미생물 샘플링 과정에서 교차 오염은 설비 잔류, 인원 조작, 환경 미생물 또는 샘플 간의 상호 오염에서 비롯될 수 있으므로 전 과정에서 엄격한 오염 방지 조치를 실시해야 한다.다음은 장면별 표준화된 운영 지침 및 기술 요점입니다.
1. 샘플링 전의 설비와 소모품 멸균
1. 하드웨어 멸균 규범
재사용 가능 장치:
금속 샘플링 헤드 (예: 충돌식 샘플링): 121 ℃ 고압 증기 멸균 20 분 (GB/T38512-2020) 또는 70% 에탄올 + 화염 화상 (현장 응급 처치에 적용).
플라스틱 부품 (예: 샘플링 펌프 파이프): 0.1% 과산화 아세트산을 30 분 동안 담그고 다시 무균수로 3 번 헹구고 말린 후 자외선 조사 (254nm, ≥ 30 분).
일회용 소모품:
배양접시, 샘플링 봉투 등은 투사멸균제품(코발트-60조사, 용량≥25kgy)을 선택하고 개봉 전 포장 완전성(ISO11607-1 기준)을 검사해야 한다.
2. 멸균 효과 검증
매번 멸균 후 생물 모니터링: 기열지방 아포주균 ATCC7953 포자조를 넣고 멸균 후 배양(56 ℃, 48시간), 균락수는 0(GB8599-2021)이어야 한다.
2. 샘플링 현장의 조작 오염 방지 체계
1.인원 무균 조작 준칙
3단계 보호 요구 사항:
일반 환경: 일회용 실험복 + 의료용 장갑(예를 들어 아크릴 장갑)을 착용하고 샘플을 채취하기 전에 75% 에탄올로 장갑 표면을 닦는다.
고위험 환경 (예: 임상 샘플): 무균 격리복 + 고글 + 이중 장갑을 착용하고 샘플링 당 1 회 외부 장갑을 교체해야합니다.
동작 사양:
샘플을 채취할 때 팔은 샘플링 입구 위를 넘지 않도록 하고, 샘플링 헤드 거리를 몸 ≥ 30cm로 유지하며, 호흡 방향과 샘플링 입구는 90 ° 협각을 나타낸다.
샘플링 영역 내에서 머리카락을 정리하고 얼굴을 만지는 것을 금지하며, 장비를 조정하려면 장갑을 교체하거나 손을 소독해야 한다.
2. 공간 분할 및 공기 흐름 제어
샘플링 구별:
50cm × 50cm의 무균조작구역을 설치하고 75% 에탄올을 책상에 뿌려 소독대를 형성하며 샘플링기는 구역 중앙에 배치한다.
ISO5급 클린룸과 같은 고결도 장면은 층류 작업대(풍속 0.36-0.54m/s) 또는 생물 안전 캐비닛(BSC-II급) 내에서 조작해야 한다.
공기 흐름 간섭 제어:
샘플을 채취하기 전에 문과 창문을 닫고 에어컨 시스템의 운행을 10분 동안 중지 (기류가 외원 미생물을 휴대하지 않도록 한다), 인원의 이동은 1미터 밖으로 통제한다.
3. 샘플 채집 과정의 격리 조치
1.차수로 나누어 샘플링 교차 방지 방안
배치 간격 소독:
각 1개의 샘플링을 완료한 후, 75% 에탄올로 샘플링 케이스, 샘플링 입구 및 조작 테이블을 닦고, 5분 동안 작용한 후 다음 샘플링 채취를 진행한다.
만약 부동한 류형의 견본 (예를 들면 환경견본과 림상견본) 을 채집할 경우 전반 표본추출머리와 관로를 교체하여 잔류미생물이 혼동되지 않도록 해야 한다.
2. 특수 샘플의 격리 기술
고농도 샘플 처리:
오수, 분뇨 등 고부하 샘플을 처리할 때는 음압 여과가 있는 샘플링 머신(예: MilliporeEZ-Pak)을 사용해 샘플링 후 즉시 필터를 밀봉해 에어로졸이 확산하지 않도록 한다.
원인균 샘플링:
생물안전형 샘플링 헤드(예를 들어 HEPA 여과가 있는 폐합식 샘플링기)를 사용하고 샘플링 후 누출 방지 금속 탱크(내부 포장 흡수지 + 0.5% 차염소산나트륨 용액)를 넣는다.