신경과학 연구에서 안정적이고 신뢰할 수 있는 동물 모델은 생명 메커니즘을 탐색하고 치료 전략을 검증하는 초석이다.생쥐 개두술은 다양한 뇌과학 연구 모델을 구축하는 핵심 기술로서 그 조작의 규범성과 정확성이 매우 중요하다.성공적인 수술은 동물의 손상을 최대한 줄일 수 있을 뿐만 아니라 후속 실험 데이터의 정확성과 중복성을 보장하는 관건이다.

개두술을 숙련함에 있어서 뇌해부구조에 대한 깊이있는 리해와 세밀한 조작기술의 반복적인 단련을 떠날수 없다.실제 작업에서 많은 연구자들은 다음과 같은 일반적인 문제에 직면합니다.

✅ 어떻게 두개골을 안전하게 갈아서 뇌조직이 완전무결하도록 확보합니까?

✅ 두개골 유리 조각을 고정 할 때 고정 강도와 이미징 시야의 무결성을 어떻게 균형 잡습니까?

✅ 수술 중 무균 조작과 수술 후 동물 관리, 반드시 중시해야 할 세부 사항은 무엇입니까?

이 글은 고전적인 쥐개두수술과정을 둘러싸고 전개되며 명확한 절차시연과 관건요점해석을 통해 이 기술의 핵심방법을 체계적으로 정리하게 된다."쌍광자형광영상쥐제조수술" 의 첫 편으로서 이 글은 독자들이 수술기초를 튼튼히 다지도록 도와주기 위해서이다.앞으로 우리는 GRIN Lens 이식, 척수 창문 열기, 쌍광자와 EEG 전극 매식 결합 등 더 많은 정밀 수술 조작을 계속해서 상세히 이해하여 당신과 함께 과학 연구 길에서 끊임없이 기술을 정진할 것입니다.

　　친절한 안내：시청 소감을 고려하여 일부 수술 화면을 부드럽게 처리했으니 안심하고 시청해 주십시오.

　　

　　부분 01수술 전 준비

1.수술 기구: 두 개의 정교한 핀셋, 한 개의 두 개의 마이크로 스크래치, 한 개의 스프링 커트.

2. 실험 소모품: 실험에 필요한 소모품과 생리식염수(1%두포곡송나트륨)를 준비한다.

3.기계 소독: 수술 중 사용하는 모든 기계 또는 이식물은 사용 전에 소독 처리해야 하며, 75% 에탄올로 소독할 수 있으며, 조건이 있으면 정기적으로 고압으로 멸균할 수 있다.

4.수술대 소독: 수술대는 사용하기 전에 75% 에탄올을 사용하여 닦고 소독해야 한다.수술대는 무균포, 깨끗한 흡수매트 또는 수건을 깔아야 한다.매번 수술이 끝난후 반드시 이런 재료를 교체해야 한다.

　　부분 02마취, 고정

1. 마취제 창고 안에 쥐를 넣어 마취를 유도한다. 기체 유량과 마취 눈금은 실험실의 가스 마취기에 따라 설치한다.쥐가 뚜렷한 호흡이 느려지고 사지가 느슨해지면 쥐가 이미 마취상태에 들어섰음을 나타낸다.

2. 마취된 생쥐를 뇌 입체 위치추적기에 고정시키고 마취를 유지하며 수술 과정에서 생쥐의 호흡을 항상 주의 깊게 관찰한다.

　　부분 03제모

1. 페니실린 아이크림을 생쥐의 눈 부위에 골고루 바르고, 생쥐의 눈을 완전히 덮어 눈에 노출되지 않도록 해야 한다.

2. 의료용 면봉에 제모제를 묻혀 모발이 자라는 방향을 거슬러 모발 뿌리에 골고루 바르고 약 2min 후 면봉으로 닦아 머리털을 벗긴다.

3.의료용 면봉에 생리식염수를 묻혀 쥐의 머리에 남아 있는 제모고를 깨끗이 씻는다.

4. 털이 빠진 피부를 요오드볼트로 닦아낸다.

부분 04두개골 노출 및 제거

1. 스프링으로 두피를 잘라낸다.

