U-Blot®NC 자국막(0.2μm)

U-Blot® NC 자국막(0.2μm)

U-Blot® 니트로셀룰로오스(NC) 자국막은 각종 젤 기질에서 단백질과 핵산을 옮기는 데 사용되는 순수하고 지지가 없는 니트로셀룰로오스 미공막이다.

이 전사 인쇄 필름은 다양한 분자량의 물질과 결합 할 수있는 0.2 μm 및 0.45 μm의 두 가지 공경을 가지고 있습니다.

• 0.45 μm 공경: 대부분의 단백질 샘플에 적합하며 더 높은 검사 감도를 제공합니다.

• 0.2μm 공경: 분자량이 20000 미만인 단백질에 적합하며 작은 단백질을 더 잘 흡착하고 보존할 수 있습니다.

U-Blot®질산섬유소 (NC) 인적막의 인장 강도는 다른 브랜드의 NC 막에 비해 찢어지고 찢어질 가능성이 작다. 이 막은 단백질과 핵산에 비교적 높은 결합 용량을 가지고 있어 면역 및 핵산 검사에 잘 응용될 수 있다.

1. SDS PAGE 젤로 단백질 샘플과 단백질 Marker를 분리한다.

2. 젤을 조심스럽게 재단하고 배치하며 콜드 트랜스퍼 완충액에서 젤을 5~20분간 균형잡는다.

3. 필름과 여과지를 젤 사이즈에 맞게 자른다.PVDF 막을 메탄올에 20초 동안 예습하여 투명하지 않은 흰색에서 균일한 반투명 회색으로 변한 후 초순수 물에 1~2분 정도 담가 시약 잔류를 제거한다.그런 다음 사용할 수 있을 때까지 냉전이 완충액에서 2-3 분 동안 균형을 맞춥니다.

알림 사용:

막이 촉촉하게 젖은 후에는 그것을 마르게 하지 마세요.막 부분이 마르면 (불투명한 흰색으로 변해) 다시 촉촉하게 젖어야 한다.

4.순서대로 복사장치를 조립하고, 복사클립 스펀지 패드 여과지의 미리 젖은 막을 재단하고 미리 젖은 젤 여과지 스펀지 패드 복사클립을 조립하고, 각 층마다 구김, 접힘 또는 기포가 존재하지 않도록 주의해야 한다 (절단판 등 도구를 이용하여 기포를 가볍게 눌러 각 층이 긴밀하게 붙일 수 있다)

5. 사용 중인 복사 기기의 설명에 따라 운행 조건을 설정하는 등 복사를 시작합니다.

6. 전사가 끝나면 자국막을 제거하고 초순수 물에 잠시 헹궈 젤 부스러기를 제거한다.흔적막은 바람에 말려 저장하거나 면역 검사 절차에 즉시 사용할 수 있다.

단백질 농도, 폐쇄액 및 항체 농도와 같은 단백질 자국 실험을 성공적으로 수행하는 몇 가지 핵심 요소는 다음 시나리오에서 최적화되어야합니다.

표준 면역 검사

1. 자국막이 말랐다면 메탄올에 다시 15초 동안 담그거나 투명하지 않은 흰색에서 반투명한 회색으로 색이 바뀔 때까지 다시 적셔 둔다.

2. 초순수한 물로 인화막을 1분간 헹군다.

3. 닫힌 완충액에 자국막을 넣고 1시간 동안 가볍게 저어 부화시킨다.

4. 일항을 상품화 항체 희석액, 세척 완충액 또는 폐쇄 완충액에 희석한다.

5. 자국막을 희석한 항용액에 넣고 실온에서 1시간 (또는 4°C에서 밤을 지낸다) 부화시켜 가볍게 섞는다.

6. 세탁 완충제 사용(Tween 포함®-20 계면활성제의 완충액(TBST 또는 PBST))은 자국막을 5분씩 3~5회 세탁한다.

7. 이항을 상품화 항체 희석액, 세척 완충액 또는 폐쇄 완충액에 희석한다.

8. 희석된 효소표시 이항용액에 자국막을 넣어 실온에서 1시간 동안 부화시킨다.

9. 자국막을 세탁 완충액으로 3~5회 5분씩 세탁한다.

10. 깨끗한 용기에 자국막을 넣고 해당 검사 시약을 넣는다.

11.검측에 사용된 시약설명서에 따라 조작하여 1-5분 동안 부화시킨다.

(1) HRP 또는 AP 화학 발광 시약의 경우 엑스레이 필름에 자국막을 노출하거나 이미징 시스템을 사용하여 디지털 이미지를 얻습니다.

(2) 발색 검사의 경우 시약을 넣고 신호가 나타날 때까지 기다린다.