g(정확히 0.01g까지), 폴리프로필렌 원심관 50mL에 50μL 동위원소 내표 혼합 사용액을 넣고 진동 혼합 후 30min 정지한다.메탄올-수용액 10mL(80+20), 와선 진동 30s, 초음파 추출 15min, 4℃에서 10000r/min 원심분리 10min를 첨가한다.맑은 액체를 취하여 유리질소취관에 넣고 40 ℃ 에서 질소가스로 약 2mL로 천천히 불고 8mLPBS를 첨가하여 혼합하여 정화를 기다리다.

1.4 채소, 과일

칭취시료 1g(0.01g까지 정확), 폴리프로필렌 원심관 50mL에 100μL 염산 용액(10+90)을 섞어 50μL 동위를 더한다소내표 혼합 사용액, 진동 혼합 후 30min 정적.아크릴 5mL, 와선 진동 30s, 초음파 추출 15min, 4 ℃ 10000r/min 원심분리 10min을 첨가한다.맑은 액체를 취하여 유리질소취관에 넣고 40 ℃ 에서 질소가스로 약 2mL로 천천히 불고 8mLPBS를 첨가하여 혼합하여 정화를 기다리다.

1.5 음료

칭취시료 1g(정확히 0.01g까지), 폴리프로필렌 원심관 2mL에 50μL 동위원소 내표 혼합 사용액을 넣고 진동 혼합 후 30min 정지한다.10000r/min 원심분리 10min.청액을 50mL의 폴리프로필렌 원심관에 취하여 10mLPBS 용액을 넣고 골고루 섞어 정화를 기다린다.

주: 맑은 시료 (예: 정제수, 생수 등) 는 원심을 떠나지 않고 PBS를 직접 넣어 혼합할 수 있다.

2.0 시료 정화

2.1 친화주 활성화

면역 친화주를10.0mL 주사기 아래.압력을 조절하여 기둥보호용액이 약 2mL/min (1방울/초) 류속으로 면역친화주를 천천히 통과하여 소량의 공기가 기둥을 통과할 때까지 한다.정확량은 5mL 친화주 활화액(친화주 제품 표준)을 취하여 친화주를 림세하고, 유속은 1방울/초이며, 소량의 공기가 기둥을 통과할 때까지 한다.5.0mL 순수한 물로 기둥을 1회 림프하여 유출액을 전부 버리고 다시 10.0mLpH7.4 PBS 용액으로 기둥을 림프하여 유속이 1방울/초이고 마지막 2~3mL 용액이 기둥에 가득 차면 가압을 중지하고 마개로 밑부분의 출액구를 막아 사용대기한다.

참고: 비스페놀을 더 높이기 위해A 면역 친화주의 정화와 흡착 효과, 이 친화주는 사용 전 활성화 처리가 필요하다.활성화된 친화주는 1시간 동안 사용하세요.

2.2 친화주 정화

取1.0단계의 정화대기액은 전부 기둥을 통과하고 류속은 1방울/초이며 전부 류출액을 버리고 다시 10mL의 물로 면역친화주를 림세한다. 류속은 1~2방울/초이다. 물방울이 다 떨어지면 진공펌프로 면역친화주를 말린다.메탄올 1mL를 넣어 씻고, 유속은 1~2방울/초이며, 씻은 액을 모아 유리 질소 드라이어에 넣고 40 ℃ 에서 질소 가스로 천천히 말린다.메탄올 0.40mL, 와선 혼합 10s, 물 0.60mL를 정확하게 넣고 와선 혼합 후 폴리프로필렌 원심관 2mL로 전이, 10000r/min 아래 원심 5min, 맑은 액체 공급 크로마토그래프-직렬 질량 분광기 측정.

주의사항

1)조작설명서의 조작절차를 함부로 변경하지 말고 변경이 필요하면 당사 기술부에 연락하여 변경이 합리적인지 확인하십시오.

2)조작 단계에서, 샘플이 기둥을 통과하고, 림프, 세척 시 반드시 유속을 잘 조절해야 하며, 너무 빨라서는 안 된다. 그렇지 않으면 검사 결과를 낮게 할 수 있다.

3） 이 실험은 플라스틱 제품 용기, 특히 사용을 최소화합니다.PC 재질의 플라스틱 용품, 실험용수는 가능한 한 배치 유리 그릇에서 증류한다.

친화 기둥 구성 목록

필요한 장비 및 시약