2. 노출된 두개골의 점막과 두 곳의 근육 연결 부위의 여분의 지방을 모두 벗긴다.

3.마이크로 더블 스크래치를 사용하여 두개골 표면의 잔여 점막, 결단 조직 등을 스크래치합니다.

4. 세안구를 들고 두개골 표면을 완전히 건조할 때까지 불어준다.

　　부분 05개두

1.바이러스 주사 구멍 또는 위치 점을 원심으로 하고, 정교한 핀셋을 가지고 적합한 규격의 원형 볼륨을 두개골 표면에 배치한다.

2.두개골 드릴의 속도를 낮은 단계로 조절하고, 유리 조각의 크기를 따라 한 바퀴 다듬은 후, 귀 세척구를 사용하여 부스러기를 가볍게 불고, 이 조작을 반복하여 다듬는 범위가 유리 조각의 크기에 완전히 부합할 때까지, 다시 회전 속도를 중고급으로 조정하고, 계속 다듬는다.

3.연마 두개골에 균열이 생겼을 때, 두개골 드릴의 회전 속도를 낮은 단계로 조정하고, 계속 연마하고, 전체 두개골이 완전히 부러질 때까지 반복적으로 조작한다.

4. 세밀한 핀셋을 들고 두개골 조각을 천천히 벗긴다.

　　부분 06뼈 부스러기를 고르다

세밀한 핀셋을 사용하여 두개골 창 측면에서 바늘을 내려 주위의 깨진 뼛조각을 가볍게 골라내고 두개골 창 주위에 파편이 전혀 없을 때까지 이 조작을 반복한다.

부분 07유리 조각을 설치하다.

1. 세밀한 핀셋을 사용하여 세척된 볼륨 클립을 노출된 뇌 조직에 가볍게 놓습니다.핀셋으로 볼륨을 가볍게 눌러 다듬어진 두개골에 볼륨을 밀착시키고 두개골 아래에 박습니다.체형현미경으로 유리조각에 기포가 있는지 살펴보고 기포가 있으면 유리조각을 벗긴 후 생리식염수를 넣고 기포가 멈추지 않을 때까지 이 조작을 반복한다.

2.흡습지 끝을 사용하여 유리조각 밖으로 스며드는 여분의 액체를 빨아들이고, 귓구멍을 사용하여 두개골 표면을 가볍게 말려주고, 바깥에서 안쪽으로 순서대로 작은 붓으로 소량의 생물조직 접착제를 찍어 가장자리 피부, 전체 두개골과 두개골 가장자리에 바른다.

3. 생체조직 접착제가 마르기를 기다린 후 치과 도약봉에 406접착제를 묻혀 같은 범위에서 406접착제가 건조되기를 기다린다.

4.흡습지 끝을 사용하여 502와 치과 시멘트의 혼합물을 묻혀 소량으로 두개골 창문의 가장자리에 여러 번 바르고, 전체 조작 과정 중 풀을 유리 조각 중앙으로 흐르는 것을 절대 피해야 한다.

부분 08설치 헤드

1.502접착제를 사용하여 혼합 치과 시멘트를 용해하여 노출된 두개골을 얇고 고르게 덮고, 노출된 두개골을 완전히 폐쇄하며, 치과 시멘트가 마르지 않았을 때 헤드를 설치한다.

2. 치과 시멘트로 헤드와의 틈새나 연결이 약한 부분을 충분히 메워 헤드 안정성을 강화한다.

3. 치과 시멘트가 마르기를 기다린 후, 쥐를 보온상자에 넣고 쥐가 깨어날 때까지 기다린다.

부분 09수술 후 관리

1. 동물에게 좋은 생존 조건을 제공하기 위해 단일 케이지 사육을 권장하고 사료를 케이지 안에 뿌려 동물이 먹이를 섭취하거나 싸울 때 헤드 부품을 마찰하여 시야가 오프셋되거나 헤드 부품이 떨어지는 것을 피한다.

2. 수술 후 1-7일 동안 동물의 복강에 헤모글로빈 나트륨 용액을 1일 1회 주사한다.